Световая микроскопия с высоким разрешение

При любом детальном исследовании биологического материала следует сравнивать информацию, получаемую с помощью широкого набора приборов. Во многих случаях полезно начинать исследования с РЭМ, поскольку его диап азон увеличений включает в себя область увеличений от получаемых с хорошей лупой до получаемых в просвечивающем электронном микроскопе высокого разрешения. В РЭМ также мы получаем привычное нам изображение. Сравнительные исследования относительно просто выполнять, подготавливая образец либо для просвечивающего электронного микроскопа, либо для оптического микроскопа после изучения образца в РЭМ. Пример сравнительного исследования приведен на рис. 11.3, а дальнейшие подробности можно найти в статьях [316—319] и в книге [320]. В работе [321] подробно описываются методы, которые могут быть использованы для сравнения всех трех типов изображений с гистохимическими данными, а в статье [322] дается подробное описание сравнительных исследований в световом микроскопе методом авторадиографии и в РЭМ. [c.220]

Метод реплик электронной микроскопии способен дать правильные, весьма точные картины микроструктуры стали. Это, в частности, доказывается близостью электронно-микроскопических и оптических данных для некоторых объектов. Электронная микроскопия благодаря высокому разрешению имё ёт ряд преимуществ перед световой микроскопией при исследовании микроструктур и измерении их деталей. Эти преимущества в металловедении очень важны для детального изучения природы и микроструктуры продуктов распада аустенита и мартенсита, изучения механизма образования продуктов распада и для установления соответствия между микроструктурой и свойствами стали [133]. [c.111]

Благодаря высокому разрешению, наличию различных препаративных методов и большому выбору соответствующей техники микроскопирования удается выявлять детали бактериальных структур. Например, с помощью солей тяжелых металлов, окружающих бактерию и проникающих в поверхностные неровности, получают контрастирование за счет дифференциальной задержки электронов. Этот эффект, известный как негативное контрастирование, аналогичен эффекту применения нигрозина в световой микроскопии. Однако, если в клеточной стенке или мембране нет разрывов, позволяющих [c.93]

Таким образом, только изображение во вторичных электронах дает высокое разрешение, более чем на порядок лучше разрешения светового микроскопа. [c.556]

При известных обстоятельствах может быть интересным исследование в РЭМ металлографических шлифов после травления для выявления микроструктуры. Это применение РЭМ прежде всего обусловлено гораздо более высоким разрешением во вторичных электронах, чем разрешение светового микроскопа. Кроме того, интересна возможность создания контраста на различиях химического состава фаз (при использовании упруго-рассеянных электронов или характеристического рентгеновского излучения). [c.566]

Как видно из табл. 68, длина волны видимого света не менее 4,0 10 см (4000 А). Апертура лучших световых микроскопов равна 70°. Коэффициент преломления среды можно повысить, поместив между предметом и линзой жидкость с высоким показателем преломления, например кедровое масло, до и = 1,5. Подставив в формулу (VII, 1) численные значения всех рассмотренных величин, определим наименьшее разрешающее расстояние. Оно равно примерно 0,2 мк. Практически такого разрешения добиться очень трудно, и частицы коллоидных размеров, т. е. меньше 0,2 мк, в световом микроскопе различить не удается. [c.327]

Одно из преимуществ фазово-контрастной микроскопии перед темнопольной, которая применяется в настоящее время реже, заключается в полном использовании апертуры объектива, что влечет за собой необходимость применения самых высококачественных фазово-контрастных объективов. Это в свою очередь предполагает использование конденсора с достаточно большой апертурой и, так же как и раньше, применение компенсационных окуляров с увеличением 15х или даже 20X, способных реализовать то высокое разрешение, которое дают объективы. Вполне доступны фазово-контрастные иммерсионные объективы средней силы (40Х—бОХ), которые дают хорошо очерченные полноценные изображения при работе с мицелием грибов и другими большими клетками. Наилучшие результаты получают, применяя объективы с увеличением 90Х и ЮОХ и числовой апертурой больше 1,0, используя иммерсию. Однако удовлетворительные результаты фазово-контрастная микроскопия дает и без применения иммерсии, например при подсчете бактерий, простейших и спор, проверке подвижности или при определении размера и формы. В том случае, когда хотят увидеть детальную внутриклеточную организацию живых организмов, следует обратить внимание на преломляющие свойства среды, в которой рассматриваются клетки наилучших результатов достигают при добавлении в среду желатины до 15—30%. При этом показатели преломления среды и внутриклеточного содержимого становятся одинаковыми или почти одинаковыми, а фазовая задержка пропорциональна показателю преломления, умноженному на световой путь. В этих условиях уменьшаются также ореолы. [c.23]

Микроскопы этого типа дают возможность изучать сравнительно крупные объекты до 12 мм в диаметре и 3 мм толщиной. Полезное увеличение имеет широкий интервал от 20 до 40 ООО. Глубина резкости изображения в 300—500 раз выше, чем у светового микроскопа. Разрешающая способность 2000—2500 нм, есть модели и с еще более высоким разрешением — порядка 500—1000 НН Стереоскопический эффект изображения позволяет получить дополнительную информацию. Фотографирование объекта осуществляется с экрана кинескопа. [c.52]

Использование когерентного излучения позволило создать принципиально новый метод проекционной микроскопии, основанный на применении квантовых усилителей света. Объект с помощью объектива освещается монохроматическим светом от лазера на парах меди. Офаженный от объекта свет проходит активную среду, усиливается и проектируется на экран. Когерентные микроскопы обеспечивают высокое просфанственное разрешение (1 мкм при увеличении порядка 1000. ., 1500) при яркости изображения, недоступного обычным световым микроскопам. Особенностью микроскопа являются возможность фокусировки мощного лазерного излучения на любом элементе объекта и возможность осуществлять его коррекцию. [c.509]

Приборы третьей группы называются упрощенными. Это простые, малогабаритные приборы с разрешением 30 А и хуже, которые перекрывают по разрешению диапазон между световыми микроскопами и электронными микроскопами первой и второй группы. Они с успехом могут быть использованы для большогв круга исследований, не требующих высоких разрешений, наириме) с целью предварительного просмотра объектов перед постановкой их в электронные микроскопы первой группы, в качестве контрольных приборов в промышленности, а также для учебных целей в институтах и техникумах. [c.223]

Эффективность радиоавтографии в выявлении меченных тритием молекул составляет около 5—10%. Нуклеотиды, меченные 1251 JJ 35 обеспечивают более высокую эффективность выявления метки на автографах по сравнению с распадами Н при сохранении адекватного для многих целей разрешения в световом микроскопе (например, для обнаружения генов вирусов и цитоплазматических мРНК). Меченные комплементарные РНК вируса SV40 обеспечивают достаточное количество зерен серебра на автографах после недельной экспозиции, когда с помощью гибридизации выявляется один участок вирусной интеграции на диплоидный набор хромосом [14]. [c.308]

Система бегущий луч по сравнению с обычной телевизионной системой обеспечивает более высокое качество изображения, имеет больший динамический диапазон, быстродействие, высокое пространственное разрешение. Ее недостатки консфуктивная сложность, невозможность конфоля больших объектов из-за падения яркости при увеличении масштаба изображения, снижение световой чувствительности из-за отсутствия процесса накопления сигнала. Эти усфойства применяют в микроскопах для конфоля малых объектов. [c.503]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология