Белок определение микрометод Кьельдаля

Необходимые для постановки этой реакции количества антигена и антисыворотки зависят от чувствительности выбранного метода определения белка. Так, например, при использовании микрометода Кьельдаля в модификации Маркхема вполне достаточно, чтобы иммунная сыворотка содержала 75—125 мкг азота антител. При использовании биуретовой реакции требуется вдвое [c.126]

Определение аммиака после обычного или измененного разложения по Кьельдалю представляет менее серьезную проблему, чем это считалось. Преимущества микрокьель-далевской перегонки [69, 80—83] при сравнении с макрометодом или даже с полумикрометодами ныне общеизвестны. Сравнительное изучение макро- и микроопределений при анализе муки, пшена и кукурузы на содержание в них белков произведено Робинсоном и Шеллен-бергером [27], которые применяли микрометод Кьельдаля для систематического анализа белков плазмы [84, 85], слюны [86], молока [87] и спинномозговой жидкости [88]. [c.24]

Определение азота является скорее проблемой элементарного анализа, чем проблемой анализа белков, а применение микрометода Кьельдаля почти универсально. Чибнел с сотрудниками [175] показали, однако, что в настоящее время желание ускорить анализ привело к заниженным и переменным результатам и необходимо большее время разложения, чем указывается в современных методах. Очевидно, что ошибка определения азота проявится в любых аналитических данных по аминокислотам. Однако, если проводить работу тщательно, определение азота более точно, чем любое определение аминокислот, [c.61]

Таким образом с использованием 1,5 мг белка для гидролиза и 2,5 мг для контрольного опыта был определен единственный остаток амида дикар-боновой аминокислоты в белке с молекулярной массой 7000. Гидролиз иодоводородной кислотой и микрометод Кьельдаля дали сравнимые результаты. Аналитическая колонка должна иметь сверху слой смолы в 1 см, расположенный на тефлоновой прокладке для задерживания негидролизованного белка. Эта часть смолы (с прокладкой) удаляется перед подачей на колонку раствора NaOH и затем регенерируется нагреванием при 70 °С с 12 М серной кислотой. [c.256]

Прямые методы. 1. Сырую биомассу определяют после осаждения клеток центрифугированием. После центрифугирования отмытых клеток можно определить сухую массу. Оба метода не свободны от довольно больших систематических ошибок. 2. Гораздо большую точность обеспечивает определение общего азота (метод микро-Кьельдаля и микродиффузионный метод определения аммиака), а также определение общего содержания углерода (по ван Слай-ку-Фолчу). 3. В повседневной практике часто определяют содержание бактериального белка. Хорошие результаты дают модификации биуретового метода и другж колориметрические методы. Микрометоды основаны на измерении количества характерных компонентов белка тирозина, триптофана (по Лоури или Фолину). [c.192]

Интерес к определениям содержания белка в серуме крови или плазме с помощью измерений удельного веса особенно вырос после опубликования работы Барбура и Гамильтона [131] о простом микрометоде определения удельного веса растворов. Измерялось время падения капли образца сквозь 30 см смеси ксилола и бромбен-зола, имеющей плотность немного меньшую, чем у образца. При сравнении со стандартным раствором сульфата калия известного удельного веса может быть сразу рассчитан неизвестный удельный вес. При соответствующей температурной поправке предельная точность была + 0,0001. Моор и Ван-Сляйк [132], главным образом с помощью пикнометрического определения удельного веса, изучали серум крови и вывели коэфициенты для расчета концентрации белка из измеренного удельного веса. Они нашли, что концентрация в 7г белка на 100 дает плотность около 1,027, которая изменяется линейно на 0,0029 на 1 г белка. Предельная точность метода падающей капли соответствует предельной определимой концентрации, равной около +0,05 г на 100 мл. Моор и Ван-Сляйк показали различие в 0,6 г белка на 100 мл между методом удельного веса и газометрическим микрокьельдалем Ван-Сляйка [133]. Это различие представляет сумму экспериментальных отклонений в обоих методах, прибавленную к недостоверности сделанных выше основных предположений, а также недостоверности в интерпретации метода Кьельдаля. Колебания между пикнометриче- [c.29]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология