Растворы серийное разведение

Благодаря простоте применения, доступности и отсутствию больших материальных затрат на их проведение вышеназванные методы занимают ведущее место в оценке биологической активности антибиотиков. Однако эти методы имеют ряд недостатков. Так, метод серийных разведений связан с длительностью анализа, полученные результаты недостаточно точны. Для методов, связанных с диффузией в агар, также характерны длительность процесса анализа, зависимость результатов от свойств антибиотика (растворимость, молекулярная масса и др.), определенная чувствительность к компонентам агаровой среды, трудность автоматизации. Результаты турбидиметрических методов нередко зависят от примесей, способных угнетать или стимулировать рост тест-организма эти методы неприменимы для анализа окрашенных или мутных растворов. [c.176]

Стеклянные пипетки с капельницами для приготовления серийных разведений снабжены конусом Луе-ра, посредством которого капельная насадка надевается на пипетку, как игла на шприц. Капельные насадки представляют собой пластмассовый конус с вделанной в него стальной трубочкой, конец которой оформлен таким образом, что при заполнении пипетки изотоническим раствором хлорида натрия, буферным раствором, а также белковым раствором с [c.115]

Для использования моноклональных антител в изучении белковых антигенов важно знать, с одной и той же или разными антигенным и детерминантами (эпитопами) антигена связываются полученные антитела. Эпитопную специфичность антител определяют методом их конкурентного связывания. Антитела одного клона конъюгируют с пероксидазой (с. 317). Берут 96-луночный микропланшет для ИФА и сорбируют в лунках антиген, как обычно (с. 320). После тщательной отмывки в каждую из 12 лунок вносят по 75 мкл культуральной жидкости того же или других клонов или раствор очищенных антител — 100 мкг/мл (рис. 42). Все остальные лунки содержат 50 мкл фосфатного буфера с 1%-ным БСА. Делают серийные разведения антител, перенося по 25 мкл раствора из каждой лунки в соседнюю (рис. 42) на 5—6 лунок. К каждой лунке добавляют 10 мкл меченных пероксидазой автител в концентрацию 20 мкг/мл. Инкубируют 2—4 ч при комнатной температуре при постоянном встряхивании. После тщательной [c.322]

Приготовление серийных разведений антигена. В зависимости от того, сколько сыворотки имеется в распоряжении исследователя, готовят серию двукратных, четырехкратных или десятикратных разведений антигена. При подготовке серии двукратных разведений антигена в штатив помещают 16 вассермановских пробирок в первую наливают 0,5 мл неразведенного антигена, а во все остальные — по 0,5 мл 0,9%-ного раствора КаС1. Во вторую пробирку вносят 0,5 мл неразведенного антигена и после перемешивания 0,5 мл смеси переносят пипеткой в третью пробирку. [c.121]

Определение чувствнтельности бактерий к антибиотикам методом серийных разведений. Данным методом определяют минимальную концентрацию антибиотика, ингибируюшую рост исследуемой культуры бактерий. Вначале готовят основной раствор, содержащий определенную концентрацию антибиотика (в мкг/мл или ЕД/мл) в специальном растворителе или буферном растворе. Из него готовят все последующие разведения в бульоне (в объеме 1 мл), после чего к каждому разведению добавляют 0,1 мл исследуемой бактериальной суспензии, содержащей 10в—10 бактериальных клеток в 1 мл. В последнюю пробирку вносят 1 мл бульона и 0,1 мл суспензии бактерий (контроль культуры). Посевы инкубируют при 37°С до следующего дня, после чего отмечают результаты опыта по помутнению питательной среды, сравнивая с контролем культуры. Последняя пробирка с прозрачной питательной средой указьшает на задержку роста исследуемой культуры бактерий содержащейся в ней минимальной ингибирующей дозой антибиотика (табл. 7). [c.77]

Исследуемые клетки — обычно эритроциты Xenopus — промывают и осаждают центрифугированием. 5 мкл осадка ресуспендируют в 9 мл раствора, имеющего состав 0,5% БСА, 25 мг/л ПВП, 50 мкл/л твина 20 в ЗФР для амфибий. Готовят серийные разведения соответствующих антисывороток и суспензию вносят по одной капле в лунку панели пастеровской пипеткой. После инкубации в течение 1 ч при комнатной температуре панели осторожно центрифугируют (800 об/мин, 1 мин, центрифуга Mistral 4L) и наклоняют их под углом 45°. При этом осадок неагглютинированных клеток сползает со дна лунок. Лунки, в которых клеточный осадок сохраняется на дне в виде [c.496]

Методика постановки РТПГА. В лунки полистироловых планшетов или агглютинационные пробирки вносят по 0,025 мл 1%-го раствора нормальной сыворотки кролика и делают серийные 2-кратные разведения исследуемого материала. Затем во все лунки добавляют по 0,025 мл иммунной сыворотки, планшет встряхивают и оставляют на 30 мин при 37 °С или на 1 ч при комнатной температуре. Далее во все лунки добавляют по 0,025 мл антигенного диагностикума, встряхивают планшет и оставляют на 2 ч, после чего учитывают результаты. [c.63]

Благодаря использованию минимального количества АГ (2 нейтрализующие дозы) реакция высокочувствительна. Количество нейтрализующих доз в антигенном препарате определяют с помощью РНГА, при этом делают серийные 2-кратные разведения АГ в 1%-м растворе нормальной сыворотки кролика и в лунки вносят антительный эритроцитарный диагностикум. Нейтрализующей дозой АГ считают его максимальное разведение, дающее полное склеивание сенсибилизированных эритроцитов. [c.63]

Метод серийного центрифугирования оказывается наиболее приемлемым для отмывания небольщих (до 20%) концентраций глицерина. Он заключается в последовательном разведении суспензии клеток растворами понижающейся осмотичности и центрифугировании препаратов после каждой процедуры разведения с удалением надосадочной жидкости. После отмывания эритроциты разводят в соотнощении 1 1 одним из взвешивающих растворов, разработанных в Центральном научно-исследовательском институте гематологии и переливания крови [c.70]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология