Множественная фаговая инфекция

Ключом к проникновению в область генетики вирусов послужили результаты опытов по множественной фаговой инфекции. Как оказалось, родственные фаги могут одновременно размножаться в одной и той же клетке. Большую роль сыграло использование родственных фагов, различающихся двумя или большим числом генетических признаков — маркеров. Фаговое потомство, полученное в результате такого инфицирования, состояло из четырех (или большего числа) типов частиц — результат, который можно объяснить только генетической рекомбинацией [90, 198, 199]. Таким образом, принцип классической генетики — обмен родительским генетическим материалом — казалось бы требующий полового способа размножения, — был распространен на фаги, а затем и на бактерий. [c.212]

Пленочные препараты, фиксированные таким способом, могут быть очень полезны при изучении изменений в клетках, подвергшихся множественной обработке в агаре или в жидкой культуре, например, во время фаговой инфекции [5]. Следует обратить внимание на то, что во время фиксации нуклеоплазма реагирует на наличие в среде катионов, избыток которых приводит к конденсации хроматина [6]. [c.52]

Для продолжения опытов по поиску СХС была отобрана группа из 37 комбинаций фаг-бактерия (оставшихся после исключения из 284 давших адсорбцию 187 комбинаций, завершающихся литическим развитием фагов и 60, отличавшихся низким уровнем адсорбции). На отобранной группе проверялась возможность преодолеть ограничение роста при высоких множественностях инфекции. В результате этих исследований наблюдался лизис трех штаммов. Однако, как было показано, это было связано не с литическим развитием фагов, а с проявлением некоторых функций проникших в клетки молекул фаговой ДНК [16]. [c.132]

Условия, обеспечивающие оптимальное инфицирование реципиентного штамма, зависят от используемой системы фаг — хозяин особое внимание при этом уделяется содержанию ионов в среде и способам выращивания реципиента. В большинстве систем перед посевом с целью отбора трансдуктантов проводят предварительную адсорбцию фага на реципиентных клетках. Поскольку большинство фагов в трансдуцирующем лизате обладает инфекционностью и способно убить реципиентные клетки, применяются методы, позволяющие избегать инфекции и гибели трансдуцированных клеток. Легче всего этого достигают, если используют реципиент, лизогенный по трансдуцирующему фагу, так как лизогенные клетки иммунны к суперинфицированию гомологичным фагом. Можно также использовать такое количество фаговых частиц, чтобы на одну клетку приходилось меньше одной фаговой частицы. Этим сводится к минимуму возможность множественного инфицирования. Затем, по прохождении этапа предварительной адсорбции, добавляют либо фаговую антисыворотку, либо, если фаг нуждается для адсорбции в двухвалентных катионах, хелатобразующий агент. С помощью обоих последних приемов в основном предотвращают инфицирование потенциальных трансдуктантов фагом, высвободившимся из реципиентных клеток, которые были подвергнуты продуктивной инфекции. [c.83]

Для количественной характеристики процесса адсорбции фага используют два метода. Хлороформный метод —- простой и надежный, но он применим лишь в отношении фагов, устойчивых к хлороформу. Обработка хлороформом убивает бактерии, разрушая липид-содержащую мембрану. После смешивания бактерий и фага (адсорбционная смесь) и по прошествии определенного времени (время адсорбции) смесь (3—5 мл) энергично встряхивается с несколькими каплями хлороформа. После отделения хлороформа (отстаиванием) определяют количество фага, оставшегося в смеси (неадсорбированный фаг). Рассчитав долю пеад-сорбированного фага по отношению к его исходному количеству в адсорбционной смеси, определяют уровень адсорбции (%) фага в данных условиях. При втором методе определения адсорбционная смесь центрифугируется для осаждения бактерий неадсорбированный фаг остается в надосадочной жидкости. Этими процедурами можно определять долю инфицированных и неинфи-цированных бактерий, множественность инфекции (среднее количество фаговых частиц на одну клетку) и т. д. [c.174]

Общая трансдукция оказалась следствием включения фрагментов ДНК Е. ali, зараженной фагом Р1, в инфекционные частицы бактериофага. Причем такие частицы вообще не содержат или содержат очень мало фаговой ДНК. Вследствие этого трансдуктан-ты, возникающие при множественности инфекции, равной 1 (одна частица на одну клетку), оказываются нелизогенными и не обладают иммунитетом к фагу Р1. Дефектность трансдуцирующих частиц Р1 подтверждает и то, что трансдукцию могут осуществлять даже вирулентные мутанты Р1. Это показывает, что транс-дуцирующие частицы действительно не способны инициировать нормальный цикл развития фага. Иначе клетки, зараженные вирулентным мутантом фага Р1, должны были бы погибнуть. [c.210]

Прикрепление бактериофага Т4 к Е. oli служит показательной моделью межклеточной адгезии. На этом примере хорошо видно значение множественных слабых взаимодействий, за счет которых клетки перемещаются друг относительно друга до тех пор, пока не установятся фиксированные связи. При инфицировании фагом Т4 его частицы сначала прикрепляются к поверхности Е. соН кончиками своих шести хвостовых волокон. Затем они движутся по поверхности до тех пор, пока не обнаружат подходящее место для прикрепления своей базальной пластинки. Когда базальная пластинка надежно закреплена, чехол отростка ( хвоста ) сокращается и фаговая ДНК впрыскивается в бактерию (рис. 14-15). Начальное взаимодействие хвостовых волокон с клеточной поверхностью является определяющим для инфекции фаги, у которых отсутствуют хвостовые волокна, не способны инфицировать клетки. [c.274]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология