Коферментов иммобилизация

Выше уже отмечалось, что живые иммобилизованные клетки осуществляют как одностадийные, так и многостадийные процессы, даже сложнейшие процессы биосинтеза антибиотиков, ферментов и коферментов. В отличие от свободных клеток они подвергаются специфическим воздействиям уже на стадии иммобилизации. Особое влияние оказывает процесс полимеризации акриловых мономеров. Рассмотрим более детально особенности поведения клеток в полиакриламидном геле (ПААГ). [c.231]

При использовании систем иммобилизованных ферментов с коферментами приходится решать две задачи собственно регенерацию кофермента и его удержание в реакционной системе. Последнее обычно осуществляется путем ковалентной иммобилизации коферментов на полимерных носителях. Для регенерации разработано несколько подходов, суть которых отражается следующей схемой [c.141]

Рассматривая ферменты как специфические химические преобразователи, переводящие определяемое вещество в форму, детектируемую физическими или химическими методами, удалось придумать и разработать новый класс сенсоров, для которых характерна чувствительность к биологическим соединениям. Перспективным путем повышения селективности и чувствительности и расширения возможностей этих устройств является комбинирование различных ферментов, например эстераз, дегидрогеназ и оксидаз с детекторами-полярографическими, кондуктометрическими, потенциометрическими, акустическими и оптическими. Б первых ферментных электродах ферменты физически удерживались на поверхности сенсора или в непосредственной близости от нее. Позже были предложены методы химической иммобилизации, осаждения и другие. Коферменты также физически или химически закрепляются на поверхности сенсора. Перевод фермента в нерастворимую форму как способ увеличения его времени жизни позволяют избежать осложнений, связанных с осмотическими явлениями в коллоидных растворах, особенно когда в ферментном электроде используется проницаемая для определяемого компонента мембрана В идеальном случае ферментный биосенсор должен работать непосредственно в неразбавленной цельной крови, подобно газовым и рН-электродам, в свое время произведшим революцию в анализе. [c.11]

В заключение этого раздела, посвященного иммобилизации, мы должны упомянуть иммобилизацию коферментов [34]. Одной из проблем, возникающих при использовании биосенсоров со свободно диффундирующими коферментами, является утечка последних из сенсора. Возможный способ решения этой проблемы-иммобилизация кофермента в растворимой или нерастворимой форме. [c.113]

Помимо единичных иммобилизованных ферментов, в хим. анализе используют соиммобилизованные ферментные системы, позволяющие повышать чувствительность и селективность определения. При этом все чаще применяют иммобилизованные клетки микроорганизмов, содержащие естественный набор ферментов. Преимущество такой иммобилизации состоит в том, что исключаются стадии вьщеления, очистки и иммобилизации ферментов, увеличивается их стабильность. Иммобилизацию используют не только для ферментов, но и для субстратов, коферментов и эффекторов. [c.79]

По Дж. Порату (1974), идеальные материалы, используемые для иммобилизации ферментов, должны обладать следующими основ-ньп и свойствами нерастворимостью высокой химической и биологической стойкостью значительной гидрофильностью достаточной проницаемостью как для ферментов, так и для коферментов, субстратов и продуктов реакции способностью носителя легко активироваться (переходить в реакционноспособную форму). [c.86]

В качестве примера иммобилизации ферментов и использования их в промышленности приводим схему непрерывного процесса получения аминокислоты аланина и регенерации кофермента (в частности, НАД) в модельной системе. В этой системе исходный субстрат (молочная кислота) подается при помощи насоса в камеру-реактор, содержащий иммобилизованные на декстране НАД и две НАД-зависимые дегидрогеназы лактат- и аланиндегидрогеназы с противоположного конца реактора продукт реакции —аланин—удаляется с заданной скоростью методом ультрафильтрации. [c.164]

Можно использовать иммобилизацию субстратов для выделения соответствующих ферментов или групп ферментов. В случае субстратов с низкой молекулярной массой, для того чтобы исключить стерические помехи носителя, вводятся спейсерные фрагменты между носителем и субстратом. Так, для того чтобы выделить ферменты, обладающие сродством к остатку АМР различных коферментов, могут быть использованы производные следующей структуры [c.247]

Недостатки использования сопряженных субстратов в процессах регенерации НАД связаны с тем, что, во-первых, равновесие реакции альдегид спирт сильно сдвинуто в сторону спирта (что гребует высоких концентраций сопряженного субстрата) и, во-вторых, выделение основного продукта из смеси затруднено. Применение известных методов иммобилизации ферментов и коферментов будет способствовать преодолению возникшей проблемы. [c.142]

В последнее время в качестве реагента для химической регенерации НАД применяется сравнительно дешевый флавин-мононуклеотид (ФМН). Использование этого вещества обусловлено тем, что флавиновые коферменты участвуют в процессах регенерации НАД in vivo. Иммобилизация ФМН на полиэти-ленимине приводит к существенному увеличению скорости окисления НАДН. [c.143]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология