Лизоцим ферментативная активность

Оптимум pH лизоцима. Ферментативная активность лизоцима максимальна при pH 5,2 и уменьшается как при снижении, так и при повышении этого значения pH (см. рисунок). Лизоцим содержит в активном центре два аминокислотных остатка, необходимых для катализа глутаминовую кислоту в положении 35 и аспарагиновую кислоту в положении 52. Величины рК карбоксильных групп боковых цепей этих двух остатков равны соответственно 5,9 и 4,5. В каком ионизированном состоянии (протонированном или депротониро-ванном) находится каждый из этих аминокислотных остатков в оптимуме pH лизоцима Как можно объяснить форму [c.272]

Избирательная химическая модификация. Лизоцим сохраняет ферментативную активность, если все имеющиеся в нем карбоксильные группы, за исключением карбоксильных групп глутамата-35 и аспартата-52, подвергнуть этерифика-ции. Остатки 35 и 52 остаются немодифи-цированными, если этерификацию проводят в присутствии субстрата. При удалении субстрата аспартат-52 этерифици-руется (тогда как глутамат-35 остается неизменным). Модификация аспартата-52 приводит к полной инактивации фермента. Это подтверждает предположение о том, что строгая ориентация карбокси-лат-иона аспартата-52 необходима для [c.143]

Наконец, при денатурации происходит утрата белками биологической активности. Воздействие денатурирующих агентов приводит к инактивации ферментов, гормонов и вирусов. Эта потеря специфических биологических свойств считается важным критерием денатурации. Однако имеется и ряд исключений. Например, активность инсулина сохраняется при денатурации мочевиной, в растворах которой сохраняют свою активность также трипсин, папаин и пепсин рибонуклеаза и лизоцим обладают тепловой устойчивостью, и их активность слабо изменяется при кипячении в разбавленной кислоте. Наряду с потерей ферментативной активности наблюдается и изменение иммунологических свойств. Как известно, иммунологическая активность белков характеризуется двумя показателями — антигенностью, т. е. способностью возбуждать образование антител, и специфичностью. Исследование этих показателей привело к выводу, что при денатурации ряда белков происходит понижение антигенности, но сохраняется иммунологическая специфичность. [c.191]

Следует отметить, что ряд ферментов сохраняет ферментативную активность при различных воздействиях. Трипсин, химотрипсин, рибонуклеаза устойчивы при низких значениях pH (например, при pH 2). Трипсин, папаин и пепсин сохраняют активность при обработке мочевиной рибонуклеаза и лизоцим устойчивы к термической денатурации. [c.204]

Белки вирусных оболочек. Из многочисленных вирусов выделены и изучены разнообразные белки. Их молекулярные массы колеблются от нескольких тысяч до нескольких десятков тысяч дальтон. Наряду с основной функцией (защита нуклеиновой кислоты) некоторые белки вирусных оболочек необходимы для созревания вирусных частиц, обладают ферментативной активностью (нейраминидаза, лизоцим и обратная транскриптаза в составе ряда вирусов) и др. [c.94]

Зависимость скорости каталитической реакции от pH. Скорость гидролиза хитина достигает наиболее высоких значений при pH 5 (рис. 7.20). По обе стороны от этого оптимума ферментативная активность резко падает. Снижение активности при сдвиге pH в щелочную сторону обусловлено ионизацией глутамата-35, тогда как при сдвиге pH в кислую сторону-протонированием аспартата-52. Лизоцим проявляет ферментативную активность только при условии, что глутамат-35 находится в неионизированной [c.143]

Миозин является объектом всестороннего изучения практически на протяжении всего XX столетия. Еще в исследованиях А.Я. Данилевского в конце прошлого века отмечалось, что миозин обладает двойным лучепреломлением. Однако до самого последнего времени все знания о пространственной структуре ограничивались информацией о внешнем очертании молекулы и ее габаритных размерах, полученных с помощью электронной микроскопии. В частности, было известно, что миозиновая головка имеет грушевидную форму 190 A в длину и 50 A в ширину, а двойная спираль хвостового участка соответственно 1500 и 20 А [468-471]. Последние три десятилетия камнем преткновения в определении трехмерной структуры миозина, как и структуры актина, было получение качественных кристаллов белка для рентгеноструктурного анализа. И. Рейменту и соавт. удалось получить требуемые кристаллы, использовав не совсем обычный в белковой кристаллографии прием - N-метилирование боковых цепей всех остатков Lys миозинового фрагмента I в мягких условиях [472]. Для того чтобы убедиться в том, что метилирование не привело к радикальному изменению конформационных и ферментативных свойств белка, авторы подвергли подобной химической модификации лизоцим и не обнаружили после этой процедуры существенных нарушений в трехмерной структуре фермента. Кроме того, были проверены кинетические свойства метилированного миозина SI [473]. Он сохранял каталитическую активность, хотя и наблюдались отклоне- [c.125]

Из разрушенного смесью фенол — вода нуклеопротеина TMV Анде-рер [55] смог иыде.лить белок TMV (из фенольного раствора). Выделенный белок снова соединялся с нуклеиновой кислотой TMV с образованием кристаллического нуклеопротеина TMV. Это показывает, что белок не денатурируется в жидком феноле необратимо. Кикхефен [56] недавно показал, что различные ферменты — рибонуклеаза, химотрипсин, трипсин, лизоцим и др.— после растворения в жидком феиоле можно количественно выделить сходным способом без потери ими ферментативной активности. Некоторые ферменты даже выдерживают нагревание в фенольном растворе до 80—100°. [c.331]

Субстрат для иммуноанализа с помощью лизоцима представляет собой суспензию клеток М. 1Шеиз. Разрушение клеточных стенок бактерий приводит к уменьшению мутности, которую измеряют по пропусканию при 436 нм. Присоединение антител к конъюгату [лизоцим — производное лекарственного вещества] ингибирует ферментативную активность, что, вероятно, обусловлено стерическим исключением субстрата (КиЬеп-з1е1п е а1., 1972). Поскольку лекарственное вещество из образца конкурирует за антитела с лекарственным веществом. [c.38]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология