Папаин

Единственная химическая реакция, которая здесь будет рассматриваться, —это гидролиз. Он может осуществляться как ферментативным, так и химическим путем. Горячая разбавленная минеральная кислота медленно расщепляет амидные связи с образованием с учайных фрагментов, в конечном итоге приводя к простым аминокислотам. Контролируемый кислотный гидролиз разрушает белок с образованием смеси пептидов. Возможен также ферментативный гидролиз протеолитические ферменты очень разнообразны по своему специфическому действию. Некоторые из них, такие, как папаин или фицин, фактически неспецифичны и расщепляют белки до свободных аминокислот, в то время как другие — трипсин, химотрипсин и пепсин— гидролизуют только особые связи в белковых молекулах (ср. мальтаза, эмульсин и т. д., разд. 17.6 и 17.7). Так, пепсин расщепляет амидную связь между карбоксильной группой ди-карбоновой ь-аминокислоты и аминогруппой ароматической ь-аминокислоты при условии, что вторая карбоксильная кислотная группа дикарбоновой аминокислоты не связана. Химотрипсин менее специфичен и расщепляет амидную связь с карбонильной стороны ароматической ь-аминокислоты. Трипсин гидролизует амидные связи, включающие карбоксильные груп- [c.296]

Рис. 77. Синергистическая активация профлавином гидролиза этилового эфира М-бензоил-1-аргинина, катализируемого папаином [34], если концентрация активатора, М

Влияние pH на гидролиз п-нитрофенилацетата, катализируемый папаином. Условия опыта 25 С ионная сила Ь,1М (буферные растворы) [c.235]

Само собой разумеется, растения также содержат ферменты, расщепляющие белки (например, папаин и другие). [c.398]

Рис. 107. Приблизительная оценка значений констант диссоциации ионогенных групп активного центра папаина в реакции гидролиза п-нитроанилида М-бензоил-Ь-аргинина

Общим для большинства ферментативных систем является то, что субстрат связывается с активным центром двумя или большим числом точек. В качестве примера можно указать на сорбцию молекулы синтетического субстрата на активном центре папаина (стр. 19). Углеводородный фрагмент сорбируемой молекулы связывается с белком за счет гидрофобных взаимодействий. Дополнительную ориентацию ей придают 3 водородные связи (пунктир) с аминокислотными остатками белка 01у-66 и Азр-158. [c.23]

Гидролиз папаином и-нитрофениловых эфиров [27] [c.49]

Другой пример — реакции, катализируемые папаином (см. схему на стр. 19). Нуклеофильная атака карбонильной группы субстрата остатком Суз-25 усилена за счет общеосновного катализа со стороны Н1з-159 и общекислотным катализом под действием 01п-19. [c.65]

В таблице 15 приведены данные по влиянию профлавина на кинетические параметры гидролиза этилового эфира N-бензоил-глицина, катализируемого папаином [13]. Исходя из предположения о двухстадийном механизме ферментативной реакции, предложить кинетическую схему реакции папаина в присутствии профлавина и вычислить возможные кинетические и равновесные параметры реакции. [c.95]

В таблице 7 приведена рН-зависимость каталитической константы скорости гидролиза беизилового эфира N-бензилокси-карбонил-Ь-лизина, катализируемого папаином [6]. Определить рК ионогенной группы фермент-субстратного комплекса, контролирующей скорость реакции. [c.229]

В таблице 20 приведена рН-зависимость гидролиза п-нитрофенилацетата, катализируемого папаином [13]. Определить [c.235]

Рис. 108. Иллюстрация подбора теоретической кривой рН-зависи-мости, описывающей экспериментальные данные по влиянию pH на гидролиз, катализируемый папаином. Пунктирная кривая рас считана с использованием значений рКа=4,5 рКь=8.4 ej/Ks = =251 М -сек (найденных из рис. 107). Сплошная кривая рассчитана с использованием значений рКо.= 4,3-, рКь=8,2- hlK = = 251 М -сек-

Число белков, химическое строение которых полностью рас-шифровано растет с каждым годом. При сопоставлении полученных результатов обнаружились два чрезвычайно интересных факта прежде всего оказалось, что хотя у разных представителей животного мира строение определенного гормона очень сходно, однако все же существуют четкие видовые отличия. Так, например, инсулин, выделенный из организма кита и свиньи, совершенно тождествен, в то время как в инсулине лошади одна из 51 аминокислот заменена на другую. С другой стороны выяснилось, что носителем биологической активности может быть не вся белковая молекула, а определенная часть ее. Так, в растительном ферменте — папаине, построенном из 180 аминокислотных остатков, можно [c.335]

Синтетические аминокислоты представляют собой рацемические смеси. Для разделения рацематов могут быть использованы классические методы, например образование диастереомерных солей эфиров аминокислот с оптически активными кислотами. Разделение рацематов природных аминокислот часто осуществляется ферментативными методами, что может быть иллюстрировано следующим примером (Грин-штейн). При взаимодействии Ы-ацетил-О, -фенилаланина с толуиди-ном в присутствии протеолитического фермента папаина (из растений папа1 я — дьпшого дерева) при 37° и pH = 6,5 образуется только толуи-дид -формы, который количественно выпадает в осадок, тогда как Ы-ацетил-Ь-фенилаланин остается в растворе [c.360]

Это одна из стадий в процессе гидролиза белков до аминокислот. Папаин расщепляет пептидные связи, окруженные только специфическими заместителями Н и К" и никакие другие. Фермент и его субстрат (вещество, на которое он способен воздействовать) имеют такие трехмерные конфигурации, которые идеально подходят друг к другу, что способствует эффективному переносу электронов с одной связи на другую. Всякое [c.345]

Активность папаина скорее обусловлена остатком цистеина, чем гистидина (Смит, 1954—1958). Для максимальной протеолитической. активности чистый (кристаллический) фермент должен быть активирован природным активатором (вероятно, глутатионом) или цистеином, HaS, H N и т. д. [c.715]

Как уже упоминалось, существует значительная перекрестная специфичность для а-химотрипсина, папаина и субтилизииа. Результаты подобных исследований хиральной специфичности, видимо, прольют свет на новые аспекты эволюционной дивергенции протеаз млекопитающих, бактерий и животных. Кроме того, активация зимогена, как правило, — это промежуточный этап как в биосинтезе протеаз, так и в самых разнообразных биологических процессах, например коагуляция крови, комплементарные реакции, выработка гормонов, фибриполпз и т. д. Такой точный и ограниченный протеолиз ферментами с широкой первичной специфичностью также показывает решающую важность третичной структурной специфичности протеаз в их взаимодействиях с природными субстратами [107]. [c.238]

Эти реакции напоминают переацилирование, при котором синтезированный акцептор обладает некоторыми свойствами трипсина (узнает NHз-гpyппy) и папаина (имеет остаток цистеина в активном центре). [c.277]

Депротеинизация достигается также добавлением сульфата аммония и некоторых органических растворителей [23]. Основная опасность здесь заключается в возможности адсорбции или окклюзии следовых компонентов осадком. Эффективность операции нужно конфолировать в отношении биоматериала и определяемых веществ. Обычно влияние окклюзии сводят к минимуму не добавлением осаждающих агентов к пробе, а наоборот [24]. В последнее время для осаждения белков все чаще применяют ацетонитрил, особенно удобный в тех случаях, когда раствор далее анализируют методом ВЭЖХ Для предотвращения разложения белков следует избегать нафевания, либо использовать мягкие условия их разрушения с помощью ферментов [25]. С этой целью используют трипсин, папаини другие протеиназы. Ткани печени гидролизуют алкалазой, а [c.204]

При конкурентном гидролизе и этанолизе и-нитрофенил-гиппурата под действием папаина конечными продуктами реакции являются гиппуровая кислота и этилгиппурат [9]. Исходя из соотношения между концентрациями этих продуктов в реакционной смеси (табл. 13), вычислить отношение констант скоростей этано-лиза и гидролиза kjk . [c.153]

В реакции полимерных или олигомерных субстратов, где наблюдается несколько разных по своей природе сорбционных эффектов, ускорение реакции за счет стабилизации (концентрирования) переходного состояния может быть огромным, как, например, при гидролизе сложноэфирной связи в пептидных п-нитрофенилкарбоксилатах, катализируемом папаином. Ферментативный процесс идет через промежуточное образование ацилфермента, образующегося при ацилировании субстратом остатка Суз-25 (см. схему на стр. 19, где X — это п-нитро- [c.47]

В работе [13] изучалось активирующее влияние красителя профлавина на гидролиз этилового эфира Ы-бензоил-Ь-аргини-на, катализируемый папаином (табл. 14). Исходя из двухстадий- [c.94]

Влияние профлавина на кинетику гидролиза этилового эфира N-бeнзoил-L-apгининa, катализируемого папаином. Условия опыта pH 6,6 [c.95]

Влияние профлавина на гидролиз этилового эфира N-бензоилглицина, катализируемый папаином. Условия опыта pH 6,6 25° С [c.95]

Зависимость концентрации гиппуровой кислоты (ГК) в реакционной смеси от концентрации этанола после окончания сольволиза п-нитрофенилгиппурата, катализируемого папаином. Условия опыта pH 6,0 40° С [c.153]

В таблице 3 приведены результаты кинетического исследования ацилирования папаина ж-нитрофениловым эфиром карбо -бензоксиглицина [10] в условиях [E]oS>[S]o. При изучении этой реакции в стационарном режиме было найдено, что величина кажущейся константы Михаэлиса равна (1,894=0,17) -10 М, а вели-чина кат //Ст(каж) равна (1,15+0,08) -105 сек-. Принимая трехстадийную схему протекания ферментативной реакции (9.7), найти, [c.191]

Из данных табл. 3 можно найти, что реакция ацилирования папаина и-нитрофениловым эфиром карбобеизоксиглицина (в условиях [Е]о [5 о) действительно описывается кинетической за- [c.205]

Скорость необратимого ингибирования папаина Ь-1-хлор-3-тозиламидо-4-фенил-2-бутаноном зависит от pH среды [6]. На основании данных табл. 8 определить рК ионогенной группы, контролирующей инактивацию фермента, а также найти истинное значение константы скорости инактивации. [c.229]

В таблице 18 приведена рН-зависимость гидролиза фенилового эфира М-бензилоксикар бонил-Ь-аланина, катализируемого папаином [10]. Определить значения р/С ионогенных групп свободной формы фермента, контролирующих реакцию. [c.234]

В работе [19] молекулы папаина (мол. вес 25000) иммо-билизовывали сшиванием их друг с другом с помощью глута- [c.275]

Протеазы (пептидгидролазы) катализируют гидролитическое расщепление белков и полипептидов, т. е. разрыв связи —СО—NH—. Обычно протеазы разделяют на протеиназы и пептидазы, из которых первые катализируют расщепление белков, вторые—расщепление полипептидов и дипептидов. Однако такие протеиназы, как папаин и некоторые другие, гидролизуют пептидные связи не только в белках, но и в различных пептидах. [c.120]

С другой стороны, выяснилось, что носителем биологической активности оказывается не вся белковая молекула, а определе1шая часть ее. Так, в растительном ферменте папаине, построенном из 180 аминокислотных остатков, можно отстричь до двух третей его полипептидной цепи без заметного влияния на биологическую активность. Факты подобного рода позволяют глубже понять природу каталитического действия ферментов, а следовательно, приближают возможности создания синтетических ферментов, с помощью которых можно надеяться упростить получение многих нужных человеку органических веществ, решить важные проблемы медицины и т. д. [c.343]

Ферменты, как правило, идеально приспособлены Энзимы - эт(5 для катализа какой-либо одной реакции, например, специфические пищеварительный фермент папаин — катализатор отализаторы белковой С N— [c.345]

Бергманн и Френкель-Конрат показали (1937), что папаин катализирует не только расщепление, но и синтез пептидной связи [c.715]

Основы неорганической химии для студентов нехимических специальностей (1989) -- [ c.296 ]

Органическая химия. Т.2 (1970) -- [ c.715 ]

Химический энциклопедический словарь (1983) -- [ c.422 ]

Аминокислоты Пептиды Белки (1985) -- [ c.167 , c.168 , c.365 ]

Проблема белка (1997) -- [ c.510 ]

Принципы структурной организации белков (1982) -- [ c.108 , c.109 , c.233 , c.276 ]

Молекулярная биотехнология принципы и применение (2002) -- [ c.168 ]

Химия углеводов (1967) -- [ c.571 , c.577 , c.580 , c.581 ]

Принципы структурной организации белков (1982) -- [ c.108 , c.109 , c.233 , c.276 ]

Биоорганическая химия (1987) -- [ c.9 , c.21 , c.47 , c.181 , c.212 , c.608 ]

Большой энциклопедический словарь Химия изд.2 (1998) -- [ c.422 ]

Установление структуры органических соединений физическими и химическими методами том 2 (1967) -- [ c.395 , c.417 ]

Органическая химия (1963) -- [ c.428 ]

Аффинная хроматография (1980) -- [ c.320 ]

Молекулярная биология клетки Том5 (1987) -- [ c.21 , c.22 , c.81 ]

Новые методы анализа аминокислот, пептидов и белков (1974) -- [ c.367 ]

Общая микробиология (1987) -- [ c.346 ]

Биологическая химия Издание 4 (1965) -- [ c.137 ]

Основы биологической химии (1970) -- [ c.89 , c.431 ]

Органическая химия Издание 3 (1977) -- [ c.280 ]

Основы органической химии 2 Издание 2 (1978) -- [ c.126 ]

ЭПР Свободных радикалов в радиационной химии (1972) -- [ c.309 ]

Органическая химия (1972) -- [ c.427 ]

Биохимия растений (1968) -- [ c.202 ]

Органическая химия (1976) -- [ c.259 ]

Химия органических лекарственных препаратов (1949) -- [ c.150 , c.335 ]

Химия и биология белков (1953) -- [ c.293 , c.363 , c.367 , c.371 , c.384 ]

Стереодифференцирующие реакции (1979) -- [ c.192 , c.193 ]

Биохимический справочник (1979) -- [ c.120 ]

Органическая химия (1972) -- [ c.427 ]

Пептиды Том 2 (1969) -- [ c.208 ]

Особенности брожения и производства (2006) -- [ c.477 ]

Курс органической и биологической химии (1952) -- [ c.34 , c.340 , c.345 ]

Катализ в химии и энзимологии (1972) -- [ c.43 , c.49 , c.50 , c.65 , c.244 ]

Стереохимия соединений углерода (1965) -- [ c.79 ]

Курс органической химии (0) -- [ c.398 ]

Белки Том 1 (1956) -- [ c.192 , c.193 ]

Начала органической химии Кн 2 Издание 2 (1974) -- [ c.701 ]

Основы органической химии Ч 2 (1968) -- [ c.80 ]

Биология Том3 Изд3 (2004) -- [ c.90 ]

Полимеры медико-биологического назначения (2006) -- [ c.283 ]

Химия биологически активных природных соединений (1970) -- [ c.60 , c.75 , c.81 , c.196 , c.205 , c.206 , c.314 ]

Биохимия Издание 2 (1962) -- [ c.181 , c.182 , c.192 , c.520 ]

Ферменты Т.3 (1982) -- [ c.2 , c.3 , c.4 , c.22 , c.130 ]

Проблема белка Т.3 (1997) -- [ c.510 ]

Химия протеолиза Изд.2 (1991) -- [ c.50 , c.63 ]

Электрофорез в разделении биологических макромолекул (1982) -- [ c.225 ]

Практическая химия белка (1989) -- [ c.158 , c.159 , c.227 , c.228 ]

Биофизическая химия Т.2 (1984) -- [ c.381 ]

Основы ферментативной кинетики (1979) -- [ c.32 ]

Основы биохимии (1999) -- [ c.114 , c.131 ]

Сборник Иммуногенез и клеточная дифференцировка (1978) -- [ c.71 ]

Структура и механизм действия ферментов (1980) -- [ c.24 , c.90 , c.97 , c.326 , c.373 , c.376 ]

Модифицированные аминокислоты и пептиды на их основе (1987) -- [ c.214 , c.215 ]

Биохимия Т.3 Изд.2 (1985) -- [ c.166 , c.239 ]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология