Интерферон кролика

Электростатические взаимодействия играют важную роль в связывании ферментов на аффинных колонках, поскольку увеличение ионной силы (увеличение концентрации соли в элюирующем буфере) обычно приводит к десорбции связанных ферментов с аффинных адсорбентов различных типов. Однако для некоторых ферментов в присутствии соли увеличивается прочность связывания, например, в результате гидрофобных взаимодействий, обусловливающих сорбцию интерферона фибро-бластов [15], интерферона кролика [16] и изоцитратдегидроге-назы из сердца человека [17] на иммобилизованном цибакроне голубом З-ОА. В таких случаях при увеличении ионной силы элюента белки не элюируются с колонки и для их десорбции необходимо применение таких элюентов, как 50%-ный (об./об.) зтиленгликоль. [c.112]

Микроинъекцию клонированных генов проводят в один или оба пронуклеуса только что оплодотворенной яйцеклетки мыши. После инъекции яйцеклетку немедленно имплантируют в яйцевод приемной матери или дают возможность развиваться в культуре до стадии бластоцисты, после чего имплантируют в матку. Таким образом были инъецированы гены интерферона и инсулина человека, ген глобина кролика, ген тимидинкиназного вируса герпеса и кДНК вируса лейкемии мышей. Выживает обычно от 10 до 30 % яйцеклеток, а доля мышей, родившихся из трансформированных яйцеклеток, составляет от нескольких до 40 %. [c.127]

Поскольку дрожжи представляют собой эукариотический организм, можно было бы ожидать, что гены различных эукариот, в том числе и те, которые содержат интроны, будут корректно экспрессироваться в дрожжевых клетках. Однако это не так. Например, экспрессия генов -глобнна кролика в дрожжах не происходит благодаря некорректности транскрипции и последующего сплайсинга РНК. Тем не менее, применяя приемы, аналогичные использовавшимся при клонировании в бактериях, удается достичь синтеза чужеродных белков в дрожжевых клетках. Такие клетки, подобно В. subtilis, секретируют значительное количество белков во внеклеточную среду, что используют также для секреции чужеродных белков. С этой целью к экспрессируемому гену присоединяется участок, кодирующий сигнальный пептид, обусловливающий секрецию и отщепляемый в ее процессе. В результате в клетке синтезируется белок, содержащий на N-конце сигнальный пептнд. Этот белок секретируется в окружающую среду. Таким образом были получены, например, штаммы дрожжей, секретирующие интерферон человека. [c.440]

Созданы и применяются в производстве высокочувствительные диагностические препараты на основе метода ИФА (иммуноферментного анализа), ДНК-зондов, внедрения полимеразной цепной реакции (ПЦР).Используются моноклональные антитела, полученные методом гибридомной технологии. Получены генетически трансформированные кролики с геном асРНК, устойчивые к вирусам лейкоза, а также трансгенные кролики с геном альфа-2 интерферона. Разработана рекомбинантная вакцина против лейкоза крупного рогатого скота на основе оспененного вектора. На культуре клеток нарабатывается антиген и производится диагностика лейкоза крупного рогатого скота. Генно-инженерные вакцины против ящура и сибирской язвы производятся в объемах, обеспечивающих потребности в них России, стран СНГ и ряда других государств мира. [c.428]

Одной из наиболее интересных новых разработок является создание гибридных интерфероновых генов с использованием удобных общих участков расщепления рестриктазами. Таким способом могут быть получены многие гибридные интерфероны с определенными биологическими и фармакологическими свойствами. Интересно выяснить, можно ли улучшить в каких-либо отношениях природные гены интерферонов. Эта область только начинает развиваться, поскольку определение свойств рекомбинантных молекул интерферонов требует времени. К интересным для изучения свойствам интерферона относится его специфичность по отношению к мишени. Даже природные виды а-ИФН сильно различаются по этому признаку. Некоторые виды а-ИФН более активны в клетках человека по сравнению с клетками быка, другие наоборот некоторые активны в клетках кролика, другие в той же степени активны в мышиных клетках [260]. Сейчас создано несколько гибридных генов а-ИФН человека [230, 262] и оказалось, что они сильно различаются по своей способности подавлять размножение разных вирусов в различных клетках и в организме разных животных [261]. Удалось идентифицировать отдельные аминокислотные остатки, от которых существенно зависит хозяйская специфичность интерферона [191]. [c.46]

В профилактических и терапевтических исследованиях с экзогенными интерферонами in vivo используют большое разнообразие животных, индуцирующих вирусов, схем введения и доз интерферона. Опыт, накопленный на сегодняшний день, показывает, что профилактика или раннее лечение интерфероном намного эффективнее лечения, которое начинают проводить после появления симптомов заболевания. Во многих случаях противовирусный эффект улучшается также при увеличении доз интерферона. Показано, что местное применение интерферона эффективно при поражении глаз и кожи кролика вирусом осповакцины, а также при герпетическом кератите обезьян. Системное применение интерферона защищает мышей от внутримозгового заражения VSV отмечено также снижение смертности мышей, леченных интерфероном в течение четырех дней после интраназального заражения их тем же вирусом. Интерферон защищает обезьян против заражения вирусом осповакцины и HSV и обладает некоторой эффективностью против вируса бешенства при введении после заражения [83]. [c.121]

С использованием разработанной методики была оптимизирована экспрессия в Е. соЫ кодирующих последовательностей /З-глобина кролика, фибробластного интерферона человека и некоторых дрзтих. [c.152]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология