Хроматография ионообменная гель-проникающая

Очистку препаратов гемицеллюлоз часто проводят через медно-щелочные соединения. Для очистки и разделения гемицеллюлоз применяют также различные виды хроматографии (адсорбционную, распределительную, ионообменную, гель-проникаю-щую). [c.278]

Более подробное рассмотрение студней, возникающих при синтезе ионообменных смол, выходит за пределы задач настоящей книги. Мы кратко коснемся этого вопроса еще раз в связи с рассмотрением метода гель-проникаю-щей хроматографии, основанного на различии в проницаемости студней для молекул разного размера и позволяющего разделить полимер по молекулярному весу. [c.239]

В последние годы появились приборы, позволяющие проводить разделение соединений методом хроматографии под высоким давлением. В этом случае неподвижную фазу помещают в узкую стальную колонку, в которую затем под давлением нагнетают подвижную жидкую фазу. Применение высокого давления позволяет использовать значительно более длинные колонки и одновременно существенно сокращать время разделения. Метод универсален, поскольку может применяться во многи видах хроматографического разделения адсорбционной хроматографии, распределении в системе жидкость—жидкость, а также ионообменной и гель-проникаю-щей хроматографии. Оборудование для жидкостной хроматографии под давлением включает обычно одну или несколько детекторных систем для непрерывной регистрации выхода элюата из колонки. [c.105]

В случае ионообменной хроматографии фермент и ионы Mg +, вероятно, элюируются при различных ионных силах. При использовании гель-проникающей хроматографии они могут разделяться за счет различий в размерах. В результате обеих процедур фермент теряет ионы магния, что может приводить к денатурированию. Этого можно избежать в случае гель-проникаю-щей хроматографии, если гель предварительно уравновесить с Mg2+, а элюирование проводить буфером, содержащим Mg2+. [c.552]

Для объяснения процессов, происходящих в гранулах геля, был предложен ряд гипотез подробно они будут рассмотрены в гл. 1И. Здесь же мы лишь констатируем следующее смесь веществ можно разделить по молекулярным весам на слое гранулированного геля соответствующей пористости. Не подлежит сомнению, что это хроматографический процесс, поскольку растворенные вещества проникают в неподвижную фазу, в результате чего смесь разделяется на компоненты. В настоящее время существует в основном лишь два способа подобрать термин для нового хроматографического метода для этого используют либо применяющийся носитель (например, хроматография на бумаге), либо процесс, который, как полагают, лежит в основе разделения (например, распределительная хроматография). В соответствии с этим метод разделения ионов на заряженном полимере можно назвать либо хроматографией на ионообменных смолах, либо ионообменной хроматографией. То же относится и к обсуждаемому здесь методу. В табл. 1 приведены все предложенные для него названия, каждое из которых имеет как преимущества, так и недостатки. [c.20]

Относительно недавно в хроматографии начали использовать ионообменные полимеры типа оксиалкилметакрилатного геля с макропористой гидрофильной матрицей (ср. гл. 7, рис. 7.4 и гл. 6, разд. 6.2.4). Эти иониты (карбоксиметильные, фосфо-, сульфо- и диэтиламиноэтильные производные) химически устойчивы, в их поры могут проникать и при этом не претерпевать денатурирования макромолекулярные биополимеры. Поскольку эти иониты достаточно прочны и хорошо проницаемы для жидкостей, их можно применять в жидкостной хроматографии при высоком давлении даже для разделения биополимеров [123а]. [c.234]

Рис. 4-46. Три типа матриксов, используемых для хроматографии. При ионообменной хроматографии (А) нерастворимый матрикс содержит ионы, задерживающие молекулы с противоположным зарядом. Для разделения молекул используются следующие матриксы диэтиламиноэтилцеллюлоза (ДЭАЭ-целлюлоза) - заряжена положительно карбоксиметилцеллюлоза (КМ-целлюлоза) и фосфоцеллюлоза - заряжены отрицательно. Силы взаимодействия между молекулами в растворе и ионообменником определяются ионной силой и pH элюирующего раствора, которые для достижения эффективного разделения можно варьировать определенным образом (как на рис. 4-47). При хроматографии по методу гель-фильтрапии (Б) матрикс инертен, но содержит поры. Низкомолекулярные соединения проникают внутрь частиц матрикса. Оказавшись при этом в относительно большем объеме, они проходят через колонку медленнее. В качестве матрикса можно использовать зерна поперечно-сшитого полисахарида (декстран или агароза). Поскольку в продаже имеются полисахариды с самым различным размером пор, их можно использовать для фракционирования молекул с молекулярной массой от 500 до 5 х 10 дальтон. При аффинной хроматографии (В) используется нерастворимый матрикс, ковалентно связанный со специфичными лигандами (антителами или субстратом ферментов), которые присоединяют определенный белок. Связываемые иммобилизованным субстратом молекулы фермента можно элюировать концентрированными растворами субстрата в свободной форме, а молекулы, связанные с иммобилизованными антителами, можно элюировать за счет диссоциации комплекса антитело антиген концентрированными растворами соли или растворами низкого или высокого pH. Однократная хроматография на такой колонке позволяет

Справочник химика 21

Химия и химическая технология