Нуклеиновые электронная микрофотография

В действительности контраст здесь несколько усилен при помощи специального приема. Было выяснено, что нуклеиновые кислоты весьма охотно вступают в соединение с солями некоторых тяжелых металлов, во всяком случае взаимодействуют с ними намного интенсивнее, чем, например, белки или жироподобные вещества. Если срез обработать уранилацетатом или цитратом свинца, то они откладываются преимущественно в структурах, содержащих нуклеиновые кислоты, и таким образом маркируют их. Уранилацетат представляет собой соединение урана (точнее, урана с присоединенным к нему кислородом) и уксусной кислоты, а цитрат свинца — это соединение свинца с лимонной кислотой. Напомним, что уран имеет атомный вес 238, свинец — 207, т. е. атомы этих металлов соответственно в 238 и 207 раз тяжелее и потому в очень много раз плотнее атома водорода. Они и поглощают (или рассеивают) электроны намного сильнее, чем молекулы воды, белков или нуклеиновых кислот, и на электронных микрофотографиях структуры, напыленные ураном или свинцом, выглядят более темными, чем их окружение. Это так называемый позитивный контраст. [c.201]

В этом разделе будет описано несколько явлений, связанных между собой лишь тем, что все они имеют отношение к неинфекционным вирусоподобным частицам. Образование в инфицированных клетках вирусоподобных частиц, не содержащих нуклеиновой кислоты,— явление точно установленное и широко распространенное. Так называемый верхний компонент, сопутствующий целостным вирусным частицам, впервые был обнаружен у вируса желтой мозаики турнепса с тех пор его находили в тканевых экстрактах, содержащих много других изометрических вирусов растений, животных и бактерий (см. фиг. 40 [124, 241, 256, 307]). Во всех случаях эти частицы обнаруживают на электронных микрофотографиях то Hie самое молекулярное строение, что и полные вирусные частицы. Однако в отличие от полных частиц они обнаруживают тенденцию сплющиваться при высушивании и последующем напылении металлами. Отсутствие же нуклеиновой кислоты выявляется с помощью негативного контрастирования. Верхние компоненты мож- [c.187]

Вирусные частицы, дефектные в том отношении, что они содержат меньшее по сравнению с нормальным количество нуклеиновой кислоты, обнаружены и среди многих мутантов РНК-содержаш их фагов, а также среди фагов f2, выраш,енных в присутствии фторурацила или реконструированных в отсутствие фактора созревания (см. гл. X, разд. В). Эти частицы содержат РНК с константой седиментации 14—18S (вместо 26S) и не обладают инфекционностью в то же время па электронных микрофотографиях они не отличаются по своему внешнему виду от типичных фаговых частиц. Исследования, проведенные недавно на мутанте фага f2, содержащем РНК с константой седиментации 14S, показали, что у этой РНК отсутствует 5 -конец, а также цистрон, который в полной вирусной РНК кодирует образование белка оболочки [297]. [c.189]

Второй метод расчета молекулярной массы включает определение процентного содержания нуклеиновой кислоты (см. разд. 4.3), ее молекулярной массы и числа молекул в вирусной частице. Вместо этих данных (или дополнительно) можно использовать сведения о процентном содержании капсидного белка, числе субъединиц и их молекулярной массе. Если в расчетах используются данные о нуклеиновой кислоте, а молекулярная масса капсидного белка известна, можно рассчитать число субъединиц в составе одной вирусной частицы. Расчеты могут быть полезны при интерпретации структуры, наблюдаемой на электронных микрофотографиях. [c.27]

Частицы фагов Т2 и Т4 содержат одну-единственную стабильную молекулу ДНК, представляющую всю нуклеиновую кислоту частицы. Предполагается, что все фаговые частицы действительно содержат по одной молекуле нуклеиновой кислоты. Молекулярный вес ДНК фага Т2 составляет приблизительно 11-10 (стр. 74) [ИЗ]. Молекула фаговой ДНК, по-видимому, по всей длине представляет сдвоенную перазветвленную нить. Электронная микрофотография молекулы ДНК фага Т2 показана на фото 1. [c.160]

Прямые физические методы. Самым старым и самым прямым методом исследования биополимеров следует считать, по-видимому, электронномикроскопический метод. Недавно Клейншмидт обнару кил, что если препарат нуклеиновой кислоты, непосредственно выделенный из живого организма методом осмотического шока или взятый после предварительного выделения, комплексировать с каким-нибудь основным белком, например с цитохромом с, то его mohiho нанести на поверхность воды в виде моно-молекулярной пленки. На фиг. 51 приведена электронная микрофотография фаговой ДНК, полученная Томасом и Мак-Хатти при помощи этого метода. Снимок позволяет оценить размеры молекулы ДНК и ясно показывает, что эта молекула замкнута в кольцо. Определенная таким способом длина молекулы, равно как и ее диаметр, соответствуют величинам, которых следует ожидать на основе гипотезы Уотсона — Крика. Показано, что молекулы ДНК из многих источников имеют форму кольца или замкнутой петли. У ДНК фагов Я и Т2 переход от линейной формы к кольцевой осуществляется легко и обратимо. [c.143]

Для обозначения разнообразных структурных компонентов вирусов был предло5кен ряд терминов. Мономеры белка, образующего оболочку вирусной частицы, называют структурными субъединицами. У изометрических вирусов несколько таких субъединиц обычно образуют морфологические единицы характерной формы, различимые на электронных микрофотографиях их называют также капсомерами. Правильную периодическую структуру, состоящую из многих субъединиц или капсо-меров и вирусной нуклеиновой кислоты, называют [c.24]

На электронной микрофотографии слева видны полные частицы, а на микрофотографии справа — пустые , лишенные нуклеиновой кислоты частицы. Оба препарата были обработаны фосфовольфраматом калия по методу негативного контрастирования. Отрезки прямых на обеих микрофотографиях соответствуют 100 нм. [c.152]

На электронной микрофотографии молекула ДНК имеет вид длинной неразветвленной нити. При полном распаде (гидролизе) ее образуются азотистые основания, пентозный сахар — дезоксирп-боза и фосфорная кислота. Азотистые основания, входящие в состав обеих нуклеиновых кислот, являются производными двух органических азотсодержащих гетероциклических соединений пурина (С5Н4Ы4) и пиримидина (С4Ы2Н4). [c.136]

Длина палочки ВТМ была определена иа основании электронных микрофотографий. Вильямс и Стир [1911] нашли, что длина ВТМ равна 298 1 нм, в то время как но данным Холла [693] наиболее частой является величина 295—305 нм. Обычно длина палочки ВТМ принимается равной 300 5 нм. Большинство исследователей, измерявших распределение длии палочек ВТМ по электронным микрофотографиям, находит, что величина стандартного отклонения составляет примерно 2%. Хотя некоторые из этих колебаний, несомненно, обусловлены ошибкой измерений, Маркхэм и др. [1160] подчеркивали, что истинная длина палочек может быть ие совсем однородной вследствие того, что к концам этих палочек сверх того количества, которое требуется для заш иты РНК, присоединяется не содержащий нуклеиновой кислоты белок, количество которого варьирует. Приведем основные величины, характеризующие структуру ВТМ [331] [c.90]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология