Определение ацетильных и формильных групп

Определение ацетильных и формильных групп [c.267]

Шпинглер и Маркет применили газо-жидкостную хроматографию для определения ацетильной и формильной групп. Так как определение по этому методу связано с построением калибровочных кривых, он менее удобен и более сложен, чем методы, основанные на титровании. Однако он полезен для одновременного микроопределения нескольких разных ацильных групп. [c.119]

N-ацилирование проводят в присутствии большого избытка уксусного или муравьиного ангидрида. Для последующего секвенирования пептидных фрагментов необходимо провести гидролиз ацильных групп. Формильную защиту снимают кратковременной обработкой НС1 в метаноле при комнатной температуре, более устойчивые ацетильные группы отщепляют 0,01 М КОН. Из других методов расщепления 0-пептидных связей следует упомянуть реакцию с гидроксиламином или гидразином с образованием гидроксамовых кислот или гидра-зидов N-концевых партнеров гидроксиаминокислот (серина и треонина) для этих целей применяли также 1М пиперидин [64]. Относительно определения ацетильных и формильных групп см. разд. 8.13. [c.94]

Предложено отщеплять ацетильную и формильную группы щелочным гидролизом белка [54], так как при кислотном гидролизе образуются свободные уксусная и муравьиная кислоты и их потери в дальнейшем неизбежны. После щелочного гидролиза соли этих кислот превращаются в фенациловые эфиры при катализе краун-эфирами (дициклогексил-18-краун-б). Для обнаружения фенациловых эфиров пламенно-ионизационным детектором содержание ацильных групп в образце должно быть достаточно высоким ( — 20 нмоль). До настоящего времени остается проблемой более полное использование чувствительности метода ГЖХ, поскольку в обычных условиях возможна инжекция в колонку лишь небольшой части полученного производного образца. В описываемом случае в колонку вводилось 1—2 нмоль фс1 ацилового эфира. Более эффективны в этом отношении пен-тафторобснзиловые (ПФБ) эфиры, чувствительность определения которых выше благодаря возможности использования детектора электронного захвата. [c.267]

Ацетильные группы при обработке гидразином превращаются в гид-разид уксусной кислоты за несколько минут при комнатной температуре, но N-ацетильные группы требуют более жестких условий. Филлипс [311, 312] нагревал гликонротеины с гидразином при 100° в течение 8—20 час. Гидразиды кислот были превращены в динитрофенильные производные при pH 3 и полученные динитрофенилгидразиды жирных кислот разделяли экстракцией растворителями с последующей хроматографией на бумаге [303, 311, 812]. Производное уксусной кислоты было определено по ультрафиолетовому поглощению. Метод очень чувствителен (0,1—1 мкмоль ацетильных групп), но недостаток его — низкий выход (около 70%) этот дефект может быть компенсирован применением техники радиоизотопного разбавления. Определение формильных и пропионильных групп представляет значительные трудности выход первых очень низок, а вторые образуются при разложении цист(е)ина. [c.225]