Пиридины разделение на последовательных колонках

Если по условиям опыта необходимо разделенные в колонке вещества перевести в фильтрат, применяют растворители, вытесняющие адсорбированные вещества из колонки. Хорошими вытеснителями на полярных адсорбентах являются спирты, эфиры, пиридин и др. Часто практикуется последовательное промывание колонки с полученной на ней хроматограммой рядом растворителей с постепенно увеличивающейся десорбционной способностью, например промывают колонку петролейный эфиром, затем бензолом, этиловым эфиром, хлороформом и т. д. При этом последовательно вытесняются отдельные компоненты смеси. [c.21]

Фиг. 104. Разделение 14 производных пиридина при использовании непоглощающего носителя на последовательно соединенных неполярной и полярной колонках [6].

Для разделения полиаминов наиболее пригодным ионитом, по-видимому, является биорекс 70 (400 меш). Применение его описано в нескольких статьях [4, 6, 7]. Колонки (7X0,9 см) с этим сорбентом присоединяются к обычному прибору для автоматического анализа аминокислот. Элюирование осуществляют со скоростью 2 мл/мин последовательно несколькими буферными растворами. Первый буферный раствор представляет собой 0,438 М раствор ацетата натрия с pH 7,5. После того как 100 мл первого раствора пройдет через колонку, его немедленно заменяют вторым буферным раствором, представляющим собой 0,5 М раствор ацетата пиридина с pH 4,4. Времена удерживания полиаминов в указанной выше системе опубликованы в работе [8]. Способ Морриса [9] предусматривает внесение небольших изменений в состав буферных растворов. После введения пробы в колонку смолу начинают промывать первым буфером (0,33 М раствором ацетата пиридина с pH 5,7). После того как через колонку пройдет 100 мл первого буфера, промывание продолжают вторым буфером (0,38 М раствор ацетата натрия с pH 4,4) [c.270]

Так, нри хроматографическом разделении деасфальтированпой пенсильванской нефти на силикагеле (28—2С0 меш) с использованием колонки длиной 125 см и диаметром 2,5 см последовательное применение гексана, циклогексана, бензола, ацетоно-бензольной смеси и пиридина в качестве десорбентов позволяет сконцентрировать в гексансвой и ацетоно-бензольной фракциях ванадий-порфириновый и в бензольной фракции — никель-порфириповый комплексы. [c.119]

Дезактивация колонки является одной из основных проблем в жид-костно-адсорбциошюй хроматографии, для которой она более важна, чем для других видов жидкостной хроматографии. Высокоактивная поверхность аддарбента может прочно удерживать очень полярные соедашения, присутствующие в виде следов в образце или в подвижной фазе. В результате при многократном использовании колонки наблюдается уменьшение значений к образца, пики становятся несимметричными, уменьшается число теоретических тарелок и разделение постепенно ухудшается, В этом случае становится необходимой регенерация колонки. Регенерация колонки может быть проведена путем последовательной промьшки ее растворителями с постепенно увеличивающейся полярностью [24], например мети-ленхлоридом, метанолом и водой, ёсли на колонке разделяли кислые или основные соединения, то к метанолу или воде добавляют соответственно пиридин или уксусную кислоту. За стадией промывки должна следовать стадия кондиционирования колонки, заключающаяся в удалении с адсорбента полярных растворителей и воды. Выполняют эту операцию п)ггем промьшки колонки растворителями в обратной последовательности метанол, метиленхлорид, гексан. Причем объемы растворителей должны быть большие, чтобы обеспечить полное удаление полярных веществ с адсорбента. Обычно этот объем в 10-20 раз больше вместимости колонки. [c.51]

Хроматография гидролизатов проводилась при +4° С на колонке с фосфоцеллюлозой 2,4x25 см со скоростью 60 мл/час. Химотрипсиновый гидролизат лизоцима фракционировался с возрастающим градиентом pH аммонийно-ацетатного буфера от 3,4 до 9,0 и возрастанием концентрации от 0,02 до 0,3 М. Пепсиновый гидролизат фракционировался с возрастанием pH пиридин-ацетат-ного буфера от 3,9 до 5,4 и возрастанием концентрации от 0,05 до 0,45 М. Фракционирование по такой схеме дает очень хорошее групповое разделение пептидов (до 3—6 пептидов в одном пике). Сопоставление таких групп, полученных действием разных ферментов, позволяет составить полную аминокислотную последовательность исходного белка. [c.185]

После того как гидролизат пропустят через колонку, ее промывают ()0 л воды для удаления солей и в-ксилозы. Затем последовательно элюируют колонку пятью 8-литровыми порциями 5%-ного спирта, собирая отдельно каждую порцию элюата. Вслед за этим колонку промывают пятью 8-литровыми порциями 15%-ного спирта и, наконец, двумя 8-лит-ровыми порциями 50%-ного спирта. Все полученные фракции элюата (каждую отдельно) упаривают досуха и проводят приблизительное определение количества олигосахаридов в каждой из них методом нисходящей хроматографии на бумаге в системе н-бутанол — пиридин — вода (6 4 3, по объему) в течение 22—25 час. Для разделения высших олигосахаридов требуется другая система (н-бутанол пиридин — вода, 5 5 3) и большее время ( 90 час). Обнаружение сахаров проводят с помощью реактива Толлепса полоски опрыскивают, сушат и нагревают 2 мин при 100° в сушильном шкафу. [c.449]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология