Хлоропласты способы выделения

Ниже описаны два способа выделения хлоропластов, которыми пользуются в нашей лаборатории. Все растворы и аппаратуру следует заранее охладить на льду. Выделение необходимо проводить как можно быстрее (ом. также гл. 5). [c.40]

Данная работа представляет собой обзор результатов, полученных в наших работах [5—8] количественный анализ спинового обмена макромолекул [7, 8] проводится с использованием нового теоретического подхода. Вначале излагаются способы определения величин Тх и и учета ядерной релаксации методом НН, затем рассматривается применение метода НН для изучения спинового обмена. макромолекул и регистрации выделения кислорода в хлоропластах гороха под действием света. [c.212]

Интенсивность образования АТФ изолированными хлоропластами зависит, в значительной степени, от способа их извлечения из клеток, от состава и pH среды, используемой при выделении и инкубировании хлоропластов. [c.191]

Ферменты могут синтезироваться в ядре, в цитоплазме, в хлоропластах, а также, возможно, в митохондриях и цитоплазматической мембране. Они могут также накапливаться в любой из указанных структур или в основном веществе цитоплазмы и в клеточной оболочке кроме того, они могут секретироваться клеткой. Выделение ферментов, связанных с какими-нибудь субклеточными структурами, естественно было бы начать с предварительного выделения соответствующих структур. На практике такой способ не всегда является лучшим, так как бывает связан с необходимостью центрифугирования больших объемов при высоких скоростях. [c.98]

Еще один способ получения информации о клетках связан с химическим исследованием выделенных клеточных органелл. Если осторожно растереть клеточную массу в соответствующей среде, то по крайней мере часть клеточных органелл можно выделить в интактном виде. Органеллы, имеющие различную плотность, разделяют центрифугированием при постоянно возрастающем числе оборотов (рис. 2.1). Например, такие тяжелые частицы, как ядра и хлоропласты, осаждаются при сравнительно небольших скоростях, соответствующих центробежным силам, в 1000—3000 раз превышающим силу земного притяжения (1000—3000 д) митохондрии переходят в осадок примерна при 10 000 д, рибосомы — приблизительно при 30 000 д, а для [c.22]

Эти методы служат для разрушения клеток и выделения ферментов в раствор. Если фермент локализован в органеллах, метод может быть использован только при условии, что органеллы также разрушаются. С другой стороны, может понадобиться предварительное выделение самих органелл, что позволит избавиться от загрязнения цитоплазматическими ферментами перед экстракцией фермента из органелл. Для этого требуется менее сильное воздействие. Предварительное растворение поверхностных коллагеновых и целлюлозных структур препаратами гидролитических ферментов позволяет в дальнейшем разрушать клетки более мягкими способами, сохраняя целостность органелл. Примером подобной методики служит получение препаратов митохондрий из таких тканей, как скелетная или сердечная мышцы, под действием протеолитических ферментов [6]. Однако эта методика применима только для получения препаратов в небольших масштабах и больше подходит для. метаболических исследований органелл, чем для очистки ферментов. Выход очищенных органелл может быть очень низким, поэтому во многих случаях лучше сначала разрушить всю ткань, а затем уже приступить к выделению нужного фермента из сложной смеси белков в экстракте. Таким образом, ферменты митохондрий и хлоропластов часто получают из тканевого гомогената, а не из выделенных органелл. [c.42]

Попытки 01/ределенйя общего содержания и форм воды в хлоропластах были сделаны А. С. Вечер. Эти определения были основаны на том, что он разработал способ выделения хлоропластов из кашиц или суспензий, получаемых без добавления воды Биохимия, 1, 34. 1950). Прим. ред.) [c.384]

А (l/ ie) = e[02]=0<9-10 с 1. Интересно отметить, что в темноте в хлоропластах кислорода нет, так как удаление кислорода откачкой или ферментативным способом, добавлением глюкозы и глюко-зоксидазы не изменяет величину Д. В то же время в липосомах для зонда (5) было измерено о[Оа] = (3- -5)-10 с [3, 6, 8]. Малая концентрация 0 в хлоропластах объясняется потреблением Oj в различных биохимических процессах ( дыхание растений). Зонд 6 не чувствует выделения кислорода (рис. 7, кривые [c.221]

Можно понять специалистов в области координационной химии, полагающих, что, хотя чисто органические ферменты — замечательные катализаторы сами по себе, однако в присутствии ионов металла их химическая активность существенно повышается, вследствие чего возрастает интерес к ним с точки зрения химии. Известно много примеров различных ферментов, содержащих и не содержащих металла, которые катализируют одну и ту же реакцию, действуют на один и тот же субстрат или образуют один и тот же продукт. Так, например, электрон-транспортные белки могут содержать флавины, железопорфирины или ферредоксины, а ферменты, катализирующие восстановление перекиси водорода органическими субстратами, могут также содержать или флавины, или железопорфирины (разд. 8.1). Однако есть и другие реакции, которые, насколько это известно в настоящее время, могут происходить только в присутствии ферментов, содержащих переходные металлы это фиксация азота (разд. 9.2), восстановление нитрата до нитрита (см., в частности, 132]) и некоторые реакции изомеризации, в которых участвуют кобальткорриноиды (разд. 10.2) [18, 1811. И несомненно, должны существовать многие реакции, которые более эффективно катализируются ферментами, содержащими переходные металлы. Эти металлобелковые комплексы или металлоферменты участвуют во многих процессах биологического обмена веществ, однако две реакции заслуживают специального упоминания по двум причинам. Во-первых, эти реакции представляют основной путь, по которому молекулярный азот или нитрат-ионы включаются в биологический обмен. Во-вторых, они тесно связаны с основными способами генерации и конверсии энергии в биологии как переносчики электронов и, возможно, в процессе выделения кислорода в хлоропластах как переносчики электронов и в реакции с кислородом, сопряженной с фосфорилированием и, наконец, при выделении водорода и метана при анаэробной ферментации. [c.134]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология