Цистеин в белках

VH. Реакция на серу (цистина и цистеина) в белках [c.16]

Исследование диссоциации фенольных гидроксилов тирозина и сульфгидрильных групп цистеина в белках производится также спектроскопическим путем — методом спектрофотометрического титрования. При этом используется зависимость ультрафиолетового спектра поглощения этих остатков от состояния их ионизации. Степень ионизации при заданном значении pH определяется из соотношения [c.28]

И. к. получают действием KJ или NaJ на хлор- или бромуксусную к-ту при 50° в водном р-ре или в ацетоне. И. к. применяют в биохимич. исследованиях в качество специфич. ингибитора ферментов, содержащих 8Н-группы, а также для количественного онределения остатков цистеина в белках. В аналогичных целях применяют также производные И. к. иодацетамид и этиловый эфир, являющиеся еще более активными реагентами на SH-группы. [c.147]

Примечание. Метод Гутри и Оллертона является, повидимому, многообещающим как специфический метод, позволяющий определять цистин и цистеин в белках без проведения полного гидролиза 2 . [c.209]

Последний участник циклической электронтранспортной цепи — медьсодержащий белок пластоциа-пин — располагается между цитохромом и хлорофиллом а фотохимического центра (пигментом Р700). Характерные особенности этого белка Е = + 0,37 в, М = 21 ООО, изоэлектрическая точка меньше 4. Одна молекула пластоцианина содержит два атома меди, каждый из которых, по-видимому, связан с сульф-гидрильпой группой остатка цистеина в белке. Медь может вымываться из белка подкисленным раствором сульфата аммония, что сопровождается потерей способности пластоцианина участвовать в переносе электронов. Функции белка восстанавливаются с помощью раствора сульфата меди. Свое название этот белок получил в связи с тем, что в окисленном состоянии имеет синий цвет, в то время как восстановленная форма зеленоватого цвета. Окисленная форма имеет три характерные полосы в спектре поглощения в области 597 нм (главная), 460 нм и 780 нм. Один грамм-атом меди пластоцианина приходится на 300— 400 молекул хлорофилла. [c.162]

Вначале казалось, что металлы атакуют тиоловую SH-rpynny цистеина в белке. Однако удалось снять эффект отравления добавлением свободной аминокислоты гистидина. Гистидин не может конкурировать с сульфгидрильпой группой за ионы ртути поэтому Штейн предположил, что в состав активного центра входит также гистидин — аминокислота, охотно дающая комплексы с металлами. По-видимому, эта догадка правильна. Более того, гистидин, участвующий в активном центре, находится в N-конце полипептидной цепи. Это было доказано следующими обстоятельствами реагенты, атакующие N-концевые группы белков (фтор-динитробензол, фенилизотиоцианат), необратимо ингибируют активный перенос глицерина если в качестве экспериментального материала использовать так называемую строму красных кровяных клеток, т. е. оболочки эритроцитов, остающиеся после их осмотического разрыва (гемолиза), то в веществе оболочек можно обнаружить N-концевой гистидин путем реакции с теми же реаге тами. Важное наблюдение заключалось в том, что в случае предварительного насыщения стромы гликолем (1,3-пропандиолом), когда ферментативные центры были заблокированы, нри реакции с фенилизотиоцианатом концевой гистидин в реакцию не вступал. После отмывания гликоля можно было снова заставить прореагировать гистидин с фенилизотиоцианатом. Эти опыты показывают весьма убедительно, что фермент, действующий в случае активного транспорта глицерина, содержит в своем центре гистидин и притом концевой. Вместе с тем этот опыт подчеркивает трудность, о которой мы уже говорили. В процессах активного переноса все реакции разыгрываются внутри мембраны. И ферменты интегрированы в структуре мембраны. Поэтому так сложно их изучать. Фактически мы еще не знаем с определенностью ни одной из реакций, ведущих к химической диффузии важнейших метаболитов. [c.181]

Содержание цистина и цистеина в белке изучали весьма интенсивно, но результаты исследований пока не позволяют сделать определенного вывода. Содержание щелочелабильной серы по данным, приведенным в работе Осборна [10], равно 0,49% (6,9 атома на моль белка из общего числа 22,6 атома серы), а по данным Цанда и Кларка [25] 0,44% (6,2 атома). Акабори [c.10]

Измерение поглощения цистеинов в белках затруднено тем, что наиболее длинноволновый интенсивный переход = 230 нм) приходится на область поглощения пептидной группы. Полосы поглощения дисульфидных мостиков (цистинов) лежат в более длинноволновой области, с Xjjjgjj около 250 и 270 нм, но их интенсивность слишком мала [c.35]

Прежде чем приступить к использованию этих общих приемов, важно провести модификацию остатков цистина и цистеина в белке, поскольку эти остатки очень реакционноспособны по отношению к некоторым применяемым в структурном анализе реагентам они подвержены взаимному дисульфидному обмену и плохо поддаются количественному анализу. Такая модификация легко осуществляется нес1солькими методами, включая восстановление меркап-тоэтанолом и затем реакцию с иодацетатом с образованием S-кар- [c.178]

Вопрос о роли минеральных элементов в обмене аминокислот разработан еще недостаточно, однако следует отметить большое значение ионов Со в биосинтезе метионина. Mg и Мп—в реакциях обмена аминокислот, связанных с переносом одноуглеродных фрагментов (синтез серина из глицина, цитруллина—из орнитина и карбамилфосфата и др.), Fe—в превращении фенилаланина в тирозин, Zn—во включении глицина в глутатион печени, Se—в окислении HS-rpynn радикалов цистеина в белках. [c.438]

Пример 13-Б. Обнаружение енутрицепочечных дисульфидных мостиков в белках. Остатки цистеина в белках часто связываются дисульфидиыми мостиками. Эти дисульфидные мостики предохраняют белок от перехода к полностью неупорядоченной конфигурации клубка при денатурации, особенно в тех случаях, когда остатки цистеина разделены большим числом других аминокислот. [c.374]

Этиленимин реагирует с боковыми цепями цистеина в белке с образованием S-аминоэтильных производных. Пептидные связи, образованные карбоксильными группами этих модифицированных цистеиновых остатков, гидролизуются трипсином. Почему [c.47]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология