ИЭФ в слое гранулированного геля

Разнообразная формовка позволяет получать частицы любой формы и размеров, регулировать поверхность и пористость катализатора, изменять механическую его прочность. Износоустойчивые контакты, используемые для работы в кипящем слое, лучше формовать методом коагуляции, дающим сферические высокопрочные гранулы. Однако область применения этого метода ограничивается относительно малоподвижными гелями коллоидных веществ. Для осажденных катализаторов наиболее характерна технология крупнотоннажного производства гранулированного алюмосиликатного катализатора крекинга нефтепродуктов. [c.105]

Для объяснения процессов, происходящих в гранулах геля, был предложен ряд гипотез подробно они будут рассмотрены в гл. 1И. Здесь же мы лишь констатируем следующее смесь веществ можно разделить по молекулярным весам на слое гранулированного геля соответствующей пористости. Не подлежит сомнению, что это хроматографический процесс, поскольку растворенные вещества проникают в неподвижную фазу, в результате чего смесь разделяется на компоненты. В настоящее время существует в основном лишь два способа подобрать термин для нового хроматографического метода для этого используют либо применяющийся носитель (например, хроматография на бумаге), либо процесс, который, как полагают, лежит в основе разделения (например, распределительная хроматография). В соответствии с этим метод разделения ионов на заряженном полимере можно назвать либо хроматографией на ионообменных смолах, либо ионообменной хроматографией. То же относится и к обсуждаемому здесь методу. В табл. 1 приведены все предложенные для него названия, каждое из которых имеет как преимущества, так и недостатки. [c.20]

Любая теория, касающаяся поведения на слое гранулированного геля веществ с различными размерами молекул, должна учитывать эти результаты. При экспериментальной проверке каждой новой теории с помощью стандартов следует иметь в виду, что результаты, не прошедшие статистической обработки, нельзя считать достаточно точными. В следующих разделах коротко рассмотрены различные подходы к созданию теории гель-хроматографии и дана их оценка в свете имеющихся экспериментальных данных. [c.115]

Методы с применением тонких слоев гранулированных гелей как поддерживающей среды сохраняют все преимущества описанного выше ИЭФ в геле и, кроме того, обладают рядом других полезных качеств. Так, в гранулированных гелях не возникают артефакты, связанные с полимеризацией, а эффект молекулярного сита не влияет на процесс фокусирования. Поэтому в таких гелях удается легко разделять и белки с большой молекулярной массой. Есть примеры использования для тонкослойного ИЭФ сефадексов 0-75 и 0-200, а также биогеля Р 60 [288, 1051, 1052]. [c.160]

Для обнаружения сфокусированных в тонком слое гранулированного геля макромолекул либо проводят сканирование геля при 280 нм, либо получают реплику на бумаге [1051, 1052]. Для этого на поверхность геля накладывают лист фильтровальной бумаги, а через некоторое время, достаточное для диффузии определимого количества белка в бумагу, его снимают, высушивают и окрашивают. [c.161]

ИЭФ В СЛОЕ ГРАНУЛИРОВАННОГО ГЕЛЯ [c.60]

Навеску промытого порошка сефадекса (или одного из наз- анных фирменных гелей) медленно, с перемешиванием высыпают в стакан с 2%-ным раствором амфолитов с таким расчетом, чтобы получить 4%-ную суспензию, считая по отношению сухого веса сефадекса к конечному объему смеси. Не следует выливать раствор амфолинов на сухой гель — это приведет к образованию комков. Суспензию тщательно, но осторожно чтобы не измельчать гранулы, перемешивают и, не дожидаясь полного набухания сефадекса, выливают на специальный поднос для формирования слоя гранулированного геля. Установленный строго горизонтально, поднос представляет собой прямоугольную стеклянную пластинку, соответствующую размерам охлаждающего столика прибора и ограниченную рамкой из силиконовой резины. 70—100 мл суспензии заливают таким образом, чтобы полужидкий ровный слой имел толщину 3—4 мм. З тем гель подсушивают до такой консистенции, когда на поверхности геля уже не видно влаги, но в его толще еще не возникают микротрещины. Это —довольно деликатная операция, и фирма LKB рекомендует контролировать ее ход по весу геля. Предварительно взвесив пустой поднос, можно следить за уменьшением веса геля в ходе подсушивания и прекратить его, когда содержание влаги уменьшится на 39—40%- Само подсушивание фирма рекомендует осуществлять с помощью вентилятора, установленного на высоте 70 см над пластиной, без подогрева воздуха. К моменту окончания подсушивания поверхность геля должна оставаться гладкой, а при наклоне в 45° он не должен сползать. Вся операция занимает около 2 ч. [c.62]

Кроме очевидного удобства внесения препарата (в любой точке градиента pH), обнаружения и элюции белков, что обусловлено горизонтальным расположением и открытой поверхностью геля, подчеркнем относительную нечувствительность рассматриваемого метода к возможности выпадения в осадок некоторых белков вблизи их изоэлектрической точки. В описанной системе эти осадки будут уходить на дно слоя геля, освобождая его сечение для свободного протекания тока и миграции других белков. При извлечении сефадекса из секции осадок можно собрать вместе с гелем, перенести в колонку и в ходе элюции снова растворить, использовав для этого подходящий буфер или солевой раствор. Возможность примириться с выпадением осадков особенно ценна на ранних стадиях очистки, когда очищаемый белок может составлять лишь малую долю всей белковой смеси. Допуская выпадение в осадок балластных белков, можно значительно увеличить загрузку геля н повысить выход нужного белка. Практика показывает, что для узких диапазонов pH загрузку гранулированного геля при ИЭФ можно довести в случае одного основного белка до 2—4 мг на 1 мл объема геля, а для смеси белков — до 5—10 мг/мл. Прн объеме геля в 80 мл это составляет внушительную величину общей загрузки — до 800 мг белковой смеси. [c.66]

Процессы тепло- и массообмена между твердой и газовой фазами завершаются на весьма небольшом расстоянии от газораспределительной решетки, как правило, в пределах активной зоны. Так, процесс охлаждения гранулированных удобрений в псевдоожиженном слое практически заканчивается уже на расстоянии 13 мм. от решетки 202]. Присушке геля кремниевой кислоты разность температур между фазами в слое наблюдается лишь на расстоянии 6 мм от решетки [583]. Температура слоя при сушке силикагеля и окиси алюминия изменялась только на протяжении 50 мм от решетки, а по всей остальной высоте остается неизменной и равной температуре отходящего газа [605]. Аналогичным явилось распределение концентраций компонентов ожижающего агента в процессе адсорбции паров изооктана и толуола [686], при крекинге кумола [569] и т. д. [c.597]

Частицы силикагеля сферической формы могут быть получены и путем обработки гранулированных частиц в кипящем слое или непрерывным формованием мелких частиц геля со связующим. Для этой же цели в процессе образования геля можно применить следуюш ие способы [c.43]

Газ-носитель гелий, который теперь содержит только диоксид углерода и азот, проходит через двойной детектор 6. Между детекторами находится поглотительная трубка, содержащая аскарит. Таким образом, эти детекторы измеряют количество диоксида углерода в газе и соответственно содержание углерода в веществе. Наконец, газ-носитель, содержащий теперь только азот, поступает в третий одинарный детектор 7, который выдает сигнал, пропорциональный содержанию азота. Прибор можно использовать для определения кислорода, если заменить нагреватель на высокотемпературную печь (1120°С), а трубку для сжигания — на керамическую или кварцевую трубку, заполненную гранулированным углем. Моноксид углерода, образующийся из кислорода анализируемого вещества, превращается в слое оксида меди в диоксид углерода. [c.542]

Изоэлектрическое фокусирование [42 — 45] в линейном градиенте pH позволяет разделить белки, характеризующиеся различными изоэлектрическими точками. Для создания градиента используют носители с цвнттер-ионными свойствами — алифатические полиаминополикарбоновые кислоты, имеющие М 200 — 700. При движении в градиенте pH суммарный заряд белка постоянно меняется, и в области pH, близких к изоэлектрической точке, становится равным нулю. Соответствующий белок фокусируется , образуя узкую зону. При препаративном фокусировании в колонке стабилизация градиента pH осуществляется с помощью градиента плотности используемого буферного раствора, однако чаще работают с плоскими слоями полиакриламидного или гранулированного геля. Опубликовано краткое сообщение о непрерьтном электрофокусировании без носителя [46]. Эффективность электрофокусирования высока. Так, возможно, например, разделить белки, различающиеся по ИЭТ лишь на 0,01 единицы pH. При разделении сыворотки образуется более 40 белковых полос. [c.351]

Гомогенные гели из полиакриламида широко применяются для электрофоретического разделения белков. Гранулированные гели вполне могут служить носителями для гель-хроматографии в водных средах [11, 12]. Получают гели очень просто. В качестве окислительно-восстановительного катализатора радикальной полимеризации используют главным образом персульфат аммония, а в качестве регулятора — р-диметиламинопропионитрил. Когда слой реакционной массы не слишком велик, полимеризацию можно также инициировать путем облучения видимым светом в присутствии рибофлавина [13]. Готовый гель после лиофильной сушки измельчают в ступке, а затем просеивают или же его продавливают во влажном состоянии через сито с порами соответствующего размера (0,1—0,2 мм). Специальная аппаратура для этой цели описана Хьертеном [14]. Гранулирование можно также проводить, продавливая гель стеклянной пробкой через стальное сито (например, с отверстиями 160 мк) из обычного набора. Величина пор в готовом геле определяется прежде всего общей концентрацией мономера в реакционной массе и во вторую очередь— содержанием бифункционального мономера. Варьируя концентрацию мономера от 4 до 16% при постоянном содержании сшивки 5%, Хьертен [14] получил серию гелей с различной степенью набухания [c.35]

Изучено выщелачивание [Na2 r04] из неподвижного слоя гранулированного спека [1134, 1172]. Незначительные добавки Ма2510з при выщелачивании позволяют снизить потери r(VI) со шламом в 2 раза, что объясняется замедлением гидролиза 4AF из-за образования поверхностной пленки гелей гидросиликатов кальция [1136—1138]. Замедляют гидролиз соединений Са также добавки борной, винной и фосфорной кислот [1139]. [c.128]

Другой метод предложил Радола (Radola, 1974). В нем применяется очень простой прибор, а для стабилизации среды используются гранулированные гели, например сефадекс G-75, очищенный от заряженных примесей, которые могут помешать образованию градиента pH. Пластинку для ИЭФ приготовляют из тонкого слоя набухшего сефадекса, испаряя воду до тех пор, пока гель не приобретет нужную консистенцию. [c.136]

Отличительная особенность метода состоит в том, что ИЭФ-белков происходит в водном растворе амфолитов, находящемся между гранулами набухшего сефадекса или другого инертного гидрофильного и гранулированного геля. Назначение геля состоит в подавлении возникновения конвекционных токов в жидкости. Вместе с тем, он достаточно мелкопорист для того, чтобы-внутренний объем гранул оставался недоступным для белков. Относительно толстый, но ровный и открытый слой такого гранулированного геля располагается горизонтально. ИЭФ можно-производить с помощью приборов для электрофореза в горизонтальных пластинах, например типа Мультифор . [c.61]

Что касается самого процесса ТСХ, то здесь можно усмотреть далеко идущую аналогию с жидкостной хроматографией на колонках. Неподвижную фазу образует н идкость, связанная со слоем фиксированного на подложке гранулированного сорбента, свойства и характеристики которого близки, а иногда даже идентичны таковым для материалов, используемых в качестве носителей неподвижной фазы в колоночной хроматографии. Здесь используются те же производные целлюлозы или силикагеля, к которым надо добавить только полоски ацетилцеллюлозы. Подвижную фазу образует жидкий элюент с аналогичными, рассмотренным ранее свойствами. Неизменной остается и сущность хроматографического процесса, базирующегося на равновесном распределении вещества между неподвижной и подвижной фазами. Как и в любом хроматографическом процессе (гель-фильтрация в тонком слое была рассмотрена в гл. 4), для целей хроматографического фракционирования это распределение должно быть сильно сдвинуто в пользу неподвижной фазы. Из всех вариантов хроматографпп для разделения компонентов белков и нуклеиновых кислот методом ТСХ (сами биополимеры очень редко выступают здесь в качестве объектов) практически пспользуют только два нормальнофазовую распределительную и ионообменную. [c.458]

Не меньшее значение для интенсификации процесса очистки вискозы имеет метод фильтрации раствора через намывной слой фильтрующего материала. Этот принцип, осуществленный в частности в аппаратах Фунда, получает в настоящее время все более широкое применение.для первой и второй фильтрации вискозы. В качестве фильтрующего материала обычно используется гранулированный поливинилхлорид. Процесс фильтрации в этих аппаратах полностью автоматизирован. Скорость фильтрации 80— 120 л/(м -ч), суммарная поверхность фильтра 45 м , продолжительность работы до регенерации 24—60 ч, регенерации — 2 ч. Гранулированный поливинилхлорид регенерируют следующим образом. Материал отмывают от вискозы водой и разбавленным раствором NaOH, затем отделяют его от адсорбированных нерастворившихся волокон промывкой и отжимают на центрифуге. Гранулы автоматически загружаются в дозатор и затем в аппарат для филь-грации (вместе с вискозой, в Которой замешан гранулят для получения равномерного намывного слоя). Этот механизированный метод фильтрации, регенерации и последующей загрузки фильтрующего материала в аппарат, полностью, исключающий необходимость применения тяжелого физического труда при фильтрации (смена фильтровальных материалов), обеспечивает высокое качество фильтрации и является одним из наиболее перспективных. Недостаток этого метода заключается в недостаточно тщательной очистке вискозы от гель-частиц, что обусловливает целесообразность, а в ряде случаев необходимость проведения третьей (заключительной) фильтрации через нетканые материалы на фильтр-прессах. Кроме того, при регенерации частично измельчаются гранулы, в результате чего увеличивается расход этого фильтрующего материала. [c.297]

Наиболее универсальным способом очистки сточпых вод является адсорбция примесей активированным углем, силика-гелем, коксом, торфом, болотной рудой, золой, опилками. Ад сорбция может осуществляться путем фильтрации воды через слой адсорбента или смешением гранулированного адсорбента с водой и последующим отделением его в отстойниках, гидроциклонах или на фильтрах. Регенерация адсорбента происходит при продувке горячим воздухом или паром. Активированный уголь регенерируется прокаливанием при 600° С. Очистка методом адсорбции при правильном выборе адсорбента может оказаться весьма совершенной. Так, содержание фенола в 1 л очищенной воды удается снизить до 0,001 мг. На рис. 160 показана схема станции адсорбционной очистки. [c.474]

Для нанесения проб в геле делают скальпелем вертикальные надрезы и помещают в них прямоугольные кусочки фильтровальной бумаги, предварительно пропитанные исследуемым раствором. Бумажки должны стоять вертикально и не выступать над поверхностью геля. После завершения электрофореза их аккуратно вынимают пннцетом. Пробу можно вносить также в виде кашицы, приготовленной из гранулированного крахмала. Б этом случае нужно сделать щель большего размера, для чего удобно воспользоваться приспособлением, изготовленным из двух безопасных бритв. После нанесения пробы поверхность геля накрывают какой-либо пленкой, например из пара-фильма, или пластмассовой крышкой из перспекса, покрытой тонки М Слоем минерального масла. [c.71]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология