Седиментационная граница при ультрацентрифугировании

При равновесном ультрацентрифугировании с использованием двухсекторной ячейки для образования границы седиментации обычно уровень растворителя в одном секторе устанавливают чуть-чуть выше уровня раствора в другом секторе. Простые соли при этом распределяются в центробежном поле практически одинаково в обоих секторах, никак не отражаясь на седиментационной диаграмме, так что оптика Рэлея регистрирует только распределение концентрации исследуемого вещества. На фиг. 23 показаны фотографии седиментационных диаграмм, отвечающие схемам, приведенным на фиг. 22. Фотография, приведенная на фиг. 23, Л (результаты опыта с ячейкой для искусственного образования границы), сделана через некоторое время после наслаивания, чтобы были яснее видны интерференционные полосы в области границы. На фотографиях, сделанных сразу после ее образования, полосы были бы расположены очень тесно. В дальнейшем они расходятся за счет диффузии.) [c.104]

Расчет коэффициентов седиментации по данным экспериментов более общего характера, проведенных методом скоростной седиментации, с учетом диффузии требует более сложного решения уравнения Ламма. Первое решение полного уравнения Ламма было предлон<ено Факсепом [13]. Такое решение представляло собой первое приближение и имело ограниченную применимость для практических целей, и все же оно послун ило основой для проведения седиментационного анализа на ранних этапах развития метода ультрацентрифугирования. Расчет, проведенный с помощью уравнения Факсена в предположении независимости от концентрации как седиментации, так и диффузии, показал, что при седиментации растворенного вещества одного типа (в отличие от седиментации в отсутствие диффузии с резкой ступенчатой границей) образуется размытая граница примерно гауссовой формы. Образование подобной диффузной границы седиментации не зависело от положения самой границы и от концентрации впереди границы седиментации. Метод расчета Факсена свидетельствует о том, что путем исследования методом скоростной седиментации формы диффузной границы седиментации можно определить коэффициент диффузии. Для градиентной кривой, полученной Факсе-ном в результате решения уравнения Ламма, отношение площади к высоте А1Н) можно записать в виде [c.225]

По ранним представлениям, в случаях, когда равновесие устанавливается быстрее, чем общая длительность ультрацентрифугирования, такая система, как пА должна давать один пик со свойствами, промежуточными между свойствами мономера и полимера. Система А В - -С должна давать два шлирен-пика, поскольку, если считать, что скорость седиментации этих компонентов падает в последовательности А, В, С, медленный пик будет соответствовать легкой молекуле С, в то время как вторая (быстрая) граница благодаря присутствию В будет отвечать также движению некоторого количества образующегося тяжелого компонента А. На деле, однако, все обстоит значительно сложнее. При седиментационном исследовании а-химотрипсина при визкой ионной силе и pH 7,9 Мэсси, Харрингтон и Хартли [11] получили странные результаты, не укладывающиеся в описанную выше простую схему. Теоретическое объяснение этих результатов было предложено Джил-бертом [12], впоследствии более подробно разработавшим свой подход к решению трудной задачи об обратимых системах, из которых центробежное поле постоянно забирает тяжелые компоненты [13, 14]. Джилберту удалось объяснить результаты Мэсси и сотрудников, исходя из системы с одним пиком для димеров и из системы с двумя пиками для гексамеров. Он вычислил долю гексамеров, совпадающую с экспериментальными данными, и точно предсказал значение 5 как функцию концентраций обоих компонентов. В своих рассуждениях [c.157]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология