Нуклеиновые кислоты содержание в вирусных частицах

Вирус желтой мозаики турнепса, который был получен в кристаллическом виде, отличается высоким содержанием РНК, составляющим 35%. Вирусная частица представляет собой полый шар, внутри которого находится нуклеиновая кислота [33]. При помощи фенольной экстракции из этого вируса была получена инфекционная РНК с молекулярным весом 2,3-10 [86]. [c.154]

РНК вирусов (обзоры — см.РНК вирусов выделяют обычно из очищенных вирусных частиц с помощью фенольного или детергентного метода (типичные методики — см. ). Как правило, нуклеиновые кислоты вирусов существуют в виде одноцепочечной молекулы с мол. весом 1—3-10 , хотя известны примеры значительно более низкого молекулярного веса. Так РНК одной из разновидностей фага Рр имеет мол. вес 2- 10 , что соответствует содержанию 550 остатков нуклеотидов 1 . Излюбленными объектами изучения являются РНК из вируса табачной мозаики и вируса желтой мозаики турнепса, полиовирусов животных и вирусов гр иппа. Наконец, значительное число работ посвящено исследованию вирусов бактериофагов, таких, как 2, М52, К17, М12, Гг, Рр и др. Нативность выделяемой вирусной РНК можно контролировать с помощью биохимического теста — по способности инфицировать организмы, являющиеся хозяином данного вируса. [c.37]

Известны два стандартных метода определения молекулярной массы вирусных частиц на основе гидродинамических данных и по содержанию капсидного белка и нуклеиновой кислоты. [c.26]

Второй метод расчета молекулярной массы включает определение процентного содержания нуклеиновой кислоты (см. разд. 4.3), ее молекулярной массы и числа молекул в вирусной частице. Вместо этих данных (или дополнительно) можно использовать сведения о процентном содержании капсидного белка, числе субъединиц и их молекулярной массе. Если в расчетах используются данные о нуклеиновой кислоте, а молекулярная масса капсидного белка известна, можно рассчитать число субъединиц в составе одной вирусной частицы. Расчеты могут быть полезны при интерпретации структуры, наблюдаемой на электронных микрофотографиях. [c.27]

Использование значения плавучей плотности для определения относительного содержания нуклеиновой кислоты и белка в составе вирусных частиц может привести к ошибочным результатам за счет различий в связывании или проникновении ионов Сз+ в вирусные частицы, а также влияния используемой для центрифугирования среды на их гидратацию. [c.28]

В данном разделе описаны методы определения типа, содержания и размера нуклеиновой кислоты вирусных частиц, а также числа и молекулярной массы индивидуальных белков, образующих капсид. [c.33]

Как отмечено в разд. 3.5, сведения об относительном содержании нуклеиновой кислоты и белка в составе вирусных частиц необходимы для того, чтобы непрямым методом рассчитывать их парциальный удельный объем. Использование для определения доли нуклеиновой кислоты спектров поглощения в ультрафиолете или плавучей плотности может приводить к неправильным результатам. Существует четыре метода определения содержания РНК, из них три прямых и один непрямой. Методы, описанные в разд. 4.3.1, 4.3.2 и 4.3.4, можно использовать и для определения содержания ДНК. [c.37]

В некоторых случаях можно рассчитать относительное содержание нуклеиновой кислоты, зная число белковых субъединиц в вирусной частице (из структурных исследований), их молекулярные массы и молекулярную массу нуклеиновой кислоты (по данным гель-электрофореза). [c.39]

Существует косвенный метод подсчета вирусных частиц в образце, который позволяет определить массу каждой частицы. Этот подход особенно полезен в том случае, когда нет строгого соответствия между числом частиц и их способностью образовывать бляшки . Молекулярный вес вирусных частиц определяют методами седиментации — диффузии и светорассеяния. Умножив его на процентное содержание ДНК в вирусной частице, получают молекулярный вес ДНК. Среди методов, которые используются для определения содержания ДНК в вирусной частице, можно назвать определение фосфора (колориметрически или по величине радиоактивности P ) определение связанной с пуринами дезоксирибозы (колориметрическое) определение тимипа (но радиоактивности Н ) [16] опре-делепие ультрафиолетового поглощения (при этом допускается, что вклады ДНК и белка аддитивны) 1 109] и определение плавучей плотности ви-вируса (исходя из того же предположения). Общее содержание вируса в препарате можно определить по сухому весу, по инкременту показателя преломления [110] и исходя из суммарного содержания белка и нуклеиновой кислоты. [c.238]

ДНК мелких фагов [202]. Частицы, полученные с РНК ВТМ, характеризовались константами седиментации до 152S, а инфекционность их РНК была устойчива к действию РНК-азы [525]. Комплекс с рибосомной РНК имел двойной пик в соответствии с двумя компонентами рибосомной РНК. Мы уже упоминали, что, хотя вирусные частицы этой группы имеют такие же размеры и такое же содержание белка, как и вирус желтой мозаики турнепса, они тем не менее содержат вдвое меньше РНК. Исходя из этого, можно понять, почему в такие оболочки удается загнать удвоенное количество РНК. Но удивительнее всего, что сказанное относится лишь к посторонней РНК— при реконструкции вируса с гомологичной РНК ее количество в вирусной частице никогда не бывает удвоенным. Неожиданным в опытах оказалось и то, что белки различных вирусов рассматриваемой группы, по многим свойствам непохожие друг на друга, тем не менее оказались способными взаимодействовать между собой с образованием частиц со смешанными оболочками [536]. Вирусоподобные частицы образуются также и в отсутствие нуклеиновой кислоты, но в противоположность другим верхним компонентам вируса они при этом отличаются от вируса по электрофоретической подвижности [27]. [c.222]

В любой вирусной инфекции можно вычленить следующие периоды 1) скрытый, или латентный, период, в течение которого инфекционное начало либо совсем не обнаруживается в клетках хозяина, либо проявляется лишь в незначительной степени 2) период, когда содержание РНК и (или) ДНК увеличивается 3) период, когда возрастает содержание белка, причем постепенно начинают преобладать белки оболочки и, наконец, 4) период созревания вирусов. Однако существует и такой период, который у разных вирусов протекает по-разному. Это процесс выхода вируса из клетки. У одних вирусов выход из клетки происходит путем отпочковывания или выпячивания клеточной оболочки, у других — в результате лизиса и смерти клетки. Не исключено, однако, что вирусы в незрелой форме (а возможно, даже и голые нуклеиновые кислоты) тоже способны переходить в инфицированных тканях от клетки к клетке, используя для этого такие органеллы, как, например, плазмодесмы растений. Продолжительность перечисленных пяти фаз обычно зависит от конкретной системы вирус — хозяин. Однако в тех случаях, когда животная клетка инфицируется одной-единственной вирусной частицей, скрытый период может быть самым различным. [c.233]

Для всех клеток, за исключением клеток членистоногих, репликация тогавирусов является летальным событием. При этом в клетке почти полностью подавляется синтез макромолекул и очень быстро блокируется функционирование Na/K-АТРазы [29]. Однако известны многочисленные хорошо документированные случаи, когда устанавливается персистентная инфекция. Большинство из них характеризуется низким содержанием вируса или дефектными формами вирусного генома. Некоторые из дефектных вирусов фенотипически проявляются как температурочувствительные мутанты или мутанты по типу бляшек. Другие имеют свойства дефектных интерферирующих (ДИ) частиц [11, 95]. ДИ-частицы представляют собой обычный продукт большинства систем вирус—клетка они содержат делеционный вариант вирусного генома, в котором сохраняются участки, необходимые для репликации нуклеиновой кислоты и ее упаковки в вирионы. У большинства ДИ-частиц нормальные последовательности генома перетасованы, но в то же время определенные области сохраняются. У SFV и SIN последние состоят из З -конца и последовательности около 5 -кон-ца РНК [44, 55, 57, 82] (рис. 21.2). Наиболее интересная последовательность недавно обнаружена у двух ДИ-РНК SIN. На 5 -конце РНК этих ДИ-частиц последовательности практически идентичны тРНК Р клеток крысы [57]. Возможное значение этой структуры обсуждалось ранее в связи с репликацией РНК. В присутствии ДИ-РНК репликация нормальной вирусной РНК подавлена и репликация вируса оказывается угнетенной. При этом инфекция становится намного менее цитопатической и клетки могут выжить. Персистентная инфекция такого типа обычно оказывается временной она заканчивается либо полным излечением (т. е. потерей всей вирусной генетической информации), либо самопроизвольным кризисом с обильной продукцией вируса и цитопатическим действием. Эти состояния имитируют некоторые вирусные заболевания (хотя в последних важную роль в подавлении размножения вируса играют иммунные защитные механизмы), а иногда, возможно указывают на существование необычных типов патогенности. [c.360]

Для простых вирусов можно выадслить примерное содержание нуклеиновой кислоты, зная плотность вирусной частицы, из следующего уравнения Майора [550] [c.21]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология