Вирус лейкозов

Рис. 9.5. Геном вируса лейкоза мышей Молоки-ретровируса (РНК-вирус, содержащий ген фермента обратной транскриптазы), ДНК-тран-скрипт которого встраивается в геном млекопитающего и может использоваться в качестве вектора для переноса генов млекопитающих в клетку [2296].

Рис. 57.4. Схематическое изображение процесса активации протоонкогена в результате вставки энхансера. А. Нормальная хромосома курицы содержит неактивный ген туе. Б. Вирус лейкоза птиц встраивается в хромосому в форме провируса в области, соседней с геном туе. В данном случае, однако, сайт интеграции расположен за геном туе и не может работать как промотор (рис. 57.6). Определенная последовательность провируса в данном случае выступает в роли энхансера, что ведет к активации гена туе и транскрипции его. Для простоты изображена лишь одна цепочка ДНК.

Созданы и применяются в производстве высокочувствительные диагностические препараты на основе метода ИФА (иммуноферментного анализа), ДНК-зондов, внедрения полимеразной цепной реакции (ПЦР).Используются моноклональные антитела, полученные методом гибридомной технологии. Получены генетически трансформированные кролики с геном асРНК, устойчивые к вирусам лейкоза, а также трансгенные кролики с геном альфа-2 интерферона. Разработана рекомбинантная вакцина против лейкоза крупного рогатого скота на основе оспененного вектора. На культуре клеток нарабатывается антиген и производится диагностика лейкоза крупного рогатого скота. Генно-инженерные вакцины против ящура и сибирской язвы производятся в объемах, обеспечивающих потребности в них России, стран СНГ и ряда других государств мира. [c.428]

Другая важная задача — выведение трансгенных животных, устойчивых к заболеваниям. Потери в животноводстве, вызванные различными болезнями, достаточно велики, поэтому все более важное значение приобретает селекция животных по резистентности к болезням, вызываемых микроорганизмами, вирусами, паразитами и токсинами. Пока результаты селекщш на устойчивость животных к различным заболеваниям невелики, но обнаде-живающи. В частности, созданы популяции крупного рогатого скота с примесью крови зебу, устойчивые к некоторым кровепаразитарным заболеваниям. Установлено, что защитные механизмы от инфекционных заболеваний обусловлены либо препятствием вторжению возбудителя, либо изменением рецепторов. Вторжению возбудителей, равно как и их размножению, препятствуют в основном иммунная система организма и экспрессия генов главного комплекса гистосовместимости. Одним из примеров гена резистентности у мышей служит ген Мх. Этот ген, обнаруженный в модифицированной форме у всех видов млекопитающих, вырабатывает у Мх -мышей иммунитет к вирусу гриппа А. Ген Мх был вьщелен, клонирован и использован для получения трансгенных свиней, экспрессирующих ген Мх на уровне РНК. Однако данные о трансляции Мх-протеина, обусловливающего устойчивость трансгенных свиней к вирусу гриппа А, пока не получены. Ведутся исследования в целях получения трансгенных животных, резистентных к маститу за счет повышения содержания белка лакто-ферина в тканях молочной железы. На культуре клеток из почек трансгенных кроликов было показано, что клеточные линии, содержащие трансгенную антисмысловую РНК, имели резистентность против аденовируса Н5 (Ads) более высокую на 90 — 98% по сравнению с контрольными линиями клеток. Л. К. Эрнст продемонстрировал также устойчивость трансгенных животных с геном антисмысловой РНК к лейкозу крупного рогатого скота, к заражению вирусом лейкоза. [c.130]

Показана возможность создания внутриклеточной иммунизации против инфекционных вирусов. Эндогенные вирусные белки, в особенности их мутационные формы, могут служить защитой от соответствующих вирусов. В частности, получены трансгенные куры, устойчивые к вирусу лейкоза, у которых в клетках экспрессировался белок вирусной оболочки. [c.235]

Вирус лейкоза птиц То же [401, 403 [ [c.274]

АЬУ вирус лейкоза птиц [c.487]

ВЬУ вирус лейкоза крупного рогатого скота [c.487]

Ретровирусы + 80-100 Вирусы лейкоза человека, иммунодефицита человека [c.39]

Липосомный гелиомицин проявил активность против вируса лейкоза Раушера -скорость развития опухоли уменьшалась в 2 раза, хотя терапевтический индекс остается низким (около 10). Определена переносимая доза для мышей при внутрибрюшинном введении - 50 мг/кг, ЬВзо 75 мг/кг. [c.182]

Липосомный гелиомицин проявил активность против вируса лейкоза Раушера [c.157]

Как уже было сказано в начале этого раздела, другим методом получения трансгенных животных (в частности, мышей) является заражение предимплантированных эмбрионов рекомбинантными ретровирусами, которые оказались удобными объектами для этих целей. Геном ретровирусов сравнительно небольшой и с ним относительно легко манипулировать, вводя в него чужеродные гены ретровирусы достаточно инфекционны в отношении пермис-сивных клеток (почти 100% заражение их), а единственна копия ретровирусного генома ДНК прочно и строго определённым образом интегрируется с ДНК клетки-мишени и эти последние способны экспрессировать привнесенные вирусом гены. Уровень экспрессии клонированных генов заметно повышается вследствие того, что в ретровирусах имеются весьма активные транскрипционные энхасеры, или усилители (см.). Известные ретровирусные векторы ведут свое происхождение от вирусов лейкоза мышей (MLV) или от вирусов птиц (ALV). [c.584]

В других экспериментах этой же группы ученых продемонстрирована устойчивость трансгенных животных с геном антисмысловой РНК против лейкоза крупного рогатого скота к заражению вирусом лейкоза. У траисгенных кроликов с геном антисмысловой РНК против лейкоза крупного рогатого скота, зараженных антигеном р24, уровень антител был значительно ниже и не превыщал титр 1 500 по сравнению с контрольными, у которых он изменялся в пределах 1 6000 — 1 8000. [c.235]

Все, что мы уже рассмотрели, относилось преимущественно к миксовирусам — одним из наиболее хорошо изученных вирусов, имеющих оболочку. Судя по имеющимся данным, оба опухолевых РНК-содержащих вируса (вирусы лейкозов) — вирусы птиц и мышей — содержат большое количество липидов (30—35% по-видимому, разное у разных частиц одного вируса) и мало углеводов. Для белка (или белков), входящего в состав оболочек этих вирусов, характерна штаммо- (илн тино-)специфич-ность в отличие от внутренних белков нуклеокапсида, различающихся только у разных групп вирусов (группоспецифичные), белок (или белки) оболочки обнаруживает [c.138]

У всех более сложных вирусов, отличающихся наличием наружных оболочек (миксовирусы, парамиксовирусы, вирусы лейкозов, энцефаловирусы, вирусы группы герпеса) или различных органелл (мембраны вируса оспы и фаговые отростки), также обнаружено много различных белков. Эти вирусы мы рассмотрим в последующих разделах. [c.162]

Рис. 57.3. Схематическое изображение процесса активации протоонкогена в результате вставки промотора. А. Нормальная хромосома курицы содержит неактивный ген туе. Б. Вирус лейкоза птиц интегрирован в хромосоме в виде провируса в области, соседней с геном туе. Правый длинный концевой повтор провируса (LTR), содержащий сильный промотор, локализован до гена туе, активирует его, и в результате начинается транскрипция /иус-мРНК. Для простоты изображена

Некоторые данные о репликации вируса саркомы Рауса служат довольно ясным намеком на механизм онкогенеза, индуцированного РНК-содержащими вирусами. Оказалось, что уже на ранних стадиях инфекции вирусом саркомы Рауса должен происходить синтез ДНК, и при этом необходимо, чтобы ДНК функционировала на протяжении всего процесса репликации вируса [24] — обстоятельство, прямо противоположное тому, что наблюдается с репликацией всех неонкогенных РНК-содержащих вирусов. Высказывалось предположение, что РНК — ДНК-гибрид может представлять собой эквивалент репликативной формы (РФ) этих онкогенных вирусов [24]. Существует также предположение об образовании двух-ценочечных ДНК-провирусов, включенных в геном хозяина [497] Опыты по гибридизации ДНК хозяина и РНК вируса саркомы Рауса или РНК какого-нибудь другого вируса лейкоза показали, что небольшие сегменты этих РНК, особенно богатые аденином, комплементарны к ДНК-хозяина 1180, 181]. [c.276]

Цель настоящей главы — очертить рамки практического использования ретровирусов в качестве экспрессирующих векторов общего назначения и описать методы размножения вирусов, тестирования и инфицирования, которые являются общими для большинства процедур, описанных выше. Всех деталей специализированных экспериментов мы касаться не будем. Большинство ретровирусных векторов, описанных на сегодняшний день, ведет свое происхожедние либо от вирусов птиц, либо от вирусов лейкоза мышей (ВЛМ, МЬУ). В данной главе мы сконцентрируем внимание на векторных системах типа МЬУ и экспериментальных процедурах, связанных с использованием этих векторов. [c.274]

Ретровирусы представляют семейство РНК-содержащих вирусов, репликативный цикл которых отличается тем, что вирусный РНК-геном транскрибируется в ДНК-форму эту функцию обеспечивает обратная транскриптаза —фермент, кодируемый вирусным геномом. Жизненный цикл типичного ретровируса, такого, например, как вирус лейкоза мышей (МЬУ), показан в упрощенном виде на рис. 9.1. Вирусные частицы, каждая из которых содержит две копии одноцепочечного РНК-генома, образованы центральным нуклеопротеиновым кором, окруженным мембраной, которая несет на своей наружной поверхности специфическую оболочку из гликопротеинов. Инфицирование [c.274]

В случае простейшего ретровирусного вектора транс-дейст-вующие вирусные структурные гены удаляют и на их место встраивают один или несколько рестрикционных сайтов для клонирования. Известно несколько векторов этого типа (см., например, [18, 19]). В качестве примера вектора, рассчитанного на клонирование одиночных генов, можно назвать вектор на основе вируса лейкоза мышей Молони (Mo-MLV), обозначаемый рМХ1112 (рис. 9.3, а). В этой конструкции полилинкер содержащий множественные рестрикционные сайты для клонирования, введен на место удаленных вирусных генов gag, pol и env. Клонированный в данном векторе чужеродный ген эффективно экспрессируется благодаря промотору в составе вирусного 5 -LTR, а наличие ч с-действующих вирусных последовательностей позволяет этой системе формировать инфекционные части- [c.279]

Вирусы лейкозов. В эту группу входят вирусы, вызы-вающие опухолевые заболевания домашних животных, в гом числе птиц, а также мышей. Это вирусы саркомы Рауса, эритробластоза, миелобластоза и лимфоматоза кур и лейкозов мышей [c.9]

Энхансеры обладают слабой видовой специфичностью. Они способны проявлять свою активность в клетках отдаленных видов например, энхансер гистоновых генов морского ежа работает в клетках лягушки, энхансер гена теплового шока дрозофилы — в клетках млекопитающих. Тем не менее в своих клетках энхансеры работают несколько лучше. Энхансер обезьяньего вируса SV40 в 3 раза более активен в клетках обезьяны, чем в клетках мыши, а энхансер вируса лейкоза мышей — наоборот. [c.72]

Горизонтальная трансмиссия ретровирусов установлена в нескольких случаях, например для вирусов лейкоза кошек, лимфомы гиббона, лейкоза крупного рогатого скота. [c.206]

Для некоторых линий мышей характерна спонтанная активация эндогенных РНК-содер-жащих онкогенных вирусов, приводящая к развитию лейкоза. У животных других линий опухоли, которые могут экспрессировать вирусные антигены и продуцировать инфекционный вирус лейкоза мышей (МииУ), образуются в том случае, если им вводить канцерогенное химическое соединение. Такие опухоли экспрессируют как общие опухолеассоциированные антигены, так и опухолеспецифические антигены, рассматриваемые ниже. У организма-хозяина, однако, эндогенные РНК-содержашие вирусы вызывают лишь слабый иммунный ответ, возможно, из-за иммунологической толерантности (см. гл. 14). [c.379]

Большинстворетровирусных векторов создано на базе вируса лейкоза мышей (MT.V) Векторы, в которых сохранились только концевые повторы LTR и is- действующие сайты Р, Ри и psi си. рис. 13.4, а), позволяют клонировать до 8 т.п.н. чужДНК. Полезным свойством таких векторов является полное отсутствие вирусных белков в трансдуцированных клетках, и поэтому in vivo эти клетки не будут восприниматься иммунной системой организма как чужие. Это обстоятельство совместно с фактом, что терапевтический ген интегрируется в клеточную хромосому, обеспечивают стабильность терапевтического эффекта. Однако рет- [c.422]

Обычно энхансеры соверщенно разных генов класса II взаимозаменяемы. В качестве примера можно привести энхансеры регуляторных областей вируса лейкоза мышей и 8У40. Более того, энхансер 8У40 может функционировать в самых разных дифференцированных тканях млекопитающих он также стимулирует транскрипцию у амфибий, в клетках растений и даже у дрожжей 5. ротЬе. Энхансер часто обусловливает временную и клеточную специфичность активации транскрипции гена. Например, как мы увидим позже, при обсуждении регуляции транскрипции клеточных генов, энхансеры, ассоциированные с некоторыми генами, оказываются активными только на определенных стадиях развития (разд. [c.52]

Ретровирусы Вирус саркомы Рауса Вирус лейкоза мышей Молони [c.253]

Вирус лейкоза мышей Адельсона Эритроблас-тозные клетки птиц [c.350]

Как было обнаружено во многих работах, индуцированное интерфероном подавление размножения ретровирусов не всегда коррелирует с индукцией антивирусного состояния против литических вирусов [11]. Например, обработка хронически зараженных вирусом RD-114 клеток а-ИФН или -ИФН приводит к подавлению размножения ретровируса, но репликация VSV или вируса ЕМС устойчива к интерферону в этих клетках [97], что коррелирует с отсутствием образования киназы и синтетазы [244]. Исследовано влияние интерферона на образование вируса лейкоза мышей Молони в двух клонах клеток мышей Swiss. Образование этого вируса подавлялось в одинаковой степени, хотя один клон был значительно чувствительнее к интерферону, чем другой, когда индукцию антивирусного состояния измеряли по степени подавления репликации вируса ЕМС [45]. Судя по подавлению размножения вируса MoLV, клетки NIH/3T3 очень чувствительны к интерферону, но, судя по подавлению репликации вируса ЕМС, они устойчивы к нему. В отличие от этого в клетках А204 как репликация ретровируса М7 и вызываемое им слияние клеток, так и размножение вируса ЕМС и VSV очень чувствительны к интерферону [244]. [c.66]

Всегда существует вероятность присутствия в вакцинах случайных живых агентов. К счастью, это редко становится проблемой. Некоторые ранние серии живой полиовирусной вакцины были контаминированы живым вирусом SV40, но этот вирус быстро удалили, и все последующие серии вакцины были свободны от него [68]. Живая вакцина против желтой лихорадки сначала содержала вирус лейкоза птиц, но впоследствии ее удалось очистить от этого агента [161]. В длительных наблюдениях за индивидуумами, которые получили живую вакцину, конта-минированную вирусом SV40 или вирусом птичьего лейкоза, не было обнаружено каких-либо отрицательных долгосрочных эффектов, связанных с этими посторонними вирусами, например заболеваний раком [118, 190]. Тем не менее благоразумие требует, чтобы живые вирусные вакцины были свободны от подоб- [c.166]

Вирус раневых опухолей и вирус карликовости риса содержат приблизительно в нять раз больше РНК, чем многие другие вирусы растений (например, BT1VI и В КМТ). В связи с этим высказывали мысль о том, что двух-ценочечная структура для таких высокомолекулярных РНК необходима для того, чтобы сделать их стабильными в отношении клеточных нуклеаз, однако следует иметь в виду, что на единицу длины цепи небольшие молекулы РИК так же чувствительны к деградации нуклеазами, как и крупные. Кроме того, некоторые вирусы животных имеют еш е более крупные РНК, для которых характерна тем не менее одноцепочечная структура (например, вирусы лейкоза птиц). Несмотря на то что эти вирусы, конечно, весьма нестабильны, они в то же время обладают высокой степенью инфекционности. [c.69]

Известно, что опухоли индуцируются (вызываются) вирусами, а также химическими и физическими канцерогенами и имеют свои специфические антигены. Антигены опухолей, вызываемых вирусами (саркома Рауса, вирус лейкоза и др.), имеют одинаковую специфичность, но отличаются от антигенов, вызываемых химическими (бензпирен и др.) и физическими (все виды излучений) канцерогенами. В последнем случае опухоли по антигенной специфичности строго индивидуальны, т.е. различаются по антигенности. Имеются также эмбриональные антигены, которые не встречаются в норме в постнатальном периоде, но обнаруживаются в случае возникновения опухолей (гепато-мы, саркомы, карциномы). Поскольку любые опухолевые антигены являются чужеродными для организма, они вызывают гуморальные и клеточные реакции. [c.168]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология