Изоэлектрическая точка и изоионная точка

Отсюда следует, что существует такое значение кислотности среды (pH), при котором аминокислота в растворе находится в виде цвиттер-иона, т. е. суммарный заряд молекулы равен нулю. Значение pH, при котором это имеет место вследствие определенного положения протона в молекуле), называется изоионной точкой (p/ ). Точно так же, если при определенных экспериментальных условиях молекула не несет электрического заряда (например, не обладает электрофоретической подвижностью), значение pH, при котором это происходит, называется изоэлектрической точкой (р/е). Для водных растворов аминокислот [c.32]

ИЗОЭЛЕКТРИЧЕСКАЯ И ИЗОИОННАЯ ТОЧКИ [c.119]

Изоэлектрическая и изоионная точки белков [c.49]

В чистых водных растворах изо-ионная точка совпадает с изоэлектрической точкой. В растворах электролитов происходит сорбция ионов белками. В присутствии солей заряд белковых макромолекул определяется также ионами электролитов. Например, при сорбции белками анионов солей часть гидроксильных ионов из белка вытесняется в раствор и изоионная точка смещается в сторону более щелочных значений pH. [c.127]

Однако, как уже говорилось, функциональные группы белка могут связывать не только протоны, но и другие ионы, как положительные, так и отрицательные. В результате суммарный заряд, найденный по формуле (28), даже с учетом всех возможных поправок может значительно отличаться от найденного титрованием, причем эти отличия выходят за пределы ожидаемых ошибок расчета и измерения. В частности, изоэлектрическая точка, определяемая как pH раствора, в котором белок неподвижен в электрическом поле, отличается от изоионной точки, и это отличие тем больше, чем выше ионная сила раствора. Величина заряда и положение изоэлектрической точки зависит не только [c.60]

Три изоэлектрическом фокусировании в вертикальной колонке между анодом и катодом электрохимически создается градиент pH. Градиент pH стабилизируется градиентом плотности, чаще всего сахарозным вся система тщательно термостатируется. Белки в колонке движутся в направлении, соответствующем их изоэлектрической точке, где фокусируются в виде очень узкой полосы. Две соседние полосы могут быть разделены интервалом всего лишь в 0,01 единицы pH. Считается, что изоэлектрические точки белков в обычных экспериментальных условиях близки к их изоионным точкам, т. е. к тем значениям pH, при которых белки остаются изоэлектрическими в условиях полного отсутствия добавленного электролита [129]. [c.164]

Как видно из изложенного, изоэлектрическая точка белка зависит от наличия посторонних ионов, в связи с чем она непостоянна. Для того чтобы обозначить pH чистого белка, растворенного в воде в отсутствие солей, употребляют термин изоионная точка [32]. Однако определение изоионной точки также встречает много затруднений и часто невозможно, поскольку многие белки нерастворимы в отсутствие солей. Кроме того, проводимость бессолевых растворов белков очень низка. Изоионная точка карб-оксигемоглобина крови овцы лежит при pH 7,6, в то время как изоэлектрическая точка того же белка в аммонийно-фосфатном буфере варьирует в пределах 6,70—7,16 [33]. [c.85]

Сравнение изоэлектрической и изоионной точек. Если считать изоэлектрической точкой белка такую величину pH, при которой Е = 0, то, за исключением случая, когда изоионная точка находится при pH 7, раствор белка не может быть одновременно нзоэлектрическим и изоионным. Для изоионного раствора из требования электронейтральности вытекает, что [c.121]

Сравните изоэлектрическую и изоионную точки (в присутствии и в отсутствие соли) для белка, способного связывать анионы, если известно, что его изоэлектрическая точка расположена в щелочной области. [c.124]

Различие между изоионной и изоэлектрической точками становится реальным, когда имеют дело с белком в растворах солей. Заряд на частицах белка не вызван исключительно ионизирующими группами некоторые ионы могут быть адсорбированы из раствора. Эта адсорбция может смещать изоэлектрическую точку, а изо-ионную оставлять неизмененной или изменять ее иначе, чем изоэлектрическую. [c.158]

Ионизующиеся макромолекулы (полиэлектролиты). Химические и физико-химические особенности поведения ионизующихся макромолекул (поликислот, полиоснований и их солей). Количественные характеристики силы поликислот и полиоснований. Электростатическая энергия ионизованных макромолекул. Распределение ионной атмосферы. Равновесие Доннана. Специфическое связывание противоионов. Кооперативные конформационные превращения ионизующихся полипептидов в растворах. Амфотерные полиэлектролиты. Изоэлектрическая и изоионная точки. Белки как пример амфотерных полиэлектролитов. Кооперативные химические реакции между противоположно заряжающимися макромолекулами (образование полимер-поли-мерных комплексов). [c.382]

Так, изоэлектрическая точка (5,4) бычьего сывороточного альбумина в 0,15 М хлористом натрии выше по сравнению с его изоионной точкой (4,9). [c.298]

Наоборот, чтобы достичь изоионной точки, необходимо скомпенсировать возникшее при адсорбции катионов увеличение степени диссоциации кислотных групп, т. е. подкислить раствор. Аналогично при адсорбции анионов изоэлектрическая точка сдвигается в кислотную, а изоионная — в щелочную область. [c.211]

Поверхностный заряд частицы органического или неорганического вещества можно изменить, добавляя кислоту или основание в зависимости от кислотно-основных свойств поверхностных групп. На рис. 10.9 показано, как частица органического вещества с поверхностными аминогруппами и карбоксильными группами меняет свой заряд при изменении pH. Значение pH, при котором суммарный заряд частицы равен нулю, называют изоэлектрической точкой (или изоионным значением pH). Величина его зависит от силы кислоты и основания, свойства которых проявляют соответственно карбоксильные и аминогруппы. Обычно изоэлектрические точки для органических частиц в сточной воде находятся в диапазоне pH от 3 до 5, т. е. при нейтральном значении pH эти частицы заряжены отрицательно. [c.395]

Изоэлектрической или, точнее, изоионной точкой называют те узкие пределы pH, при которых аминокислота не мигрирует под влиянием электрического тока ни к аноду, ни к катоду. [c.669]

В отсутствие солей и при изоионной точке, лежащей примерно при pH 7, она будет почти совпадать с изоэлектрической. Однако в присутствии солей различие между этими точками может [c.121]

ЗОд. Величина pH в изоионной и изоэлектрической точках [c.634]

Для белков между зарядом молекул и электрофоретической подвижностью существует прямая пропорциональная зависимость в широком интервале pH. Если при некотором значении pH число всех положительных зарядов на белковой молекуле равно общему числу отрицательных зарядов, то при этом pH молекула не передвигается в электрическом поле. Значение pH, при котором электрофоретическая подвижность белка равна нулю, называется изо-электрической точкой. Для чистого водного раствора белка, в котором заряд молекул определяется только Н+ -и ОН- - ионами, изоэлектрическая и изоионная точки белка, естественно, совпадают. Напротив, при преимущественной адсорбции анионов и щелочном смещении изоионной точки (см.выше) на белковой молекуле остаются избыточные отрицательные заряды анионов, сообщающие молекуле электрофоретическую подвижность в сторону анода. Для ее компенсации следует сообщить молекуле эквивалентное количество положительных зарядов, что может быть достигнуто подкислением раствора, т. е. в этом случае изоэлек- [c.115]

Изоэлектрическая точка —это то значение pH, при котором белок не перемещается в электрическом поле. Обычно ее определяют, указывая буфер и значение ионной силы, поскольку значение изоэлектрической точки может несколько изменяться в зависимости от условий. Чаще всего ее представляют себе как то значение pH, при котором суммарный заряд частицы равен нулю, т. е. отрицательный заряд всех находящихся на частице анионных групп точно скомпенсирован положительным зарядом катионных групп. Как уже подчеркивалось, эти ионные группы могут быть как группами белка, так и ионами буфера. Белок, свободный от посторонних ионов, приобретает заряд только в результате ионизации поверхности. При значении pH, соответствующем суммарному нулевому заряду молекулы белка, каждая протонированная группа должна быть в точности скомпенсирована анионом, образующимся в результате отщепления протона. Это значение pH называется изоионной точкой белкл. Мы не знаем, возможно ли реально такое состояние. Для того чтобы к нему приблизиться, можно подвергнуть белок исчерпывающему диализу против дистиллированной воды или пропустить белковый раствор через колонку с ионообменной смолой. Правда, в этих условиях белки могут выпадать в осадок. Из-за такого рода неопределенностей и затруднений предпочитают иметь дело с более легко измеряемым параметром — изоэлектрической точкой. [c.401]

Водородный показатель рН о, устанавливающийся в растворе чистого белка, характеризует изоионную точку. Очень часто она близка к изоэлектрической. Различие между ними увеличивается, если снижается концентрация белка, так как изоэлектрическая точка не зависит от концентрации полиэлектролита. В изоэлектрической точке электростатическое притяжение между противоположно заряженными частями макромолекул глобулярных белков выражается всего сильнее. В таком состоянии макромолекулы стремятся принять наиболее плотную клубковую упаковку, и растворимость их становится минимальной. Так как в достаточно концентрированных растворах изоионная точка близка к изоэлектрической, то тщательной очисткой раствора от примесных электролитов можно выделить белок из раствора. Для этой цели удобен метод электродиализа. [c.215]

Наряду с изоэлектрической то ч к о й, определяемой по электрокинетическим эффектам, часто рассматривают изоионную точку, т. е. то значение pH, при котором число ионизированных кислотных и основных групп макромолекулы (или частицы амфотерного гидроксида) од,И1наковО. На ее положенме в ооновиом вл ияют самые сильные кислотные и основные группы с константами диссоциации /Скисл и Кося соответственно. Тогда для одно-одновалентного электролита приближенно справедливо уравнение Михаэлиса [c.210]

Наряду с изоэлектрической точкой, определяемой по электрокинетическим эффектам, часто рассматривают изоионную точку, т. е, то значение pH, при котором число ионизированных кислотных и основных групп макромолекулы одинаково. На ее положение в основном влияют самые сильные кислотные и основные грушлы с константами диссоциации и соответст- [c.252]

Для дисперсионной среды, ве содержащей добавок электролита, значения изоионной и изоэлектр ической точек совпадают. Введение в систему ионов, способных адсорбироваться, приводит к сдвигу значений изоионной и изоэлектрической точек относительно значения, присущего чистой дисперсионной среде, и притом в противоположные стороны. [c.253]

Если в растворе отсутствуют посторонние ионы, которые переносятся вместе с макроионами во время электрофореза, или по-лиамфолит адсорбирует положительно и отрицательно заряженные низкомолекулярные ионы в одинаковой степе ни, то pH раствора определяется только диссоциацией ионогенных групп самой макромолекулы в этом случае состояние, при котором и = 0, соответствует изоионной точке. Она в отличие от изоэлектрической точки зависит от содержания полиамфолита в растворе и совпадает с ней лишь при pH 7. [c.577]

Изоэлектрической точкой амфолита называют то значение pH, при котором суммарный заряд вещества равен нулю. В этих условиях амфолит не способен перемещаться в электрическом поле. На положение изоэлектрической точки оказывают заметное влияние ионы электролита, связываемые молекулами белка. Поэтому изоэлектрическая точка может отличаться от изоион-ной точки, которую определяют как изоэлектрическую точку белка в свободном от солей растворе и которая вследствие этого является более строгим понятием. [c.298]

Изоэлектрическая точка не зависит в явном виде от концентрации белка для изоионной точки, как показывает уравнение (V. 8), такая зависимость наблюдается. С уменьшением концентрации белка несоответствие между изоионной и изоэлектриче-скими точками увеличивается. При умеренных концентрациях белка различие между этими точками невелико, если только обе они лежат в пределах значений pH между 3 и 11. [c.121]

Представляет интерес рассмотрение влияния добавления соли (например, ЫаС1) к изоионному или изоэлектрическому раствору белка. Для простоты рассмотрим макромолекулу белка, у которой изоэлектрическая точка лежит между рН = 5 и рН = 9 и концентрация настолько высока, что изоионное состояние в воде совпадает с изоэлектрическим. Значение pH определяется по уравнению (30-1) при условии, что 2=0 и г=г (г —число протонов, которое должно образоваться при диссоциации, чтобы 2 стало равно нулю). При добавлении соли г не может изменяться сколько-нибудь заметно, так как не происходит ни удаления, ни присоединения заметного количества ионов водорода. Однако 2 может измениться, если белок реагирует с катионом или анионом при- [c.635]