Пятна на хроматограмме однородность

По технике получения хроматограммы делят на нисходящие и восходящие. При получении нисходящей хроматограммы растворитель перемещается по бумаге сверху вниз, восходящей — снизу вверх. При нисходящей хроматограмме достигается больший коэффициент скорости перемещения вещества / /, но пятна получаются более размытые, чем при восходящей хроматограмме, где пятна меньше и более компактны. Поэтому первую хроматограмму обычно применяют для качественной оценки состава смеси, а вторую —для количественного определения ее компонентов. Кроме того, применяют круглую (радиальную) хроматограмму, при которой бумага находится в горизонтальном положении, а растворитель перемещается от центра к периферии. Для такой хроматограммы вырезают круг из фильтровальной бумаги диаметром 250—300 мм. В центре круга простым карандашом вычерчивают дополнительный круг диаметром 20 мм и на маленький круг наносят 8—10 капель (по 2—3 мкг) испытуемой смеси. Бумагу высушивают на воздухе, а затем зажимают между крышками эксикатора или крышками чашки Петри, которые служат хроматографическими камерами. Растворитель непрерывно подают в центр круга, обычно опуская в растворитель нарезанные полоски бумаги, соединенные с центром этого круга. Для хроматографии используют специально приготовленную фильтровальную бумагу, которая должна удовлетворять следующим требованиям не адсорбировать хроматографируемых веществ быть однородной по плотности и содержать минимум зольных, а также других примесей, растворимых в данных растворителях. [c.22]

Выяснено, что при испытании препарата на однородность электрофорез является достаточно эффективным методом для обнаружения небольших ( 1%) количеств окрашенных примесей, так как вещества обладают достаточно высокой и различной подвижностью в электрическом поле. Пятна на электрофореграммах получаются более четкие и менее расплывчатые, чем на хроматограммах. Продолжительность процесса электрофореза небольшая (3—4 часа) по сравнению [c.75]

При изучении однородности антибиотиков методом хроматографии на бумаге следует постоянно иметь в виду возможность ошибок при неправильном истолковании результатов. Особенно осторожно необходимо оценивать выводы об однородности вещества, сделанные на основании- наличия на хроматограммах только одного пятна даже при хроматографировании в нескольких системах. Дело в том, что данные хроматографии на бумаге нельзя подвергнуть математической обработке, в отличие, например, от метода противоточного распределения. [c.24]

Наиболее распространенным методом обнаружения антибиотиков на хроматограммах является биоавтографический метод. При этом высушенные в вытяжном шкафу полоски бумаги накладывают на агаровую пластинку, предварительно засеянную культурой тест-организма, чувствительной к изучаемому антибиотику. Кюветы с полосками бумаги помещают в термостат на 18-20 ч при температуре, оптимальной для роста тест-организма. По зонам отсутствия роста тест-микроба, образующимся вокруг тех мест на хроматограмме, где находится пятно антибиотика, во-первых, судят об однородности антибиотика, во-вторых, сравнивают полученные хроматограммы с хроматограммами известных антибиотических веществ (рис. 12). [c.138]

Для обнаружения аминокислот и пептидов применяют иингидрин. Сухую хроматограмму (рис. 8.40) пофужают в раствор нингидрина в ацетоне, обычно 0,2%-ный (при этом достагается однородное покрытие бумаги реагентом), сушат непродолжительное время. При комнатной температуре пятна аминокислот проявляются примерно через 1 ч, а их окраска достигает максимальной интенсивности примерно за 8 ч. Пятна пептидов обнаруживаются медленнее. Проявление ускоряется, если ф0мат0фамму нафевают при 50—60 С в сушильном шкафу. [c.336]

Двумерная хромато1 рафия с применением в обоих направлениях одной и той же системы pa TBopirre.ieu. Способ РРР (разделение, реакция, разделение) служит для определения однородности веществ [10]. В некоторых случаях на хроматограмме появляются два пятна и неясно, является ли второе пятно другой формой того же вещества или оно соответствует продукту превращения этого веш,ества во время разделения на пластинке с сорбентом (напрпмер, окисления, изомеризации и т. д.). Если [c.42]

Чаще всего для обнаружения аминокислот и пептидов применяется нингидрин (гидрат трикетогидриндена), так как он образует окрашенные продукты. Самый простой метод обнаружения заключается в следующем. Сухую хроматограмму погружают в раствор нингидрина в ацетоне, чаще всего 0,2%-ный (при этом достигается однородное покрытие бумаги реагентом), сушат в течение непродолжительного времени и помещают в большой ящик, стенки которого опрыскивают спиртовым раствором лимонной кислоты, чтобы исключить попадание на них аммиака. При комнатной температуре пятна аминокислот обнаруживаются примерно через час, и их окраска достигает оптимальной интенсивности примерно за 8 ч. Пятна пептидов обнаруживаются медленнее, поэтому лучше всего выдержать хроматограмму в этом ящике до следующего дня. Появление цветных пятен ускоряется, если хроматограмму нагревают при 50—60 °С. [c.125]

Кетоны (XX), (XXI) и (ХХП) и получающиеся при их гидрировании над палладием на угле предельные кетоны, по данным газо-жидкостной хроматографии, однородны. Кетоны (XIX) дают яри хроматографировании в тонком слое окиси алюминия одно пятно, но на газо-жидкостной хроматограмме — два пика. По-видимому, эти два пика соответствуют двум изомерным кетонам, различающимся лишь положением двойной связи в цикле, так как получаемые при гидрировании кетонов предельные кетоны —2-метил-5-алкилциклопентаноны (XXIII) — хроматографически однородны. [c.263]

Наложение непрозрачной черной маски , закрывающей всю хроматограмму,. ча исключением отверстия, через которое можно рассматривать пятно определяемого вещества, позволяет измерить поглощение всего пятна (Боуден и сотрудники, Полсон и сотрудники). Подобный же метод в нрименении к отраженному свету нри однородном рассеянном освещении позволяет по Гаспаричу (частное сообщение) достичь очень высокой точности. [c.184]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология