Бактериальная трансформация

Рис. 7. Схема бактериальной трансформации

Наконец, прямым доказательством генетической роли ДНК являются так называемые бактериальные трансформации, когда под влиянием ДНК, выделенной из одного штамма бактерий, у другого штамма бактерий появлялись новые признаки, передающиеся по наследству. [c.68]

Впоследствии был изучен еще ряд бактериальных трансформаций. В настоящее время их описано сви ше 30. [c.69]

Генная инженерия — научно обоснованное, направленное использование явления трансдукции с целью приобретения живым организмом нового признака. Первые сведения об этом явлении, аналогичном бактериальным трансформациям, были получены при изучении бактериофагов. Известна мутагенная форма кишечной палочки, не способная синтезировать тимин. Если такой штамм заразить бактериофагом Т2, то кишечная палочка уже может синтезировать тимин. Неспособность кишечной палочки синтезировать тимин связана с отсутствием у нее необходимого ддя этой цели фермента. Поскольку при заражении бактериальной клетки бактериофагом в нее проникает только фаговая ДНК, а не белок, то фаговая ДНК, осуществляя процесс трансдукции, наделяет бактериальную клетку механизмом, который и обеспечивает синтез необходимого для образования тимина фермента. [c.44]

Трансдукция — явление, аналогичное бактериальным трансформациям. Например, при заражении бактериофагом Т2 мутантной формы кишечной палочки, не способной синтезировать тимин, клетки последней приобретают свойство образовывать фермент, ранее в ней отсутствовавший и необходимый для синтеза тимина. Но ведь при заражении бактериальной клетки в нее проникает только фаговая ДНК, а не белок. Значит, только фаговая ДНК влияет на трансдукцию, наделяющую бактериальную клетку указанным свойством. Однако для бактериофага такая трансдукция характерна лишь тогда, когда он до заражения инкубировался с культурой, способной к такому синтезу. Следовательно, этот процесс аналогичен передаче признаков путем трансформации. [c.83]

Бактериальная трансформация — перенос с помощью ДИК наследственных признаков от одного штамма бактерий к другому. [c.341]

Чаргафф и его сотрудники [58] выделили ДНК из протопластов дикого штамма Е. oli и этой ДНК обрабатывали мутант, ну кдаю-щийся в лизине. Оказалось, что в результате такой обработки у бактерий, ауксотрофных по лизину, восстанавливается про-тотропный тип питания, при котором протопласт уже не нуждается в поступлении лизина извне. Эта форма бактериальной трансформации была названа ими восстановительной . [c.304]

Данные о бактериальной трансформации обсуждаются в многочисленных обзорах [9—И, 15—17, 25, 26]. Можно ли получить аналогичные соматические трансформации у животных, пока еще точно не установлено. Известно лишь несколько опытов, указывающих на возможность трансформации у многоклеточных. Например, выделили ДНК из культуры клеток человека линии D98S, в которых содержится фермент ИМФ-пирофосфорилаза (К. Ф., 2.4.2.8), осуществляющий следующую реакцию [c.304]

Сейчас получено много данных, подтверждающих, что при бактериальной трансформации ДНК действует как наследственный детерминант, вызывая необратимое изменение наследственных признаков клеток, аналогичное тем изменениям, которые имеют место при мутации. Бойвип [5] рассматривает этот процесс как направленную мутацию. Уже давно было известно, что в выс-1яих растениях и животных ДНК локализована в хромосомах и что в бактериях содержится ядерный материал и генетический аппарат, аналогичный таковым у высших организмов [1]. Поэтому есть все основания думать, что бактериальные трансформации свидетельствуют о том, что ДНК — это активный материал гена, что оп может быть экстрагирован и очищен, сохраняя при этом свою генетическую функцию, и что он может проникнуть в гомо-логршпую клетку и стать постоянной составной частью ее генетического аппарата. [c.305]

Итак, мы располагаем многочисленными данными о том, что ДНК является носителем генетической информации. Благодаря своей комплементарной структуре ДНК замечательно подходит к этой роли. Ее способ репликации, при котором материнская молекула дает начало двум идентичным дочерним молекулам, гарантирует, что каждая клетка, образовавшаяся путем митоза, получает точно такой же по количеству и качеству набор хромосом, какой содержался в материнской клетке. Постоянство количества ДНК во всех покоящихся соматических клетках данного вида, удвоение этого количества перед делением, наличие половины его в клетках спермы, имеющих половинный набор хромосом,— все эти данные подтверждают основной вывод, хотя сами по себе отнюдь не являются решающими доказательствами. Основной вывод опирается и на хорошо известное соотношение между содержанием ДНК в клетке и числом хромосом, а также на твердо установленный факт локализации ДНК в хромосомах. Дальнейшие подтверждения базируются на данных по метаболитической стабильности и на ряде наблюдений, показавших, что ДНК в отсутствие белка может действовать как инфекционный агент (стр. 157), передающий биологическую информацию. Однако наиболее убедительные доказательства были получены, безусловно, при изучении бактериально трансформации. [c.314]

Активность молекул ДНК в бактериальной трансформации (гл. VH) дает возможность исследовать денатурацию двойной спирали с помощью биологического метода. Для этого раствор трансформирующей ДНК, выделенной из генетически маркированного донорного штамма D. pneumoniae, медленно нагревают до все более высокой температуры. Из такого раствора время от времени берут образцы, которые быстро охлаждают в ледяной бане. Затем эти образцы добавляют к культуре рецнпиентного штамма пневмококка, отличающегося генетически от донорного штамма, и учитывают число трансформированных клеток, получивших аллели донора. С помощью такого опыта было показано, что трансформирующая активность пневмококков при достижении точки плавления ДНК (86 °С) резко падает. В ходе таких опытов по тепловой денатурации с использованием меченной трансформирующей ДНК было показано, что потеря трансформирующей активности, наблюдаемая при плавлении ДНК, объясняется неспособностью реципиента поглощать одноцепочечные полинуклеотиды. [c.180]

В обсуждении своих результатов Эйвери сделал замечание более широкого плана, касающееся не только его непосредственных результатов. Если мы правы, - писал он,- это означает, что нуклеиновые кислоты являются не только структурно важными, но и функционально активными веществами, определяющими биохимическое поведение клеток. Поэтому, используя известные химические соединения, можно индуцировать предсказуемые наследственные изменения в клетках . Он имел в виду систему бактериальной трансформации, но сходные результаты теперь получены и в случае клеток высших организмов. [c.23]

Метод напоминает бактериальную трансформацию. К эукариотическим клеткам, растущим в культуре, добавляют ДНК. У клеток, включивших эту ДНК, проявляются новые фенотипические признаки. А. Эукариотиче- [c.25]

Такие же результаты получены при добавлении к реципиентным клеткам очищенной ДНК. В этом случае оказалось возможным добавлять определенные последовательности, а не полагаться на случайную фрагментацию хромосом. В результате трансфекции с помощью ДНК получают как стабильные, так и нестабильные линии. Эти эксперименты аналогичны бактериальной трансформации, однако их называдот трансфекцией, поскольку исторически термин трансформация используют при описании изменений, позволяющих эукариотическим клеткам неограниченно размножаться. [c.500]

В 1944 г. американским микробиологом-генетиком О. Эвери с сотрудниками в опытах по бактериальной трансформации были представлены убедительные доказательства того, что основным материальным носителем наследственности являются не белковые компоненты хромосом, а ее ДНК- В 1952 г. в опытах А. Херши н М. Чейз было показано, что при нападении фага на бактерию в нее внедряется только пить ДНК фага, а его белковая оболочка остается снарулси, и этого оказывается достаточным для паследствен-ного изменения свойств бактериальной клетки. [c.9]

Важнейшее свойство клетки — способность ее к самовоспроизведению. Но, кроме ДНК, ни один составной компонент клетки, в том числе и все белки, таким свойством не обладают. Способность молекул ДНК к саморепродукции имеет непосредственную связь с клеточным делением и размножением организмов. Молекулы ДНК по сравнению с белковыми обладают огромной устойчивостью. С этим свойством ДНК связано большое постоянство наследственности. Прямым доказательством генетической роли ДНК служат опыты по бактериальной трансформации. [c.130]

Ответ на вопрос, что представляет собой это вещество, посредством которого осуществляется бактериальная трансформация, был дан в 1944 г. в экспериментах американских микробиоло-гов-генетиков под руководством О. Эвери, Продукты разрушенных капсульных клеток бактерий были ими разделены на химические компоненты, каждый из которых оценивался на способность вызывать трансформацию признака капсульиости. При этом обнаружили, что только одно вещество обладало способностью превращать [c.131]

Рис. 47. Бактериальная трансформация неустойчивых к стрептомицину микроорганизмов в стрептомицииоустоичивые

Путем бактериальной трансформации в пробирке неустойчивые к стрептомицину клетки пневмококков были превращены в стрептомициноустойчивые (рис. 47). У этого вида микроорганизмов имеются два штамма, по-разному реагирующих иа стрептомицин один в присутствии его в среде погибает, клетки другого могут нормально расти. Клетки стрептомициноустойчивых пневмококков разрушили в пробирке, и из них выделили ДНК. После добавления такой очищенной ДНК в среду, на которой развивались неустойчивые к стрептомицину пневмококки, некоторые из них приобретали наследствеииуго устойчивость к этому антибиотику. Таким образом, во всех случаях бактериальной трансформации направленное изменение свойств бактерий вызывала ДНК. В то же время попытки вызвать бактериальную трансформацию другими химическими веществами, входящими в состав клетки, оказались безрезультатными. [c.132]

В настоящее время изучено много случаев бактериальной трансформации и во всех из них точно установлено, что изменения признаков происходят благодаря ДНК, Открытие О. Эвери и его сотрудников имело для последующего развития генетики выдающееся значение. Установление связи ДНК с наследственными свойствами клетки положило начало изучению закономерностей наследственности и изменчивости организмов на молекулярном уровне. [c.132]

В данной главе предполагается, что цель эксперимента заключается просто во встраивании гена, клонированного ранее в Е. соЫ, в обычный вектор для трансформации растений затем он должен быть перенесен с помощью конъюгации в агробакте-рии. В результате получают штамм, готовый для трансформации. Обычные методы рекомбинантных ДНК, бактериальной трансформации и конъюгации, выделения и анализа плазмид, как [c.34]

В настоящей работе предпринята попытка двумя способами оценить седиментацию свежеобразованного детрита. Первый способ базируется на анализе собственных экспериментальных данных по бактериальной трансформации ОВ фитопланктона. При длительной экспозиции ( I) год в аэробных условиях и температуре (20 2) °С степень минерализации ОВ отмерших синезеленых и диатомных водорослей, собранных на Рыбинском водохранилище, составила 80 % [18]. Анализ кинетики процесса бактериальной деструкции ОВ привел к необходимости рассматривать в исходном материале две, различающиеся по скоростям распада, фракции — легкоразлагаемую (лабильную) и относительно трудно-разлагаемую ( стабильную ) [4]. Количество последней составляет 40—45 %, остальная часть приходится на долю лабильной фракции, распад которой при температуре 20°С заканчивается за первые 25—30 сут эксперимента. В последующие сроки продолжается медленное разложение только трудноокисляемых компонентов. Из минерализовавшихся за годичный срок 80 % ОВ примерно 60 % приходится на долю лабильной фракции, а около 20 %, связано со стабильной компонентой . [c.18]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология