Сефадексы в хроматографии состав

Совершенно не ясно, каким образом вообще осуществляется взаимодействие между набухающими в воде гелями и ароматическими соединениями. Этот эффект можно подавить, вводя в элюент различные добавки. Создавая в элюенте высокую концентрацию роданида или мочевины, удается почти полностью нормализовать элюирование пикриновой кислоты и триптофана [52]. На сефадексе 0-25 в водно-спиртовой среде полифенолы ведут себя в соответствии с их молекулярным весом, ВТО время как в чистой воде они сильно задерживаются гелем [53]. Возможные активные центры геля не удается насытить путем добавления к элюенту ароматических соединений (например, 0,2 н. салицилата натрия) [42], однако в 1 М пиридине ди-нитрофенильные производные аминокислот появляются в элюате раньше, чем свободные аминокислоты. По-видимому, при хроматографировании в системе фенол — уксусная кислота — вода (1 1 1) гель уже не имеет сродства к ароматическим соединениям [54], Карнеги [55], работая на сефадексе 0-25 в этой системе (которая позволяет избежать побочных эффектов), сумел на ряде пептидов подтвердить обычную зависимость между объемами выхода и молекулярным весом (табл. 26). Он предполагает, что при молекулярном весе выше 400 имеет место собственно гель-хроматография, поскольку здесь уже не должен действовать эффект распределения [63]. Однако до сих пор все же не доказано, одинаков ли состав растворителя в гранулах геля и между гранулами. [c.130]

Метод основан на применении ионообменных полимеров. Они состоят из нерастворимого высокополимерного каркаса и связанных с ним групп, способных к ионизации, — ионогенных групп. Цепочки молекул, входящих в состав каркаса, сшиты друг с другом естественными или искусственными мостиками. Частота сшивки влияет на способность полимера к набуханию и на возможность проникновения различных ионов в глубь частицы полимера. В отличие от сефадексов большинство ионообменных полимеров, применяемых для хроматографии (смолы типа Дауэкс ), имеют столь частую сшивку, что молекулы белков не проникают внутрь частицы и взаимодействуют лишь с ее поверхностью. [c.26]

Для очистки мембранной D-лактатдегидрогеназы Е. соИ хроматографией на оксиапатите [Pratt et al., 1979] был использован пологий линейный градиент концентрации (0—0,2 М) К-фосфатного буфера, pH 7,2 (500 мл для колонки размером 2,6 X 20 см). Растворимость белка обеспечивали включением в состав буфера детергентов (1% Тритона Х-100 и 0,1% ДДС-Na). Очистке на оксиапатите предшествовали освобождение фермента из ме.мбрин с помощью дезоксихолата натрия, хроматография на DE-52 и гель-фильтрация на сефадексе G-200. На всех хроматографических этапах очистки в составе элюентов тоже присутствовали детергенты. [c.234]

Тирозин — аминотрансферазу выделяли методом аффинной хроматографии на пиридоксаминфосфатагарозе (сефарозе 4В) [61]. Фермент элюировали, изменяя состав буферного раствора. Препарат, прошедший на этой стадии 125-кратную очистку, подвергали далее гель-фильтрации на сефадексе G-200. ь-Тирозин-2-оксоглутарат—аминотрансфераза была выделена в виде смеси нескольких изоферментов. [c.19]

Фракционирование фульвокислот на сефадексах G-25 и G-50 и последующий анализ функциональных групп показали, что полидисперсность может быть обусловлена различиями в структуре соединений, входящих в состав полученных фракций [27]. Во всех фракциях присутствовали фенольные гидроксильные группы, однако находившиеся в разном положении друг к другу и к другим заместителям в циклах. Высокомолекулярные фракции фульвокислот содержали кетогруппу, но не содержали фенольные гидроксильные группы в орто- и пара-положении или других функциональных групп кислотного характера. Вильденхайн и Хенсеке [28] установили, что некоторые фракции фульвокислот склонны к быстрому самоокислению, и разработали соответствующие меры предосторожности при разделении этих соединений методами гель-проникающей хроматографии. [c.277]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология