Клетки селезенки

Обработка полиэтиленгликолем облегчает слияние клеток, тем не менее слияние происходит редко и является в достаточной степени случайным событием. В смеси присутствуют клетки миеломы, селезенки, а также слившиеся клетки миеломы-селезенки, миеломы-миело-мы, селезенки-селезенки. Однако в среде ГАТ растут только гибридные клетки миеломы-селезенки, все остальные типы клеток не могут в ней пролиферировать. Клетки селезенки и слившиеся клетки селезенки—селезенки вообще не растут в культуре, а миеломные клетки НОРЕТ и слившиеся клетки миеломы—миеломы не могут использовать гипоксантин в качестве предшественника в процессе биосинтеза пуриновых оснований гуанина и аденина, без которых невозможен синтез нуклеиновых кислот. Но у них есть другой естественный путь синтеза пуринов - при участии дигидрофолатредуктазы, поэтому в состав среды и входит аминоптерин, ингибирующий активность этого фермента. Таким образом, миеломные клетки [c.185]

Партнерами для гибридизации являются клетки селезенки предварительно иммунизированной мыши и клетки культивируемой мышиной миеломной линии Зрг/О—Agl4 или X63-Ag8.6.5.3., резистентные к 8-азагуанину. [c.311]

Рис. 9.2. Скрининг клеток, вырабатывающих моноклональные антитела. Вьщеляют клетки селезенки мыши, иммунизированной специфическим антигеном, и проводят их слияние с клетками миеломы, не вырабатывающими антитела. Слившиеся клетки отбирают по способности к росту на среде ГАТ (гипоксантин, аминоптерин, тимидин). Клетки, вырабатывающие специфические антитела к иммунизирующему антигену (клетки гибридомы), идентифицируют иммунологическими методами и субкультиви-руют, чтобы получить отдельные клоны. Из гибридомы, растущей в культуре и секрсти-рующей единственный тип молекул антител, получают моноклональные антитела.

В кроветворных элементах лимфатических узлов и селезенки также не обнаружено отклонений от нормы. Ретикулярные и эндотелиальные клетки селезенки и лимфатических узлов были в состоянии некоторой [c.567]

Клетки селезенки доноров [c.411]

При применении в качестве иммуногена различных клеток (опухолевые клетки, чужеродные клетки крови, бактерии, паразиты и т. д.) делают несколько инъекций без адъюванта внутрибрюшинно с интервалом в 2—3 недели по (1—5) 10 клеток. Последнюю инъекцию делают внутривенно и через три дня выделяют клетки селезенки для гибридизации. [c.101]

В адаптивном переносе (25—40) 10 клеток вводят внутривенно сингенным реципиентам, предварительно облученным (за 24 ч) дозой 5,5 Гр. Реципиентам затем вводят внутрибрюшинно антиген (на физиологическом растворе). Через 4 сут мышей забивают и выделенные клетки селезенки употребляют для гибридизации. [c.102]

Смешать вместе 10 клеток селезенки и 10 клеток миеломы (точное количество клеток миеломы не очень важно, их отношение с клетками селезенки может колебаться от 1 10 до 1 1). Поместить клетки в центрифужную пробирку на 50 мл и смесь центрифугировать при 400 10 мин при комнатной температуре. [c.107]

Если находят культуру, представляющую интерес, то клетки ресуспендируют и переносят в лунку 24-луночного планшета. В освободившуюся лунку 9б-луночного планшета добавляют свежую среду и продолжают инкубацию (запасная культура). Выращивание в 24-луночных планшетах необходимо вести в присутствии клеток питающего слоя, в качестве которых можно снова использовать макрофаги (по 10 клеток на лунку) или тимоциты (1—2)-10 клеток на лунку) и клетки селезенки (2-10 клеток на лунку). Начиная с этого этапа клетки культивируют в среде ГТ, а через неделю — в среде без добавления нуклеотидов. [c.108]

D8 Антиген, называемый еще Т-8 антигеном и аналогичный Lyt 2(3) антигену у мышей, имеет ММ 32-33 кДа. Широко используют в качестве маркера для субпопуляции Т-клеток — суппрессов и цитотоксических клеток. Антиген также имеется на синусоидальных клетках селезенки. [c.568]

Таким образом, особенности гибридизации заключаются в том, что неслившиеся клетки селезенки лишены способности к длительному культивированию (они исчезают), тогда как миеломные клетки, напротив, за счет своих потенций к росту могут вытеснить гибридные клетки. Чтобы этого не произошло, используют селективные среды. Так, отбирают миеломного родителя с генетическим дефектом по ГГФРТ, не использующего экзогенный гипоксантин [c.575]

ДЛЯ синтеза пуринов. Клетки селезенки не обладают таким генетическим дефектом и поэтому миеломные клетки, не синтезирующие нуклеотиды, через определенноезремя исчезают из культуры. Гибридомы остаются единственными делящимися клетками. Тогда через сутки инкубации 50% объема среды заменяют на среду, содержащую Ю М гщюксантина, 10 М аминоптерина и 4 10 М тимидина (среда ГА1 ). Среду сменяют каждые сутки в течение двух дней, а затем — один раз через 48 часов. Примерно через 2 недели гибридомы начинают активно расти. Необходимо следить, чтобы не было слишком густого роста — признак развития поликлональной популяции негустая суспензия клеток обеспечивает рост моноклональных гибридом (выживаемость клеток при этом невысокая). [c.575]

Получен ассоциат липосом, содержащих метатрексат (ингибитор дигидрофолатредуктазы, противораковое средство), и моноклональных антител к антигенам гистосовместимости мышей. Было показано, что он оказывает специфическое влияние на клетки селезенки. Надо сказать, что исследования по направленному введению лекарственных веществ, содержащихся в липосомах, только начинаются. [c.333]

Местом разрушения эритроцитов и распада гемоглобина являются клетки ретикуло-эндотелиальной системы (клетки костного мозга, купфе-ровы клетки печени, клетки селезенки и др.). При разрушении гемоглобина от него отщепляется простетическая группа, которая теряет атом железа и далее превращается в желчные пигменты — биливердин и билирубин. [c.364]

Антитела появляются в крови животного не сразу после введения антигена, а через нек-рый латентный период, длительностью от 3 дней до 4—6 недель. Образование антител связано не с превращением уже сформированных молекул белка, а с биосинтезом новых молекул белка специфич. строения. Этот процесс происходит гл. обр. в плазматич. клетках селезенки, легких, лимфатич. желез, костного мозга. Антитела образуются в микросомах клеток и затем быстро транспортируются в окружающую клетки среду. Интенсивность и продолжительность биосинтеза антител варьируют в зависимости от природы антигена, способа его введения и вида животного. Повторное введение многих антигенов вызывает значительно более интенсивный биосинтез антител, чем первичное. Продолжительность образования антител у людей после введения антигена может варьировать от недель до десятков лет. [c.111]

Эритроциты существуют приблизительно 120 суток, а затем они разрушаются специальными клетками селезенки и печени. При окислении кольцо гема раскрывается у а-углеродного атома, пирроль-ные ядра I и П становятся концевыми. После этого отщепляются глобин и железо, причем железо вновь участвует в образовании новых молекул гема. Биливердин — тетрапиррольное соединение зеленого цвета — при восстановлении дает билирубин, окрашенный в оранжевый цвет. Функции этих так называемых желчных пигментов пока не ясны. Они собираются в желчном пузыре и из него попадают в двенадцатиперстную кишку, а затем под действием бактерий толстой кишки превращаются в уробилиноген или стерко-билиноген. Эти соединения окрашивают кал в коричневый цвет. [c.350]

Антитела появляются в крови животного не сразу после введения антигена, а через нек-рый латентный период, длительностью от 3 дней до 4—6 недель. Образование антител связано не с превращением ужо сформированных молекул белка, а с биосинтезом новых молекул белка специфич. строения. Этот процесс происходит гл. обр. в плазматич. клетках селезенки, легких, лимфатич. желез, костного мозга. Антитела образуются в микросомах клеток и затем быстро транспортируются в окружающую клетки среду. Интенсивность и продолжительность биосинтеза ан- [c.111]

Картина отравления и токсические концентрации. Для животных. Минимальные смертельные дозы хлористого празеодима для мышей при подкожном введении 2,5 г на 1 кг веса животного, лантана —3,5 г, церия и неодима — 4 г. При введении в желудок кроликов солей Р. Э. в течение длительного времени в дозе 1/20 от смертельной для мышей при подкожном введении — незначительное снижение веса к концу опытов, иногда нейтрофилия при относительной лимфопении. Дозы 20—30 мг на 1 кг веса (иона Р. Э.) при внутривенном введении кроликам приводят к несвертываемости крови в течение многих часов максимальный эффект отмечается через час через 24 часа свертываемость крови вновь нормальна. Картина крови остается без существенных изменений или наблюдается некоторое падение числа тромбоцитов максимальное к концу первого часа после введения. При внутривенном введении больших доз (50—60 мг на I кг веса) потеря аппетита и веса, появление уробилина и уробилиногена в моче, снижение уровня сахара в крови. Животные быстро оправляются, но в печени их обнаруживаются дегенеративные изменения в центре долек, которые после прекращения действия Р. Э. быстро восстанавливаются. Такие же изменения иаблюдаются и при многократном, внутривенном введении. Р. Э. откладываются в куиферовских клетках и в клетках селезенки. В дозах, вызывающих снижение свертываемости крови, Р. Э. снижают кровяное давление у кроликов и кошек. [c.364]

Ацетильная конъюгация. Происходит в печени, слизистой пищеварительного тракта и ретикулоэндотелиальных клетках селезенки и легких. Источник ацетильных групп — ацетил-КоА. Ферменты — аЦетилтрансферазы. Этому типу конъюгации подвергаются вещества, имеющие свободную аминогруппу (серотонин, гистамин, сульфаниламиды, гидразиды изоникотиновой кислоты и др.), К-ЫН2 + + Ацетил-КоА - К-ЫН-СО-СНз + Н8-КоА. [c.485]

Наряду с морфологическими изменениями кишечной стенки при облучении нейтронами обнаружены биохимические нарушения, которые могут лежать в основе подавления митотической активности. Оценивая интенсивность синтеза ДНК в клетках кишечника по включению Н -тимидина, удается отметить подавление образования ДНК, причем более интенсивное, чем в органах кроветворения. Если ОБЭ HeiiTpoHOB с энергией 14 Мэв по действию на включение тимидина в клетки селезенки составляет 1.2, то по угнетающему влиянию на ДНК в кишечнике — 1.8. Естественно, что столь выраженное угнетение синтеза ДНК может явиться причиной клеточных нарушений в кишечнике (Tsuya, Окапо, 1967). [c.75]

Помимо нарушений гемопоэтической активности селезенки, развивающихся в результате описанных выше повреждений, при нейтронном облучении изменяется и ее иммунная функция, что проявляется в снижении продукции гуморальных антител при иммунизации мышей эритроцитами барана. При количественной оценке такого угнетения антителогенеза учитывалось образование антител определенным числом облученных клеток селезенки, которые вводили смертельно облученной мыши той же генетической линии, что и донор ОБЭ нейтронов деления по этому показателю составила 4—5 (Gottlieb, Gengozian, 1970). По данным, полученным с помощью другой методики, — по оценке выработки антител клетками селезенки в культуре, — ОБЭ нейтронов близкой энергии оказалась существенно люньше — 2.3+0.2. Однако и эта [c.96]

На получении клеточных гибридов, которые могут производиться антителами in vitro, основан способ биотехнологии иммунных препаратов — антител, интерферона и др. В организм животного вводят соответствую-ш,ее белковое вещество или заражают его вирусом (для производства интерферона), затем берут из него клетки селезенки, получают клеточные гибриды (гибридомы) и соответствующие иммунопрепараты. В настоящее время многие фармацевтические фирмы производят иммунопрепараты подобным способом. [c.505]

Отложение запасных веществ в лизосомах и выделение с мочой Гистохимические исследования показали, что эти патологические состояния вызваны нарущениями отложения запасных веществ Во многих клетках, в том числе в фибробластах, клетках печени, клетках Купфера, ретикулярных клетках селезенки и лимфатических узлов, лейкоцитах, эпителиальных клетках почеч- [c.30]

Хотя, как указывалось выше, клеточные культуры и находили применение в иммунологии, в течение ряда лет использование этой системы осложнялось следующим обстоятельством. Клетки, синтезирующие интересующие исследователей антитела (например, клетки селезенки животных, иммунизированных специфическими антигенами), плохо росли в культуре или совсем не росли, а клетки миеломы продуцировали антитела с неизвестной специфичностью (разд. 15.4). Способность этих двух типов клеток к слиянию позволила в последнее время наладить крупномасштабное производство моноклональных антител (Kohler, Milstein, 1975). Если мышь иммунизировать неочищенным препаратом антигена и затем клетки ее селезенки гибридизовать с клетками миеломы, то среди полученных гибридных клеток найдется по крайней мере одна, продуцирующая антитела, специфические к исходному антигену. Эта клетка может быть клонирована (разд. 8.1) и трансплантирована в мышь в форме опухоли, продуцирующей высокоспецифические антитела в количестве, измеряемом граммами. Представляя безусловный интерес для иммунологов, это, кроме того, дает возможность биохимику получать антитела к материалу, который он не может должным образом очистить. Такие антитела могут быть, в частности, использованы для генетического анализа антигенов поверхности клеток человека (Barnstable et al., 1978). [c.12]

В качестве клеток питающего слоя используют клетки селезенки, тимоциты, перитонеальные макрофаги, мышиные фибро-бласты и др. В. Лонг и сотрудники (1986) получили очень хорошие результаты при использовании облученных диплоидных фиб-робластов легкого человека (линии IMR-90. MR -5, WI-38). [c.105]

В культуру поглотивщих антиген макрофагов вносились предшественники Т-хелперов, которые были либо генетически идентичными, либо отличались от макрофагов по генам МНС. После определенного времени совместного культивирования Т-клетки переносили во вторичную культуру, содержащую сингенные клетки селезенки (источник антителопродуцентов) и гомологичный антиген. В тех случаях, когда Т-лимфоциты получали от первичной культуры, в которой взаимодействующие клетки были идентичны по генам, контролирующим молекулы II класса, констатировалось сильное развитие иммунного ответа. В то же время Т-клетки от культуры, содержащей не идентичные по генам II класса клетки, оказались неспособными обеспечить хелперный эффект во вторичной культуре. [c.167]

Презентируюшие антиген (АГ) макрофаги (МФ), относящиеся к определенному гаплотипу по генам II класса главного комплекса гистосовместимости (например, 1-А или I-A "), помещали в культуру in vitro вместе с Т-лимфоцитами. После определенного времени совместного культивирования Т-лимфоциты, прошедшие примирование в первичной культуре, переносили во вторичную культуру, куда добавляли интактные клетки селезенки и гомологичный антиген. В тех слу чаях, когда Т-лимфоциты получали от первичной культуры, в которой взаимодействующие клетки (макрофаги и Т-клетки) были идентичны по генам II класса, констатировали выраженное развитие антителопродукции во вторичной культуре. В то же время Т-лимфоциты от первичной культуры, содержавшей не идентичные по генам II класса клетки, оказывались неспособными обеспечить хелперный эффект во вторичной культуре. Иначе, созревание Т-хелперов из предшественников происходит то.тько в условиях идентичности по генам II класса между взаимодействующими клетками [c.168]

Смотреть страницы где упоминается термин Клетки селезенки: [c.313] [c.398] [c.187] [c.211] [c.185] [c.183] [c.574] [c.574] [c.411] [c.62] [c.386] [c.411] [c.415] [c.60] [c.220] [c.41] [c.90] [c.94] [c.96] [c.97] [c.118] [c.167] [c.168]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология