Гидролиз оксиаминокислота

Для полного гидролиза белков можно использовать сильную кислоту, сильное основание или специфические катализаторы — протеолитические ферменты. Наиболее часто используется для этой цели сильная кислота. Обычная методика гидролиза состоит в кипячении белка с 6 н. НС1 в запаянной ампуле (из которой предварительно откачивают воздух) при 110° в течение 12—96 час. В этих условиях пептидные связи гидролизуются с количественным выходом (для полного освобождения валина, лейцина и изолейцина требуется сравнительно большое время) и в результате гидролиза образуются гидрохлориды аминокислот. При нагревании с минеральными кислотами триптофан полностью распадается, а оксиаминокислоты серин и треонин подвергаются частичному разрушению. Эти потери определенным образом учитываются. Рацемизации аминокислот при кислотном гидролизе не происходит. [c.57]

Вывод о возможной исключительной роли аминокислот в построении белковой молекулы одновременно с Фишером сделал Ф. Гофмейстер [258]. Основываясь на точной химической характеристике аминокислот, осуществленной Г. Кольбе, Гофмейстер рассмотрел различные возможности соединения аминокислот друг с другом в высокомолекулярные соединения. Предположение о прямом соединении углеродных атомов должно было быть сразу отброшено, так как в этом случае невоз можно было бы объяснить распад белка на определенные компоненты. Существование же эфирных связей было сомнительно из-за незначительного числа образующихся при гидролизе оксиаминокислот. Следовательно, наиболее вероятной была связь, включающая атом азота. Гофмейстер рассмотрел три возможных типа связи -СНа-КН- СНг- - H2-NH-- (МН) -и-СНг-ЫН—СО-. Два первых типа связи отличались довольно значительной устойчивостью к воздействию кислот, кроме того, в этом случае трудно было объяснить малую кислотность нативных белков. Гофмейстер высказался в пользу связи третьего типа, как [c.66]

Поскольку при гидролизе казеиногена освобождается довольно значительное количество сложного эфира аминокислоты — серина — и фосфорной кислоты, предполагается, что главная масса фосфорной кислоты находится в фосфопротеидах в форме серин-фосфорной кислоты, а также фосфорных эфиров других оксиаминокислот. [c.69]

Истинное значение содержания других аминокислот определяют по максимуму кривой [23, 24, 52, 61]. Однако при сравнении данных, полученных этим методом различными авторами, выявляются значительные различия. По существу, исследователи единодушны только в отношении триптофана и оксиаминокислот, которые за 24 ч гидролиза разрушались на 6,5—15,2%. Кроме того, все исследователи подтверждают задержку высвобождения при гидролизе изолейцина. [c.190]

Фосфатиды. Фосфатидами в зываются липиды, дающие при гидролизе, кроме глицерина и высших монокарбоновых кислот, фосфорную кислоту и аминоспирт. Различают два класса фосфатидов — лецитины и цефалины, — отличающиеся своим аминоспиртом лецитины содержат холин, а цефалины — коламин (этаноламин). В некоторых цефалинах была обнаружена вместо коламина оксиаминокислота — серии (следует заметить, что серин может превращаться в результате декарбоксилирования в коламин) [c.779]

Щелочной гидролиз применяют главным образом при онределении триптофана, который в щелочной среде устойчивее, чем в кислой. Щелочи не только способствуют потерям при гидролизе оксиаминокислот, по они часто вызывают качественные изменения в составе гидролизата. При щелочном гидролизе серии разлагается на гликокол, аланин, аммиак н пировиноградную кислоту (Виланд и Вирт [3]), треонин расщепляется на гликокол и аминомасляную кислоту цистин разлагается на тиомолоч-ную кислоту, сероводород и аммиак. Аргинин в щелочной среде разлагается на орнитин и цитруллин. При щелочном гидролизе некоторых белков в их гидролизате была обпаруигона новая аминокислота, лаитионин, которая образуется в виде артефакта из цистеина (Хорн и др.). Подобные качественные изменения имеют место также и при щелочном гидролизе пептидов, в частности при таких условиях, в которых свободные аминокислоты (треонин) не подвергаются превращениям (Зангер и Туппи [4]). [c.466]

В отличие от эфиров ТФА-аминокислот ацетиламинокислоты, впервые изучавшиеся Янгсом [129] в виде н-бутиловых эфиров, менее летучи и, следовательно, имеют больший удерживаемый объем. По-видимому, полярные основные аминокислоты, такие, как Арг, а также Гис, Три и цистин, вряд ли можно подвергать газовой хроматографии. Их нет среди 35 аминокислот (в том числе 18 природных), разделенных с помощью ГХ в виде н-амиловых эфиров Джонсоном и др. [42]. Эти авторы разделяли также н-бутило-вые,. изобутиловые и изоамиловые эфиры, приготовленные аналогично ТФА-производным. Эти эфиры получали в виде бромгидра-тов, а затем прямо ацетилировали уксусным ангидридом. Известно, что при этом из оксиаминокислот образуются также N, 0-диацетиль-ные соединения, но пока нет никаких данных о том, как взаимодействует ангидрид с другими полифункциональными аминокислотами. По сравнению с соответствующими ТФА-производными 0-ацетил-соединения гораздо меньше подвержены гидролизу и, по-видимому, обладают более высокой термоустойчИвостью правда, соответствующих количественных измерений еще не проводили. В литературе описано разделение н-пропиловых эфиров ацетиламинокислот [29], но подробные методики не были опубликованы. [c.321]

Определение качественного и количественного аминокислотного состава белков и пептидов проводят после их гидролиза кислотой или щелочью. Оба вида гидролиза разрушают некоторые аминокислоты. При щелочном гидролизе частично разрушаются цистеин, серии, треонин и происходит частичная рацемизация некоторых аминокислот. При гидролизе соляной кислотой (5,7 н., 105—110° С), которая обычно используется при кислотном гидролизе пептидных связей, практически полностью разрушается триптофан. В связи с этим содержание триптофана в пробах обычно определяют после щелочного гидролиза или спектрофотометрическим методом Кроме того, наблюдаются значительные потери оксиаминокислот (серина, треонина, тирозина), се-русодержащих аминокислот (цистеина, метионина) и частично пролива. При этом степень разрушения аминокислот зависит от чистоты и концентрации НС1, используемой для гидролиза, а также длительности и температуры гидролиза. Следует отметить, что примеси альдегидов при кислотном гидролизе приводят к значительной потере тирозина, а также цистеина, гистидина, глутаминовой кислоты и лизина, а примеси углеводов в больших концентрациях — к разрушению аргинина. [c.123]

В основе метода динитрофенилирования лежит реакция свободных ЫНг-групп белка или пептида с 2,4-динитрофторбензолом (ДНФБ) в щелочной среде, при которой образуются соответствующие динитрофенильные производные (ДНФ-производные). В реакцию с ДНФБ, кроме свободных а-ЫНг-групп, вступают также е-ННг-группа лизина, 5Н-группа цистеина, ОН-группы оксиаминокислот и имидазольный гетероцикл гистидина. ДНФ-производное белка или пептида подвергают полному кислотному гидролизу. Ы-концевые ДНФ-амино-кислоты экстрагируют из гидролизатов эфиром, отделяя их от свободных аминокислот и ДНФ-производных по другим функциональным группам аминокислот, которые растворимы в воде. Идентификацию [c.145]

Сэнгер и Туппи [72] применили этот метод при расшифровке структуры В-цепи инсулина. Выделив и проанализировав не менее 60 пептидов, им удалось расшифровать только четыре участка цепи, включающих всего 19 остатков аминокислот. В частичных кислотных гидролизатах, помимо пептидов, встречается до 25% свободных аминокислот [54]. В ходе кислотного гидролиза полностью разрушается триптофан [53] и в значительной степени повреждаются оксиаминокислоты [65]. [c.35]

Для проведения ГХ-анализа одинаково важны как химическая, так и термическая устойчивость рассмотренных выше производных. Химическая устойчивость прежде всего определяет условия обработки, хранения и дозировки образцов. Как уже упоминалось, в результате слишком длительного анализа одного и того же образца могут образовываться несколько продуктов и, следовательно, получаться неоднозначные данные. Если ТФА-производные эфиров простых моноаминомонокарбоновых кислот — устойчивые вещества, которые могут храниться неограниченное время, то этого нельзя сказать о производных аминокислот сложной структуры, содержащих несколько ацильных групп. Большинство таких соединений крайне чувствительны к гидролизу и частично разлагаются в присутствии следов воды [53]. У оксиаминокислот Сер и Тре это может привести к полной потере защитных групп, так как кислота, образующаяся при гидролизе О-ТФА-группы, по типу кислотноосновного катализа может способствовать N—О-ацильной миграции и таким образом вызвать полную потерю Ы-ТФА-групп [126]. Рекомендуется эти соединения хранить и даже вносить в прибор в присутствии избытка трифторуксусного ангидрида, к которому могут добавляться другие растворители. [c.318]

Как упоминалось ранее, при гидролизе сильными кислотами вначале обычно происходит разрыв пептидных связей, соседних с оксиаминокислотами, в несколько м еныпей степени — связей, соседних с аспарагиновой кислотой, и совсем в незначительной степени происходит разрыв пептидных связей, соседних с глутаминовой кислотой. Дальнейший кислотный гидролиз, скорость которого зависит,от природы аминокислотных остатков, протекает неизбирательно и приводит к накоплению дипептидов. Большая специфичность проявляется при низких температурах и малом времени гидролиза, так как в этих условиях сказываются различия в энергии активации для различных молекул, тогда как нри более высоких температурах происходит более беспорядочный разрыв пептидных связей. При гидролизе разбавленной кислотой имеет место большая специфичность, хотя в этом случае возможно побочное образовапие ангидридов. Гидролиз яичного альбумина 7,95 н. НС1 нри 30° С давал 55 фрагментов различной величины [26]. [c.393]

Перметилирование одного миллиграмма стендомициновой кислоты, соединения открытой формы , образующегося при мягком щелочном гидролизе пептидного антибиотика, дало вещество с достаточной летучестью для масс-спектрометрического анализа. Это можно считать удовлетворительным результатом, поскольку молекула содержит четыре оксиаминокислоты в дополнение к основной компоненте, предположительно существующей в форме четвертичного аммониевого производного. При масс-спектрометрическом анализе была определена последовательность первых десяти аминокислот [96]. [c.223]

При полном гидролизе белков образуется смесь приблизительно из двадцати аминокислот,. Первичная аминогруппа и карбоксильная группа связаны в молекуле этих аминокислот с одним и тем же атомом углерода, т. е. аминогруппа находится в а-положении по отношению к карбоксильной группе. Такие аминокислоты называются а-аминокислотами их общая формула N112 — СНВ — СООН. Исключение составляют пролин и окси-пролин, относящиеся к а-иминокислотам. Структурные формулы аминокислот, обычно присутствующих в гидролизатах белков, приведены в табл. 8. Эти аминокислоты можно разделить на семь классов 1) алифатические аминокислоты 2) оксиаминокислоты 3) дикарбоновые аминокислоты и их амиды 4) двухосновные аминокислоты 5) ароматические аминокислоты 6) серусодержащие аминокислоты 7) иминокислоты. [c.40]

ФОСФОПРОТЕИДЫ (фосфопротеины, ФП) — сложные белки, содержащие фосфорильную группу, присоединенную к аминокислотным остаткам пептидной цепп. Местом присоединения фосфорильного остатка в Ф. служат оксиаминокислоты — серии и треонин. При действии щелочи Ф. сравнительно легко гидролизуются с отщенлением фосфорильной группировки к действию кислот Ф. устойчивы. Ферментативный гидролиз Ф. осуществляется под действием специфич. фермента — фосфопротеинфос-фатазы обратная реакция — образование Ф. катализируется ферментом иротеинфосфокиназой. При этом происходит перенос остатков фосфорной к-ты от аденозинтрифосфорпой к-ты (АТФ) на остатки [c.244]

Свободные трет-бутиловые эфиры большинства аминокислот представляют собой устойчивые жидкости, перегоняющиеся без разложения. Они не претерпевают самоконденсации [48] даже при хранении при комнатной температуре (о самоконденсации грет-алкиловых эфиров глицина см. [2395]) это является еще одним достоинством грег-бутиловых эфиров в дополнение к их способности легко расщепляться под действием кислот. Они весьма устойчивы к гидразинолизу и аминолизу [48] и значительно труднее омыляются щелочью, чем соответствующие метиловые и этиловые эфиры. Благодаря этим ценным свойствам грег-бутиловых эфиров их введение в химию пептидов значительно расширило возможности синтеза пептидов, содержащих, в частности, остатки аминодикарбоновых кислот. В то же время не следует считать, что р-трег-бутиловые эфиры аспарагиновой кислоты всегда устойчивы к действию гидразина и щелочи [2017а]. и-трет-Бутиловые эфиры аминодикарбоновых кислот являются весьма удобными производными для синтеза соответствующих а-пептидов [1173, 1974, 1975, 2007, 2019, 2598, 2598а], и, наоборот, а-грет-бутиловые эфиры можно с успехом использовать для получения со-пептидов аминодикарбоновых кислот [2274, 2281, 2283]. трег-Бутиловые эфиры настолько устойчивы к действию щелочей, что в их присутствии можно проводить гидролиз нитрильной группы до соответствующего амида [1419]. Синтезы трет-бутиловых эфиров аргинина, N -зaмeщeннoгo аргинина, гистидина и триптофана до настоящего времени не описаны. Этерификация серина и треонина с помощью изобутилена сопровождается алкилированием гидроксильных групп с образованием 0-эфира [228] правда, это не приводит к каким-либо осложнениям, поскольку простые трет-бутиловые эфиры расщепляются с такой же легкостью, как и соответствующие сложные эфиры. Напротив, при синтезе пептидов, содержащих остатки оксиаминокислот, простые трет-бутиловые эфиры иногда целесообразно использовать в качестве 0-защитной группы [230, 457, 1962 [c.95]

Гидроксильную группу оксиаминокислот можно фосфорили-ровать обработкой смесью фосфорной кислоты и фосфорного ангидрида. Нужный продукт реакции, однако, получается при этом с низким выходом [1379, 1740]. Лучшие результаты дает обработка этилового эфира карбобензокситирозина хлорокисью фосфора в пиридине. Последующее декарбобензоксилирование иодистым фосфонием в ледяной уксусной кислоте и щелочной гидролиз приводят с хорошим выходом к О-фосфорил-ь-тиро-зину. Точно таким же путем получены ди- и трипептиды, построенные из остатков 0-фосфорил-ь-тирозина и глицина [1763]. Все же, как правило, в качестве фосфорилирующих агентов применяют арил- или алкилфосфорилхлориды. В случае дифенил-фосфорилхлорида [1792, 1793] образующийся эфир карбобенз- [c.373]

Из других аминокислот, претерпевающих изменения при кислотном гидролизе, следует указать на серусодержащие которые окисляются до разнообразных продуктов (цистин, ци-стеиновая кислота и др.), а также оксикислоты, серии и треонин, которые окисляются до а-кетокислот (на 10—30%). Истинное содержание оксиаминокислот в белках определяется следующим образом. Навеску белка гидролизуют, отбирая через 24, 48 и 72 часа пробы (аликвотные количества) гидролизата, в которых определяют концентрацию серина и треонина. Далее строят график изменения их концентраций во времени и экстраполяцией до нулевого времени гидролиза находят истинное содержание оксиаминокислот. [c.39]

Исследования в области химии белка развивались в по--следние годы учениками Николая Дмитриевича, под его общим руководством, и в других направлениях. Так, М. М. Ботвинник, М. А. Прокофьевым и Д. А. Морозовой были разработаны методы синтеза и изучена дегидратация, 3-оксиами-нокислот [234] М. М. Ботвинник изучен вопрос о наличии гидроксила в белке определено содержание /-оксиамино-кислот в ряде белков, разработана качественная реакция на р-оксиаминокислоты (в частности, на серин), исследовано ацилирование их [235]. А. Б. Силаевым, а также-М. М. Ботвинник и Д. А. Морозовой установлены оптимальные условия гидролиза белков [236]. М. А. Прокофьевым проведены интересные работы, связанные с вопросом о характере связи между нуклеиновыми кислотами и белками в нуклео-протеидах [236а]. [c.101]

Рис. 1. Гидролиз эфирной связи О-аминоацилированных оксикислот и оксиаминокислот водой при 100°

До сих пор эфирная связь установлена только в фосфопротеидах [18]. Однако известно, что 0-ацетилированные белки отщепляют уксусную кислоту под действием панкреаса [19]. На модельных опытах показано, что эфиры ацилированных аминокислот расщепляются трипсином [20]. Известна лабильность эфиров N-ацилированных оксиаминокислот [21 ]. Ацил легко переходит с атома азота на атом кислорода. Реакция эта обратима. Л. Т. Соловьев [22], а затем Денюэль и Казаль [23] нашли, что при кислотном гидролизе скорость отщепления оксиаминокислот больше, чем остальных аминокислот, и авторы также объясняют этот факт образованием эфирной связи [c.332]

Смотреть страницы где упоминается термин Гидролиз оксиаминокислота: [c.252] [c.252] [c.471] [c.579] [c.396] [c.396] [c.199] [c.410] [c.970] [c.274] [c.366] [c.374] [c.143] [c.40] [c.119] [c.136] [c.95] [c.274] [c.366] [c.374] [c.340] [c.97] [c.121] [c.131] [c.172] [c.296]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология