Аминоацилирование аминокислот

Накоплен большой оиыт псиользования гель-фильтрации для очистки рибосом, полисом и ферментов, участвующих в биосинтезе белка и образующих комплексы с нуклеиновыми кислотами, нуклеотидами, а также аминокислотами. Например, при исследовании аминоацилирования тРНК для отделения аминоацил-тРНК-син-тетаз и их комплексов с АТФ и аминокислотами от свободных ами- [c.141]

Специфичность р-ций, катализируемых А, очень высока, что определяет точность белкового синтеза в живой клетке Если А осуществит ошибочное аминоацилирование тРНК близкой по структуре аминокислотой, произойдет коррекция путем катализируемого той же А гидролиза ошибочных АК-тРНК до АК и тРНК В цитоплазме содержится полный набор А, кодируемых ядерным геномом, в хлоропластах и митохондриях есть свои А [c.133]

В процессе трансляции возможны ошибки в специфичности аминоацил-тРНК-синтетаз, которые присоединяют другие аминокислоты. Присутствие орнитина в некоторых арабиногалакто-протеинах может обусловливаться явлением именно этого типа. Кроме того, ошибочное аминоацилирование наблюдалось как результат структурных видоизменений аминоацил-тРНК-синтетаз или транспортных РНК [53]. [c.42]

Так, аминоацилирование тРНК начинается с реакции образования смешанного ангидрида аминокислоты и адениловой кислоты — амипоациладенилата [c.152]

Следовательно, полипептидная цепь при биосинтезе белков растет в направлении от N-конца к С-концу, а фермент, вмонтированный в рибосому и катализирующий это химическое превращение, является пептидил трансферазой. Образование полипептидов из аминоацил-тРНК представляет собой превращение сложных эфиров в амиды, которое термодинамически разрешено, т. е. для этого процесса AG < 0. Энергия Гиббса, необходимая для превращения аминокислот в пептиды, сообщается аминокислоте вне рибосомы на стадии аминоацилирования тРНК, сопряженного с гидролизом АТФ до АМФ и пирофосфата и катализируемого соответствующими аминоацил-тРНК-синтетазами (см. 4,6). [c.188]

Для аминоацилирования гидроксильной группы в нуклеозидах и нуклеотидах разработаны четыре основных метода. Исторически первый из них основан на взаимодействии нуклеозид-5 -фосфатов с тиофениловыми эфирами аминокислот в диметилформамиде При этом с выходами 10—15% образуются соответствующие 2 (3 )-0-амнноацилнуклеозид-5 -фосфаты, которые действиел фосфатазц [c.518]

Наконец, для специфического аминоацилирования цис-тляколъ-ной группировки предложен методоснованный на образовании циклических ортоэфиров аминокислот (см. стр. 529) с их последующим превращением в 0-аминоацильные производные (ср. стр. 515) [c.520]

Процесс аминоацилирования включает реакцию между аминокислотой и АТР с образованием аминоациладе-нилата затем активированная аминокислота переносится на тРНК. Как показано на рис. 5.6, при этом образуются АМР и пирофосфат. Необходимая для реакции энергия высвобождается при расщеплении АТР. Двухступенчатый механизм этой реакции подтверждается следующими данными при добавлении в реакционную смесь только фермента, АТР и аминокислоты образуется первый комплекс, а собственно аминоацилирование происходит при добавлении тРНК. [c.68]

Очевидно, что решающим моментом для безошибочного синтеза является активирование тРНК правильной аминокислотой. Как мы увидели в гл. 7, этот процесс осуществляется аминоацил-тРНК-синтетазами. Вероятно, что частота ошибки варьирует у разных ферментов, но усредненная ошибка составляет менее чем 1 на 10 актов аминоацилирования. [c.114]

Тот факт, что все операции твердофазного пептидного синтеза проводятся в одном сосуде (после присоединения первой аминокислоты к носителю) и что эти операции включают только подачу жидкости, перемешивание и удаление жидкости фильтрованием, позволяет провести автоматизацию системы. Прибор, который автоматически осуществляет все эти операции, описан в работе [81] и за последние 3 года был использован для синтеза многих пептидов. Этот прибор, будучи загружен аминоацилированным полимером и снабжен запасом растворителей, реагентов и растворов БОК-аминокислот, может работать без присмотра в течение 24 час, и за это время удлинить пептидную цепь на полимере-носителе на 6 аминокислотных остатков. После того как аминокислотные резервуары будут промыты и заполнены растворами шести новых аминокислот, прибор может продолжать синтез в течение следующих 24 час. Прибор можно отрегулировать на программу с использованием карбодиимида или на программу с применением активированных эфиров каждому типу синтеза соответствуют различные программирующие барабаны. Этот прибор обеспечивает большой выигрыш во времени, особенно при синтезе длинноцепочечных пептидов. [c.156]

Известен один случай специфического ковалентного взаимодействия между аминокислотами и нуклеиновыми кислотами, который осуществляется при аминоацилировании, или активации тРНК. Каждый вид тРНК узнается специфической аминоацил-тРНК — синтетазой, которая катализирует следующую реакцию [c.155]

Выбирают реакцию, в которой определяемое вещество может участвовать в качестве исходного субстрата, и отрабатывают ее сначала с радиоактивным препаратом вещества. Условия реакции должны быть подобраны так, чтобы включение радиоактивности в конечный продукт зависело не от концентрации радиоактивного предшественника, а только от его удельной активности. Например, можно использовать реакцию аминоацилирования тРНК радиоактивной аминокислотой, когда эта аминокислота и соответствующая синтетаза находятся в избытке, а тРНК — в недостатке. Внесение в такую реакцию дополнительного количества немеченного предшественника (здесь —аминокислоты) означает разбавление, а следовательно, снижение УА исходного субстрата. В указанных условиях это приведет к уменьшению радиоактивности конечного продукта реакции. [c.266]

Несмотря на большой потенциал, обсуждаемая группа методов TRAMPE из-за ряда недостатков пока еще не получила широкого распространения в современной белковой инженерии. Для дальнейшего внедрения этих методов требуются усовершенствования в дизайне тРНК, подвергающейся аминоацилированию, разработка более эффективных химических методов аминоаци-лирования тРНК неприродными аминокислотами, а также повышение производительности самих систем биосинтеза модифицированных белков. Работы в данном направлении не прекращаются, а, следовательно, и прогресс в этой области исследований неизбежен. [c.305]

Полагают, что аминоацилирование тРНК либо в 2 -, либо в 3 -положении остатка рибозы концевого аденозина предупреждает от ошибок при активировании стереохимически близких аминокислот (например, валина и треонина). Впрочем, если даже ошибка произошла, т. е. вместо специфической для данной тРНК аминокислоты к ней присоединилась какая-то иная, АРСаза может исправить ошибку сама, так как обладает способностью гидролизовать чуждые ей неспецифические аминоациладенилаты. [c.284]

Смотреть страницы где упоминается термин Аминоацилирование аминокислот: [c.235] [c.43] [c.44] [c.46] [c.515] [c.301] [c.224] [c.86] [c.38] [c.520] [c.534] [c.35] [c.35] [c.228] [c.346] [c.79] [c.122] [c.98] [c.258] [c.33] [c.302] [c.303] [c.11] [c.43] [c.45] [c.282] [c.283] [c.222] [c.151]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология