Двойная диффузия в геле

Фиг. 24. Оценка результатов реакции двумерной двойной диффузии в геле (подробное описание см. в тексте).

Двойная диффузия в геле (ДДГ) Иммуноэлектрофорез (ИЭФ) Двумерный ИЭФ [c.31]

Агар — для двойной диффузии в геле (ДДГ) и радиальной иммунодиффузии. Некоторыми марками можно заменить более дорогую агарозу (см. приложение). [c.199]

Двойная диффузия в геле (ДДГ) [c.201]

Двойная диффузия в геле — это единственный в своем роде, уникальный и простой метод изучения антигенных взаимосвязей между молекулами и специфичности антител. Он имеет два главных недостатка а) относительно низкую чувствительность по сравнению с непрямыми методами, например реакциями агглютинации и иммуноферментными тестами, и б) при исследовании смесей антигенов методом ДДГ часто наблюдаются перекрывающиеся и накладывающиеся друг на друга линии преципитации. В этом отношении ДДГ уступает ИЭФ (разд. 4.1), в котором антигены разделяются в геле иа Начальной электрофоретической стадии. [c.207]

Особое значение приобрела комбинация иммунодиффузии с электрофорезом, названная методом иммуноэлектрофорезаН]. С его помощью можно одновременно электрофоретически разделить компоненты белковой смеси и получить их иммунологическую характеристику. Простота осуществления, высокая разрешающая способность и, наконец, очень малое количество материала, требуемое для анализа, ставят иммуноэлектрофорез в ряд наиболее ценных методов аналитического изучения белков. Соединение иммуноэлектрофореза с двойной диффузией в геле позволяет выявлять идентичность определенных компонентов двух белковых смесей [10]. [c.19]

МЕТОД ДВУМЕРНОЙ ДВОЙНОЙ ДИФФУЗИИ В ГЕЛЕ ПО УХТЕРЛОНИ [17] [c.131]

Попытки разработать методы иммунодиффузии, позволяющие количественно оценивать содержание антигенов и антител, делались неоднократно. Одна группа таких методов основьгоается на двойной диффузии в геле по Ухтерлони (см. стр. 131), другая — на измерении скорости диффузии и степени мутности полос преципитации при иммуноэлектрофорезе (стр. 137). Пока эти методы еще не получили широкого распространения. [c.157]

Реакция преципитации в агаре (двойная диффузия в геле по Оухтерлони) для обнаружения антител (анти-HBs) в сыворотке крови больного вирусным гепатитом В. [c.247]

Самым распространенным методом определения антигена и антител является преципитация в агаре (реакция двойной диффузии в геле по Оухтерлони). Преимуществами данной реакции являются относительная простота, высокая специфичность, отсутствие ложноположительных и ложноотрицательных ответов, небольшой расход материалов и возможность определения полноты антигенной идентичности. Недостатками реакции являются низкая чувствительность, длительность получение предварительного ответа через 24 ч, а окончательного—лишь спустя 48—72 ч. Для исследования берут кровь больного в количестве, необходимом для получения 0,3 мл сьшоротки. Реакции ставят на пластинах, в 1% агаре, в котором вырезают лунки для ингредиентов реакции. В качестве тест-системы используют стандартный австралийский антиген и соответствующую специфическую антисьшоротку. Учет реакции проводят через 1—3 дня по появлении дуг преципитации между лунками. [c.248]

Помимо выявления аитигенной неоднородности метод двойной диффузии в геле позволяет сравнить антигенное строение нескольких веществ и выявить наличие сходства и различий между ними. Как всякий иммунологический метод, метод двойной диффузии в геле имеет ограничения, основное из которых — спектр антител в исследуемой антисыворотке. Так, в ранних работах при сравнительном изучении антигенного строения IgG кролика и его Fab- и F -фрагментов использовали антисыворотку против IgG кролика, полученную от коз. Исследователям не было тогда известно, что животные этого вида не образуют практически антител против детерми-Бант Fab-участка молекулы. Поскольку при использовании этой антисыворотки F -фрагмент давал реакцию антигенной идентичности с нерасщепленной молекулой IgG, сделали ошибочное заключение об отсутствии в РаЬ-участке видоспецифических антигенных детерминант. Ошибка была исправлена после исследования фрагментов молекулы IgG с помощью антииммуногло- булиновых сывороток, полученных от животных других видов, в антисыворотке осла против IgG кролика содержится примерно равное количество антител против антигенных детерминант Fab- и F -участком. На этом примере можно еще раз убедиться в необходимости использования при антигенном анализе антисывороток, полученных от животных разных видов (см. гл. 2). [c.255]

Двойная диффузия в геле (ДДГ) Диффузия реагентов с образованием видимых преципитатов в геле Поликлональные, преци-питирующие 10 мкг/мл АГ 5—20 мкг/мл АТ Позволяет оценить степень сложности АГ, а также степень родства и специфичность антител. Прост и требует минимального оборудования. Низкая чувствительность, большая продолжительность [c.24]

Определение а-Г-глобулииа проводилось мнкромето-дом двойной диффузии в геле с помощью тест-системы на a-f-глобулин (Г. И. Абелев, С. Д. Перова и др., 1963), состоящей из кроличьей антисыворотки к сыворотке новорожденных мышей, истощенной плазмой взрослых мышей, и из сыворотки новорожденных мышей. Оценка силы реакции проводилась путем сравнения полученных полос преципитации со стандартной шкалой двукратных разведений антигена. Аналогично проводились определения сывороточного альбумина в среде. В качестве тест-системы использовались кроличья антисыворотка к сыворотке взрос лых мышей и очищенный альбумин, взятый в оптимальном разведении. [c.44]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология