пептидная миграция кислотой

В случае применения безводных органических растворителей, содержащих кислоту, возможна миграция ацильных групп, находящихся у определенных остатков оксиаминокислот. Так, при определении концевых групп по методу Эдмана (см. стр. 237—245), согласно которому производное пептида обрабатывают нитрометаном и НС1 [87], уксусной кислотой й НС1 [88] или диоксаном и НС1 [186] для циклизации Ы-Конце-вого остатка, установлено [2, 314], что на последующих стадиях отщепления обнаруживаются небольшие Количества Ы-концевь1Х остатков серина или треонина. В одном случае это привело к неправильному выводу о последовательности аминокислотных остатков [2, 186]. Обычно исследуемое соединение обрабатывают СвНаЫСЗ или динитрофторбензолом при pH 8,5. Если же белок находится в среде с такой величиной pH до добавления реагента, то свободные аминогруппы, появляющиеся в результате миграции ацильной группы от N к О, вновь образуют пептидные связи. Предварительную [c.222]

Ацильная миграция была положена в основу разработки химического метода специфического расщепления пептидной цепи по амидным связям, образованным остатками серина или треонина. Методика, нашедшая применение в случае фиброина шелка, состоит в обработке белка концентрированной серной кислотой. Образующиеся в результате такой обработки аминогруппы алкилируют 2,4-динитрофторбензолом и аминокислоты определяют в виде динитрофенильных производных ([660] ср. [540а]). Этот метод применяли и для изучения других белков [1787, 2573]. Действием концентрированной серной кислоты можно почти полностью превратить поли-оь-серин в соответствующий полиэфир [708]. Однако были отмечены низкие выходы, неспеци- [c.279]

Первые данные об ацильной миграции показали, что пептидные связи, образуемые аминогруппами серина и треонина, при кислотном гидролизе лабильнее других пептидных связей [52]. Более определенная информация об ацильной миграции в белках была опубликована Эллиотом [53] обрабатывая фиброин шелка концентрированной серной кислотой в течение 72 час при 21°, он получил белок, в котором произошло около 60% из числа возможных миграций при остатках серина. Количественная оценка перегруппировок в фиброине шелка основывалась на [c.128]

Легкость расщепления пептидных связей, образованных серином и треонином, известна уже давно. Еще в 1907 г. Фишер и Абдергальден [219] проводили основанный на этом факте частичный гидролиз шелка путем выдерживания его в течение нескольких суток в концентрированной серной или соляной кислоте при 16—36°. Дальнейшие исследования шелка, проведенные через 25 лет [220], обнаружили высокую лабильность пептидов N-aцeтил epинa при действии разбавленных кислот, а также показали, что легкое расщепление пептидных связей серина является результатом участия в этом процессе находящегося вблизи пептидной связи гидроксила серина, т. е. N10-перегруппировки, или N,0-миграции ацила [c.385]

Пептидные связи с участием аминогрупп серина и треонина также довольно легко гидролизуются в кислой среде при комнатной температуре в особенности чувствительны к гидролизу серинсодержащие пептиды [95]. По-видимому, механизм гидролиза включает миграцию ацильной группы и последующий гидролиз сложноэфирной связи [уравнение (2.11)]. Ы О-ацильная миграция идет в концентрированных безводных кислотах, таких, как серная, фосфорная, фтороводородная или муравьиная. Классическим реагентом, практически исключающим неспецифический гидролиз, является концентрированная [c.93]

Предполагалось, что изменение порядка добавления ФИТЦ и буфера в реактор снизит степень расщепления внутренних пептидных связей [102], так как расщепление связей происходит предположительно в основном из-за N O-ацильной миграции, в ходе которой гидроксильные группы Ser атакуют пептидные связи, образуемые аминогруппами Ser. Миграция обратима в щелочных условиях, поэтому в отсутствие ФИТЦ конкурирующее тиокарбамоилировапие исключается. Это изменение методики не дало ожидаемого эффекта, так как ФИТЦ и гептан не смешиваются с квадрольным буфером. Другой способ снижения уровня расщепления внутренних пептидных связей заключается в регулировании содержания воды в гептафторомасляной кислоте, используемой для отщепления. Высокое содержание воды способствует гидролизу пептидных свя- [c.456]