Цистин превращения при гидролизе

По окончании гидролиза ампулу охлаждают до 4°, вскрывают, содержимое фильтруют через фильтр с отверстиями 0,22 мкм, НС1 упаривают в роторном испарителе с однократным добавлением 1 мл воды при температуре около 40°. Сухой остаток растворяют в 1 мл воды и нейтрализуют добавлением нескольких капель пиридина (дО pH SS 6,5), а затем нагревают до 105° и выдерживают 1 ч при этой температуре для обеспечения превращения цистеина в цистин. Затем раствор снова упаривают досуха и растворяют в 1 — 2 мл исходного буфера (pH 2,2). [c.526]

Снижению потерь большинства аминокислот при кислотном гидролизе способствует проведение его в стеклянных ампулах под вакуумом с большим избытком (200—5000-кратным) тщательно очищенной и перегнанной над Sn b соляной кислоты. Распад тирозина предупреждают добавлением в ампулу фенола. Чтобы избежать превращения серусодержащих аминокислот в продукты различной степени окисления при гидролизе и последующих процессах хроматографии и электрофореза, образцы белка, содержащие цистеин и цистин, до гидролиза обрабатывают надмуравьиной кислотой. При этом образуется стойкое производное — цистеиновая кислота. Гидролиз проводят в течение 24, 48, 72 и 120 ч. Если содержание какой-либо аминокислоты с увеличением времени гидролиза постепенно уменьшается, его находят на графике зависимости содержания этой аминокислоты от длительности гидролиза путем экстраполяции к нулевому времени гидролиза. Если же содержание аминокислоты в ходе гидролиза постепенно увеличивается, истинную величину также определяют графически, ограничивая время гидролиза 96 или 120 ч ". [c.123]

Два пути синтеза меченого цистина были описаны Фраем [8]. Первой стадией в обоих является превращение серина в 2-фе-нил-2-оксазолин-4-карбоновую кислоту. По одной методике солянокислая соль оксазолина перегруппировывается в метиловый эфир 2-бензамидо-З-хлорпропионовой кислоты и атом хлора непосредственно замещают сульфгидрильной группой. Полученный метиловый эфир N-бензоилцистеина гидролизуют и окисляют, получая цистин с 58%-ным выходом. По второй методике соль 2-фенил-2-оксазолин-4-карбоновой кислоты и тиобензойной кислоты перегруппировываются в N, S-дибензоилцистеин, который превращают в оптически активный цистин с выходом 42%. Выходы даны в расчете на серу, причем регенерированную серу не учитывают. [c.425]

Щелочной гидролиз применяют главным образом при онределении триптофана, который в щелочной среде устойчивее, чем в кислой. Щелочи не только способствуют потерям при гидролизе оксиаминокислот, по они часто вызывают качественные изменения в составе гидролизата. При щелочном гидролизе серии разлагается на гликокол, аланин, аммиак н пировиноградную кислоту (Виланд и Вирт [3]), треонин расщепляется на гликокол и аминомасляную кислоту цистин разлагается на тиомолоч-ную кислоту, сероводород и аммиак. Аргинин в щелочной среде разлагается на орнитин и цитруллин. При щелочном гидролизе некоторых белков в их гидролизате была обпаруигона новая аминокислота, лаитионин, которая образуется в виде артефакта из цистеина (Хорн и др.). Подобные качественные изменения имеют место также и при щелочном гидролизе пептидов, в частности при таких условиях, в которых свободные аминокислоты (треонин) не подвергаются превращениям (Зангер и Туппи [4]). [c.466]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология