Заполнение колонок смолой

Мы приводим общую процедуру заполнения колонки смолой. Ее можно использовать в различных описанных ниже методиках с учетом небольших изменений скорости, величины pH и ионной силы буферов, а также температуры колонки. [c.57]

Заполнение колонки смолой [c.60]

Заполнение колонок смолой [c.226]

Для заполнения колонки смолу суспендируйте в PBS промойте колонку для удаления нековалентно связавшегося антигена. Для предотвращения возможного загрязнения элюируемых антител свободным антигеном проводите элюцию буфером с высокой ионной силой (например, содержащим [c.167]

ИЛИ же к неэффективному проникновению реагентов и растворителей в поры носителя, то перед заполнением колонки смолы разбавляют стеклянными шариками (30-кратное разбавление по массе) (см. разд. 12.5.2). [c.380]

Кетоны и спирты, подвергаемые действию кислоты без удаления воды, имеют невыгодные константы равновесия с точки зрения синтеза кеталей [26]. Например, кетоны и спирты в соотношении 1 4 при медленном пропускании через колонку, заполненную ионообменной смолой дауэкс-50, содержащей сильные кислотные группы, дают степени превращения, приведенные в таблице на стр. 585, [27]. [c.584]

Подготовка анионита и заполнение колонки. 2 г анионита суспендируют в 50 мл воды и дают отстояться. Жидкость с осадка декантируют. Для переведения смолы в С1-форму осадок заливают 20—30 мл [c.186]

Заполнение колонки смо/Юй. Стеклянная колонка с внутренним диаметром 35 тм и длиной 800 мм снабжена оттянутым внизу концом диаметром 5 мм, па который надета резиновая трубочка с винтовым зажимом. В суживающуюся часть колонки помещают фарфоровую или стеклянную пластинку с отверстиями и кусочек гигроскопической ваты. Смачивают вату дистиллированной водой и в колонку заливают суспензию КУ-2 в воде. Воде дают стекать, не допуская разрыва столба жидкости. Когда КУ-2 полностью перенесена в колонку, доливают воду до верха колонки и вставляют в нее резиновую пробку с делительной воронкой, заполненной дистиллированной водой. Зажимом регз лируют скорость вытекающей воды (1,5 мл в одну минуту), проверяя pH. В случае кислой реакции смолу в колонке промывают водой до отрицательной реакции по конго. [c.132]

Заполнение колонки. Заполнение малой колонки для определения основных аминокислот. Около 15 мл смолы смешивают с [c.176]

Смолу регенерируют так же, как и перед заполнением колонки. [c.196]

Заполнение колонки. В колонку размером 1,8 х 150 см, снабженную термостатирующей рубашкой, заливают немного буферного, раствора pH 3,1. Смолу суспендируют в том же буферном растворе подогретом до 50° С, и после тщательного перемешивания освобожденную от воздуха под вакуумом суспензию загружают в колонку Следует заполнять колонку таким образом, чтобы над смолой всегда оставалось немного буферного раствора, обеспечивающего свободное оседание частичек смолы. Заполнение заканчивают, когда уровень смолы окажется на 10 см ниже верхнего конца термостатирующей рубашки. [c.198]

Перед заполнением колонки необходимо деаэрировать обменник, т.е. удалить воздух. Смолу в стакане смешивают с водой и помещают в эксикатор, из которого затем откачивают воздух. По другой методике смолу. [c.125]

В процессе заполнения и при последующих операциях необходимо исключить проникание воздуха в колонку. Присутствие воздуха может привести к образованию каналов в слое обменника и к ухудшению его качества. В заполненной колонке вода или другой соответствующий раствор всегда должны находиться выше верхнего уровня обменной колонки. Для заполнения колонки очень мелкими частицами смолы в высокоскоростной жидкостной хроматографии рекомендуются специальные приемы. [c.126]

Для определения сульфатов применяют ионообмен--ную колонку (рис. 12), заполненную катионитовой смолой КУ-1, КУ-2, КУ-23, КУ-2-16, дауэкс-50 и т. п. В нижнюю часть колонки вкладывают тампон из стеклянной ваты, удерживающий слой катионита, но позволяющий свободно протекать раствору. На тампон помещают катионит, который сверху для предотвращения вспучивания при наливании раствора прикрывают стеклянной ватой и стеклянными бусами. [c.53]

Катионит перед заполнением колонки обрабатывают следующим образом сначала его заливают водой, выдерживают двое суток (для набухания), а затем воду удаляют, набухшую смолу заливают 2н. раствором соляной кислоты и оставляют на одни сутки. По истечении этого времени кислоту сливают, зерна катионита многократно промывают водой до нейтральной реакции. [c.54]

Ионообменные колонки, заполненные катионитовой смолой КУ-1, КУ-2, дауэкс-50 и т. п. (подготавливаются так же, как и при анализе сульфатов, см. стр. 53). [c.111]

Тщательно отмытый катИонит загружают в хроматографическую колонку. На дно хроматографической колонки помещают тампон из стеклянной ваты и вливают в нее смесь-ионита и" дистиллированной воды, постепенно спуская лишнюю воду через кран. Когда слой ионита достигнет 8—12 см, а слой воды над ионитом — 3—4 см, закрывают кран. При заполнении колонки необходимо следить, чтобы в слое ионита не было пузырьков воздуха. Зная объем набухшего ионита, можно вычислить массу смолы в каждой колонке. [c.218]

Ионообменная хроматография основана на способности полимеров, имеющих электрически заряженные группы, взаимодействовать с активной подложкой — ионообменной смолой. Через колонку, заполненную такой смолой, пропускают раствор полимера. Молекулы полимера распределяются между подвижной жидкой фазой и межфазной поверхностью в соответствии с их ионными адсорбционными силами, зависящими от электрического заряда и размера макромолекулы. [c.26]

Удаление ионных примесей. Ионообменный метод является очень эффективным для удаления катионов, мешающих определению како-го-либо аниона. В гравиметрическом определении серы в виде сульфата бария многие катионы, такие как железо(III), натрий и аммоний, в значительной степени соосаждаются, что приводит к большим погрешностям. Однако если раствор пробы сульфата пропустить через ионообменную колонку, заполненную сульфированной смолой в ее водородной (Н) форме, то можно заместить все катионы эквивалентными количествами иона водорода и затем получить желаемый осадок сульфата бария в отсутствие мешающих ионов. [c.594]

Вид ионообменной хроматографии, используемой в каждом отдельном случае, определяется природой разделяемых кислот и формой, в которой анализируемый образец вводится в колонку. Ситуация наиболее простая, если в образце присутствуют только кислоты. В таком случае подходящий метод может быть выбран быстро и непосредственно. Если, однако, в анализируемом образце присутствуют некоторые количества других веществ, их целесообразно удалить перед анализом. Если эти примеси обладают неионогенной природой, удаление должно быть выполнено путем связывания кислот на колонке, заполненной анионообменной смолой, обладающей основным характером. Неионогенные вещества проходят через колонку, а затем из колонки вытесняются кислоты. Они образуют фракцию, которую далее можно разделить селективными методами. Такое предварительное разделение необходимо почти во всех случаях, когда требуется выделение кислоты из природных веществ или из сложных смесей, образующихся при промышленном получении кислот. Благодаря молекулярной сорбции неионогенные вещества также могут удерживаться на колонке и влиять на разделение кислот. [c.152]

Производят заполнение колонки катионитом. Заполнение проводят при открыто.м внешнем кране (на выходе колонки ставят стакан-приемник), вводя взвесь смолы в воде небольшими порциями, 306 [c.306]

Для плотного заполнения колонки к ней с помощью шлифа присоединяют высокую стеклянную трубку-насадку с воронкой, заполняют всю систему водой и выливают в воронку суспензию смолы. Жидкость из колонки во время заполнения не должна вытекать. Высота столбика адсорбента 20—23 см. Для предохранения верхнего слоя ионита от размывания используют тампон стеклянной ваты. После заполнения колонки над ионитом всегда должен быть слой жидкости. [c.99]

Хорошее разделение аминокислот зависит в первую очередь от ионообменной колонки. При приготовлении колонки, которая давала бы высокую степень разделения, важно позаботиться о том, чтобы не допустить каких-либо изменений, которые могут привести к нарушениям и погрешностям в работе колонки. Имеется две основных причины плохого заполнения колонки воздух, попавший в смолу, и примеси в смоле на верхней части колонки. Одной из наиболее обычных причин, мешающих правильной работе колонки, является накопление воздуха на поверхности смолы и образование воздушных карманов. Иногда пузырьки газа продвигаются вниз по колонке и застревают внизу на фильтре, удерживающем столб ионообменной смолы. Это заметно ограничивает поток буфера и размазывает пик любой аминокислоты, которая выходит из колонки. Скопившийся воздух иногда выгоняется из колонки во время цикла регенерации гидроокисью натрия. В случае скопления заметного количества газа на смоле (вызывающего образование воздушных карманов) может нарушиться не только разделение, но и значительно повыситься рабочее давление на колонке. Вторая причина — наличие загрязнений, плесени или белковоподобного материала— не позволяет соответствующим образом наслоить или нанести пробу на колонку, в результате чего получаются размазанные или несимметричные пики и, кроме того, увеличивается рабочее давление. [c.40]

Заполнение колонки производят с помощью насоса при скорости подачи буфера 68 мл/ч и температуре 55 °С. После того как смола осядет, избыток буфера осторожно отбирают, не нарушая слоя смолы, и добавляют новую порцию суспензии. Эту операцию повторяют до тех пор, пока не будет достигнута необходимая высота столбика смолы —56 см для длинной и 5,5 см для короткой колонки. Каждая колонка регенерируется 0,2 н. едким натром с последующим уравновешиванием стартовым буфером. [c.58]

Получают от преподавателя исходный раствор, представляющий собой смесь 0,1 М растворов азотнокислого кальция и азотнокислого стронция с добавлением активных растворов, содержащих Са и 5г из расчета, чтобы объемная уде.льная активность раствора составляла 1—2-10 имп/мин-мл по измерениям в стандартных условиях на р-счетчике. Все подготовительные операции (сборку прибора для ионного обмена, заполнение колонки смолой и установление необходимой скорости фильтрования) проводят аналогично описанному в разделе 1 (смолу перед опытом промывают дистиллированной водой). Фильтрование исходного раствора через колонку со смолой проводят со скоростью 0,4—0,5 мл/мин. Профильтровав весь исходный раствор (радиометр не должен регистрировать активность в фильтратах), колонку со смолой промывают 10—15 жл дистиллированной воды затем пропускают 1,5 М раствор уксуснокислого натрия, Фильтраты собирают и из каждого с помощью пипетки со шприцем отбирают по две пробы (по 0,5 мл) в измерительные чашки, упаривают и измеряют активность с помощью торцового счетчика. В тех же геометрических условиях измеряют активность аликвотной части исходного раствора, содержащего Са. Таким образом контролируют полноту вымывания кальция. [c.308]

Перед заполнением колонок смолу промывают на воронке Бюхнера 4 н. НС1 для удаления ионов щелочноземельных металлов. После промывания водой через слой пропускают 2 н. NaOH до сильно щелочной реакции фильтрата. Затем смолу промывают водой и буферным раствором pH 4,25 (не содержащим детергент и тиогликоль), пока pH промывных вод не станет приблизительно равным 4. Для окончательного удаления мелких частиц, в том числе и образовавшихся при гидравлическом фракционировании, смолу суспендируют в 6—8 объемах буферного раствора и частицам дают осесть в течение 1—1,6 час. [c.131]

При динамическом методе ПОЕ определяется с помощью хроматографических колонок. Через колонку, заполненную ионообменной смолой, пропускают раствор электролита и регистрируют зависимость концентрации поглощаемого иона в выходящем растворе (элюате) oi объема прошедщего раствора (выходная кривая). [c.52]

Синтезируют золь гидроксида железа методом гидролиза Fe l i. Для этого к 170 мл дистиллированной воды, нагретой до кипения, медленно приливают 30 мл 2 %-ного раствора РеСЬ, смесь доводят д<з кипения и затем охлаждают при комнатной температуре. Для удаления образовавшейся хлороводородной кислоты золь пропускают через колонку, заполненную слабоосновной смолой в ОН-форме. [c.96]

К 100—200 мг РНК добавляют 0,75 н. NaOH из расчета 1 мл щелочи на 100 мг препарата и проводят гидролиз при 37°С в течение 18 ч. После гидролиза суспензию охлаждают и для удаления ионов Na+ тотчас наносят на колонку (0,5x3 см), заполненную катионообменной смолой в Н+-форме. Элюат собирают, колонку промывают трижды 3 мл воды. Фракции объединяют и упаривают на роторном испарителе. Осадок растворяют в минимальном объеме воды и фракционируют рибомононуклеотиды методами электрофореза или хроматографии. [c.180]

Заполнение колонки при одноколоночном методе. При одноколоночном методе анализа в системе двух растворов эти растворы отличаются по концентрации Na" B 4 раза. В системе трех буферных растворов первый и третий растворы отличаются по концентрации Na" в 8 раз. Столь большие различия могут влиять на объем смолы в колонке, если заполнение ее вести обычным способом. Чем выше молярность раствора, тем меньше набухание и соответственно объем смолы в колонке. Поэтому если при заполнении колонки был использован первый низкомолярный буфер, а при последующей обработке применялся буферный раствор более высокой молярности, то объем смолы в колонке может заметно уменьшиться, что при повторном цикле пропускания растворов приведет к очень сильному спрессовыванию. Во избежание этого заполнение колонки проводят следующим образом. [c.177]

Методика. Пробу костей прокаливают и 1,000 г золы растворяют в соляной кислоте. Раствор профильтровывают и выпаривают досуха. Остаток растворяют в 200 см 2%-иого раствора ЭДТА (аммониевая соль), в растворе устанавливают pH 4,8 и пропускают его со скоростью 1—2 см /мин через колонку, заполненную ионообменной смолой Dowex 50-Х8. [c.184]

В классическом варианте заполнения колонок ионообменными смолами метод ИОХ наиболее интфесен для решения препаративных задач. Переход от классической схемы ИОХ к аналитическому варианту метода — ионной хроматограф потребовал решения целого комплекса проблем. Во-первых, ориентируясь на наиболее универсальный и технически простой способ неселективного определения концентрации разделенных ионов в растворе — измерение [c.206]

Сорбенты, выпускамые промышленностью, — силикагель, перму-тит, хроматографическая окись алюминия, различные ионообменные смолы и т. п. бывают загрязнены при их изготовлении продуктами реакционной среды и имеют различный гранулометрический состав от мелкой пыли до величины зерна 2—Многие сорбенты, особенно ионообменные смолы, обладают свойством набухать, что необходимо учитывать при заполнении колонки. Прежде чем поместить сорбент в хроматографическую колонку, его подвергают предварительной подготовке измельчают крупные и отсеивают мелкие фракции, определяют величину насыпного веса, влажность, набухаемость, отмывают от посторонних примесей. [c.328]

Но характеру и последовательности изменения параметров в данном случае можно предполагать, что сорбционная активность среды после первого контакта с нефтью значительно ослабилась. В статическом состоянии, имитирующем взаимоотношение нефти с сорбирующей средой в условиях залежи, сорб1фуются, по-видимому, одновременно различные компоненты нефти, в том числе и смолы. Но в конце пути, где при первом опыте с продвижением нефти отмечено усиление сорбции асфальтенов, сорбция их из нефти при повторном заполнении колонки ослаблена, что и обнаруживается повышением величин оптической плотности нефти на данном участке колонки. [c.62]

Отличен от предыдуш,их метод промышленного анализа ненасыщенных полиэфиров, в котором двухосновные кислоты (метиловые эфиры) и гликоли разделяют на одной колонке. Смолу сначала отделяют от растворителя (стирола) переосаждепием из иетролейного эфира [15], твердую смолу переэтерифицируют метоксидом натрия в метаноле в течение 18 час. Образовавшийся раствор гликолей и метиловых эфиров неносредственно анализируют газо-хроматографически на колонке (336x0,6 см), заполненной 20% силикона 8Г-96 на флуоропаке-80, при температуре 110, 150, 180° С или при программированном повышении температуры от 110 до 180° С со скоростью 8 град мин. [c.200]

Используя градиентное элюирование 0,4 М раствором муравьиной кислоты на колонке 12x1 см, заполненной дауэксом 1-ХВ (200—400 меш), удалось отделить микромолярные количества хинолиновой кислоты от других пиридиновых производных. Элюированную кислоту определяли фотометрически при 254 нм после декарбоксилирования до никотиновой кислоты [57]. Посредством элюирования муравьиной кислотой были успешно разделены на колонке, заполненной модифицированной смолой дауэкс 1-Х4 и дауэкс 1-Х8, некоторые уроновые и альдобиуроновые кислоты [58]. [c.177]

Высокоскоростные хроматографические разделения выполняют на колонках, заполненных ионообменной смолой с регулируемой поверхностной пористостью, по методу, разработанному Кирклендом [65]. Такие анионообменные смолы состоят из твердых сферических кремнистых частиц с твердой, непроницаемой сердцевиной, которая окружена оболочкой с мелкими неглубокими порами толщиной около 2 мкм. Ионообменной средой является полимер метакрилата, содержащий сильноосновные тет-раалкиламмониевые группы. [c.179]

При этом высота столбика смолы должна быть 26 см. Для заполнения колонки используют 0,2 н. натрийцитратный буфер pH 3,545 (0,20 М по цитрату). Условия анализа описаны в разд. 1.6.6. [c.61]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология