Изоэлектрическая и изоионная точки белков

Однако, как уже говорилось, функциональные группы белка могут связывать не только протоны, но и другие ионы, как положительные, так и отрицательные. В результате суммарный заряд, найденный по формуле (28), даже с учетом всех возможных поправок может значительно отличаться от найденного титрованием, причем эти отличия выходят за пределы ожидаемых ошибок расчета и измерения. В частности, изоэлектрическая точка, определяемая как pH раствора, в котором белок неподвижен в электрическом поле, отличается от изоионной точки, и это отличие тем больше, чем выше ионная сила раствора. Величина заряда и положение изоэлектрической точки зависит не только [c.60]

Изоэлектрическую точку белка не следует смешивать с его изоионной точкой, поскольку эти величины не всегда совпадают. Изоионной точкой белка называется то значение pH, при котором число протонов, связанных основными группами, равно числу протонов, отданных диссоциированными кислыми группами в белковой молекуле. Изоэлектрическая и изоионная точки белка совпадают только в том случае, когда в растворе этого белка нет никаких других ионов, кроме ионов водорода и гидроксила. В присутствии других анионов и катионов они различны. Для пояснения этого положения рассмотрим тот случай, когда белок находится в растворе, pH которого равен изоточке белка и который не содержит никаких других ионов, кроме Н+ и ОН . [c.158]

Водородный показатель рН о, устанавливающийся в растворе чистого белка, характеризует изоионную точку. Очень часто она близка к изоэлектрической. Различие между ними увеличивается, если снижается концентрация белка, так как изоэлектрическая точка не зависит от концентрации полиэлектролита. В изоэлектрической точке электростатическое притяжение между противоположно заряженными частями макромолекул глобулярных белков выражается всего сильнее. В таком состоянии макромолекулы стремятся принять наиболее плотную клубковую упаковку, и растворимость их становится минимальной. Так как в достаточно концентрированных растворах изоионная точка близка к изоэлектрической, то тщательной очисткой раствора от примесных электролитов можно выделить белок из раствора. Для этой цели удобен метод электродиализа. [c.215]

Изоэлектрическая точка —это то значение pH, при котором белок не перемещается в электрическом поле. Обычно ее определяют, указывая буфер и значение ионной силы, поскольку значение изоэлектрической точки может несколько изменяться в зависимости от условий. Чаще всего ее представляют себе как то значение pH, при котором суммарный заряд частицы равен нулю, т. е. отрицательный заряд всех находящихся на частице анионных групп точно скомпенсирован положительным зарядом катионных групп. Как уже подчеркивалось, эти ионные группы могут быть как группами белка, так и ионами буфера. Белок, свободный от посторонних ионов, приобретает заряд только в результате ионизации поверхности. При значении pH, соответствующем суммарному нулевому заряду молекулы белка, каждая протонированная группа должна быть в точности скомпенсирована анионом, образующимся в результате отщепления протона. Это значение pH называется изоионной точкой белкл. Мы не знаем, возможно ли реально такое состояние. Для того чтобы к нему приблизиться, можно подвергнуть белок исчерпывающему диализу против дистиллированной воды или пропустить белковый раствор через колонку с ионообменной смолой. Правда, в этих условиях белки могут выпадать в осадок. Из-за такого рода неопределенностей и затруднений предпочитают иметь дело с более легко измеряемым параметром — изоэлектрической точкой. [c.401]

В отличие от аминокислот у белков изоионная точка обычно не совпадает с изоэлектрической. По определению изоионная точка — это такая величина pH, при которой молекула белка содержит равное число положительно и отрицательно заряженных групп, образовавшихся в результате связывания основных групп слрото-нами и соответствующей диссоциации кислотных групп. Изоэлект-рическая точка — это pH, при котором белок электрофоретически неподвижен. При ее определении белок растворяют в буферном растворе. В этом растворе всегда содержатся низкомолекулярные анионы и катионы, способные связываться с многочисленными заряженными группами белка. В таких условиях наблюдаемое в изоэлектрической точке равновесие зарядов частично обусловлено их компенсацией связавшимися с молекулой белка анионами и катионами. [c.24]

Представляет интерес рассмотрение влияния добавления соли (например, ЫаС1) к изоионному или изоэлектрическому раствору белка. Для простоты рассмотрим макромолекулу белка, у которой изоэлектрическая точка лежит между рН = 5 и рН = 9 и концентрация настолько высока, что изоионное состояние в воде совпадает с изоэлектрическим. Значение pH определяется по уравнению (30-1) при условии, что 2=0 и г=г (г —число протонов, которое должно образоваться при диссоциации, чтобы 2 стало равно нулю). При добавлении соли г не может изменяться сколько-нибудь заметно, так как не происходит ни удаления, ни присоединения заметного количества ионов водорода. Однако 2 может измениться, если белок реагирует с катионом или анионом при- [c.635]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология