Цис-транс-тест

На карте показано относительное расположение 60 генов, идентифицированных к 1965 г., и основные физиологические свойства мутантов, дефектных по этим генам. Каждый ген идентифицирован по наличию по крайней мере одной аш-мутации, способной давать комплементацию в цис-транс-тесте саж-мутациями во всех ранее идентифицированных генах. Для некоторых генов, изображенных в виде темных сегментов, указана минимальная длина, определенная на основании частот рекомбинаций между мутантными участками одного и того же гена. Большая длина гена 34 обусловлена еще не вполне понятным явлением повышенной вероятности генетических обменов в этой области. Размеры этого гена, следовательно, завышены. В прямоугольниках указаны либо дефекты синтезов, обусловленные мутациями в соответствующих генах, либо те дефектные компоненты фагов, которые наблюдаются в лизатах соответствующих мутантов. [c.313]

Фиг. 169. Подробная карта фага X. Каждая заглавная буква обозначает один ген, выявленный в цис-транс-тесте с условно-летальными мутациями, дефектными по указанным на карте функциям.

Рис. 6.8. Цис-транс-тест как пример комплементационного теста г//-мутантов. Если фенотипическое проявление пары исследуемых мутаций различно в цис-и транс-положениях, то эти мутации затрагивают одну и ту же генетическую функцию. Если же фенотипы тождественны, то затрагиваются разные генетические функции.

Комплементационный тест. Генетический тест для установления принадлежности двух мутаций к одному гену цис-транс-тест. [c.309]

Цистрон. Последовательность нуклеотидов в ДНК, определяющая единичную генетическую функцию, выявляемую в цис-транс-тесте последовательность нуклеотидов, кодирующая единичную полипептидную цепь. [c.317]

Сравнение рис. 15.1 и 15.6 убеждает в том, что для рецессивных мутаций цис-транс-тест сводится к функциональному тесту [c.379]

Рис. 15.6. Схема цис-транс-теста. Крестики — мутации

Когда с помощью цис-транс-теста были исследованы фаги с разными мутациями в области гП, то стало ясно, что существуют два гена—гИА и гИВ, причем они обнаруживались лишь по комплементации в цис-транс-тесте. Для обозначения участка ДНК, идентифицируемого как генетическая единица, Бензер предложил термин цистрон. Для больщинства целей, термины ген и цистрон—синонимы, и оба эти термина достаточно свобЬдно используются в бидхнмической литературе [c.250]

Использование бензеровского комплементационного анализа для других участков генома Т-четных фагов показало, однако, что получаемые результаты не всегда столь однозначны, как это было при исходном определении генов А и В в области гН. Распределение ат-мутантов по генам было однозначным, однако Эдгар и Эпштейн обнаружили ряд 1з-щ-таций, которые, судя по их положению на генетической карте и по результатам функционального цис-транс-теста с тесно сцепленными ат-иу-тантами, должны относиться к одному и тому же гену, но тем не менее дают в цис-транс-тесте хорошую комплементацию. Аналогичные случаи внутригенной комплементации были вскоре обнаружены в работах по установлению генетической единицы функции в геноме бактерий и других организмов. [c.314]

Существование внутригенной комплементации на самом деле не снижает основной ценности определения гена, данного Бензером. Ее легко объяснить, исходя из представления о четвертичной структуре белков. Как мы уже видели в гл. IV, многие белки осуществляют свою биологическую функцию лишь в том случае, если они находятся не в виде отдельной полипептидной цепи, а в составе четвертичной структуры, образованной из двух или большего числа полипептидных цепей. Так, мы уже упоминали, что Р-галактозидаза представляет собой агрегат, состоящий нз четырех идентичных полипептидных цепей. Рассмотрим теперь /5-мутацию в гене, определяющем белок, который проявляет свою ката-.литическую активность, лишь находясь в форме комплекса, построенного из четырех идентичных полипептидных цепей. В этом случае мутантный фенотип 1з, очевидно, возникает в результате появления в одном из участков мутантной полипептидной цепи неподходящей аминокислоты. Вследствие этого интервал температур, в котором агрегат, состоящий из четырех цепей, может принимать физиологически активную четвертичную структуру, оказывается суженным. Это значит, что, хотя при пермиссив-ной температуре 25 °С такой агрегат сохраняет свою активность, при 42 °С он денатурирует. Допустим теперь, что в одной и той же клетке присутствуют две копии гена, определяющего рассматриваемый белок, и, как в цис-транс-тесте, эти копии несут разные мутации. Тогда должны возникнуть гибридные агрегаты мутантного белка, из четырех полипептидов которого часть синтезирована под контролем одного, а часть — под контролем другого /5-мутантного гена. В этом случае существует возможность, что интервал температур, в котором гибридный мутантный агрегат образует функционально активную структуру, окажется шире интервала температур для образования функционально активных агрегатов, состоящих только из одного типа мутантных полипептидов. Это значит, что два разных замещения аминокислот в первичной структуре белка, вызванные двумя й-мутациями, могут привести к взаимной компенсации. В результате такой компенсации агрегат из мутантных полипептидов, так же как и белок дикого типа, сохраняет стабильность в широком интервале температур. [c.314]

Описанный выше метод носит название цис/транс-тест или тест на комплементацию ГфункщЕОнальный тест на. алделизм -Яер.]. С его помощью определяют группу комплементации как протяженную единицу, все части которой должны быть дикого типа и находиться в одной хромосоме. Единичная мутация в любой части может нарушить функцию. Эта генетическая единица получила название цистрон. Согласно этой терминологии, две мутации в одном и том же цистроне не могут комплементи- [c.19]

Фенотипическое различие между цис- и транс-конфигурациями двух мутаций служит основой для генетического теста на обшрость функции, аналогичного цис-транс-тесту, впервые использованному Эдвардом Левисом при исследовании функциональных взаимоотношений псевдоаллелей различных генов дрозофилы. Например, мутации Star S) и asteroid (ast) определяют форму и строение глаз дрозофилы. Первоначально считалось, что эти мутации аллельны, поскольку в мейозе они [c.168]

Учитывая важность цис-транс-теста для определения функциональной генетической единицы, Бензер предложил для обозначения групп комплементации г//-мутаций термин цистрон . С тех пор употребление термина цистрон в качестве синонима гена (как единицы функции) стало общепринятым. [c.170]

С. Бензер попытался ревизовать и понятие ген . Для отнесения двух мутаций к одной или разным единицам функции он предложил использовать так называемый цис-транс-тест, изобретенный Е. Льюисом. Согласно этому тесту мутации попарно испытывают в гетерозиготе в двух конфигурациях цис — когда обе мутации в гибриде происходят от одного родителя, и транс — когда они поступают в гибрид от разных родителей (рис. 15.6). Согласно С. Бензеру, если цис- и транс-гетерозигота имеют одинаковый (дикий) фенотип, то мутации затрагивают разные единицы функций, а если цис- и транс-гетерозиготы разного фенотипа (цис — дикий, а транс — мутантный), то мутации затрагивают одну единицу функции, которую он предложил называть цистроном. [c.379]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология