Полиадениловая кислота гидролиз

Данные о расщеплении остатков 1-N- и 3-N-aлкилaдeнинoв в составе РНК, ДНК и других полинуклеотидов практически отсутствуют (об образовании подобных производных при алкилировании полинуклеотидов см. стр. 364). Отмечается, что при действии на полиадениловую кислоту диэтил-( -хлорэтил)-амина в течение 48 ч при pH 7 и 37 °С с последующим кислотным гидролизом среди продуктов реакции обнаруживается производное имидазола XXXI [c.450]

Определение соотношения оснований в полученной РНК путем анализа ближайшего соседа (меченные Р субстраты) при использовании ДНК-затравки с резко отличающимся нуклеотидным составом показало, что образующаяся РНК комплементарна затравочной ДНК- При использовании олиготимидиловой кислоты в качестве затравки из смеси рибонуклеозид-5 -трифосфатов в реакции участвует лишь аденозин-5 -трифосфат с образованием полиадениловой кислоты. Аналогичным образом при использовании ферментативно синтезированного сополимера тимидиловой и дезоксиадениловой кислот (с прямо противоположной последовательностью оснований) в качестве затравки для РНК-полимеразы из Е. oli был получен продукт, содержащий лишь адениловую и уридиловую кислоты (даже в присутствии других нуклеотидов). Щелочной гидролиз (сопровождающийся переносом Р ) показал, что адениловые и урациловые остатки противостоят друг другу, а отсюда затравка определяет как состав, так и последовательность оснований в продукте. (Для частично очищенной бактериальной РНК-полимеразы затравкой могут служить полирибонуклеотиды возможно, при этом функционирует не ДНК-зависимая полимераза, а какой-то другой фермент.) [c.319]

В отличие от полиуридиловой кислоты ее метилированный аналог — поли-Ы -метилуридиловая кислота (полученная ферментативным путем из Ы1-метилуридин-5 -пирофосфата) — ни при каких условиях не образует спирализованной структуры, а также вообще не образует комплексов с полиадениловой кислотой [70[. Для вещества характерен 10/о-ный гиперхромный эффект, который не может быть следствием наличия внутренних водородных связей. Сополимеры уридиловой и Ы -метилуридиловой кислоты проявляют черты вторичной структуры и могут образовывать комплексы с адениловой кислотой, что зависит от соотношения урацила и Ы -метилурацила в цепи. Этот результат вновь позволяет предположить, что метил-урациловые остатки образуют петли, выступающие из упорядоченной комплементарно спирализованной структуры. Продукты гидролиза сополимеров рибонуклеазой соответствовали (качественно и количественно) по устойчивости к ферменту эфирам Ы -метил-уридин-З -фосфатов [70[. [c.552]

Представлены данные гидролиза полиадениловой и полинозино-вой кислот до мононуклеотидов большими количествами рибонуклеазы [118]. Возможность неферментативного катализа в этом случае полностью не исключена . Подобные результаты были отмечены для пуринсодержащих олигонуклеотидов, которые при использовании обычных методов устойчивы к панкреатической рибонуклеазе [119]. В подходящих условиях фермент обнаруживает синтетическую активность. Помимо полимеризации нуклеозид-2, 3 -циклофосфатов, рибонуклеаза может катализировать образование З -алкиловых эфиров при соответствующей обработке уридин-2, З -циклофосфата рибонуклеазой и первичными спиртами. Вторичные и третичные спирты здесь не эффективны, как и в случае химической реакции с алкоголятами натрия [120]. [c.380]

Превращения в спиральную конформацию приводят к ярко выраженному гипохромному эффекту также и в случае нуклеиновых кислот и полинуклеотидов. Сравнительно давно было показано [504], что оптическая плотность (с пиком при 259 м 1) дезоксирибонуклеиновой кислоты на 25—37% ниже оптической плотности сметанных нуклеотидов, полученных в результате каталитического щелочного гидролиза главной полимерной цепи. Однако причина этого изменения стала очевидной лишь после того, как была установлена структура двойной спирали молекулы ДНК. В этой структуре основные хромофоры располагаются параллельно друг другу под прямыми углами, и Тиноко [505] показал, что такое расположение должно привести к наблюдаемому гипохромному эффекту. Это явление наиболее удобно изучать на синтетических полинуклеотидах, цепи которых состоят из звеньев лишь одного типа. Фельсенфельд и Рич [364] обнаружили, что смешение растворов полиадениловой]и полиуриди-ловой кислот, приводящее, как известно, к образованию биспиральной структуры, сопровождается ярко выраженным понижением максимальной оптической плотности при 259 м 1. Таким образом, спектрофотометрическое титрование является удобным методом установления стехиометрии реакции (рис. 62). Позднее было показано [360], что изменения [c.175]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология