Лиофильная сушка ферментов

Как видно на рис. 4, при очень низких (ниже О °С) и высоких (80-100 °С) температурах активность ферментов равна нулю. Однако при низких температурах ферменты сохраняют свою нативность и при повышении температуры у них вновь появляется каталитическая активность. В настоящее время ферменты выделяют из растворов путем лиофильной сушки, т. е. сушки в замороженном состоянии при очень низком давлении. Полученные таким образом лиофилизированные ферментные препараты хорошо сохраняются в течение длительного времени даже при комнатной температуре. [c.30]

После окончания полимеризации, которая в зависимости от условий (природа мономеров, количество инициатора, температура и т. п.) может продолжаться от нескольких минут до нескольких часов, образуется блок полимерного геля, содержащий иммобилизованный фермент. Следует учитывать, что в геле могут оставаться примеси неизрасходованных при полимеризации мономеров и инициаторов. Чтобы избавиться от них, гель обычно механически измельчают и тщательно промывают буферным раствором. При необходимости длительного хранения измельченные частицы подвергают лиофильной сушке. [c.59]

В книге описаны основные методические приемы, используемые в гистохимии. Приведены наиболее употребительные методы подготовки ткан к исследованию (замораживание, лиофильная сушка, заливка В парафин, химическая фиксация и т.п.), методы определения белков, нуклеиновых кислот, углеводов и липидов. Большое внимание уделено гистохимии ферментов, а также пигментов и биогенных аминов. Описаны методы с использованием радиоавтографии и иммунохимии. [c.4]

Сохранение органических и зольных веществ в растительных пробах в количествах, близких к их естественному состоянию, осуществляется за счёт фиксации. В настоящее время применяется температурная фиксация и лиофильная сушка, при которой растительные ферменты сохраняются в активном состоянии, а белки не денатурируют. [c.353]

Следует указать, что полное обезвоживание ферментного препарата даже при лиофильной сушке может привести иногда к изменению конформационной структуры белка, сказывающейся на заметном уменьшении ферментативной активности. Так, по данным Беленького, Полонской и Чамина, полное обезвоживание амилазы путем лиофильного высушивания приводит к полному ее инактивированию, а ферменты нуклеазного и про-теолитического комплекса сохраняют свою активность. [c.147]

Глубокий анализ электронной структуры железа и его ближайшего окружения на основе результатов мессбауэровского исследования цитохрома с можно найти в работе Кука и Дебрунера [44]. Они обратили внимание на заметное отличие мессбауэровского спектра лиофильно высушенного окисленного ( )ермента от спектра заморол<енного раствора феррицитохрома с. По-видимому, этот результат свидетельствует о влиянии взаимодействия с водой различных групп белка, находящихся в ближайшем соседстве с гемом, на электронное состояние железа. В противоположность поведению окисленной формы фермента восстановленная форма почти не изменяет своего мессбауэровского спектра при лиофильной сушке образца. Все сказанное позволяет сделать вывод о том, что стабильность структуры щели в молекуле белка, содержащей группу гема, во втором состоянии окисления значительно выше, чем в первом. [c.427]

Лиофилизация растительного материала (высушивание путём возгонки) основана на испарении льда, минуя жидкую фазу. Высушивание материала при лиофилизации проводится следующим образом отобранный растительный материал замораживают до твёрдого состояния, заливая образец жидким азотом. Затем образец помешают в лиофили-затор где при низкой температуре и в условиях вакуума происходит высушивание. При этом влага поглошается специальным осушителем (реактивом), в качестве которого используется силикагель, хлористый кальций и т.д. Лиофильная сушка подавляет ферментативные процессы, но сами ферменты сохраняются. [c.354]

Хорошие результаты дает использование сульфат-изопропило-вого способа выделения целлюлазы из культуральной жидкости. В качестве оптимальных условии выделения целлюлолитических ферментов можно считать следующие температура 4—15°С, исходный pH культуральной жидкости 7—8, длительность высаливания сульфатом аммония 12—16 ч, концентрация изопропанола 10%. При этом выход фермента по активности достигает 75— 80%, а активность полученного ферментного препарата составляет 1 — 1000 Сз — ИЗО и Сж — 3900 ед./г. Лучшим методом сушки, обеспечивающим максимальную стабильность препарата является лиофильная или вакуумная сушка при относительно низкой температуре. [c.201]