Хроматограмма восходящая и нисходящая

Аппаратура для БХ включает хроматографические камеры или сосуды, стойки с лотками, пипетки для нанесения проб, приспособления для сушки, пульверизаторы, сосуды для элюента, лампы для облучения хроматограмм и др. Хроматографические камеры значительно различаются по форме и размерам, и это в большой степени зависит от характера процесса хроматографирования (восходящее, нисходящее, круговое, двумерное, препаративное), На рис. 9.15 изображена камера для восходящей хроматографии, на рис. 9.16 — аппаратура для нисходящей бумажной хроматографии. [c.239]

Существуют следующие виды и способы получения распределительных хроматограмм одномерные и двумерные (восходящие, нисходящие) [21], круговые [22], электрофоретические [23]. [c.81]

Хроматограмму получают нисходящим или восходящим способом. Через 12—18 ч хроматограмму вынимают, подсушивают на воздухе и сразу же проявляют реактивами, приведенными в табл. 5. Проявление основано на сильной восстановительной способности аскорбиновой кислоты. Качественно определяют кислоту либо по окраске пятна, либо по величине Rf. [c.120]

Движение растворителя может происходить горизонтально, снизу вверх (восходящая), сверху вниз (нисходящая) или от центра к периферии (круговая или радиальная хроматография) [46]. Восходящая, нисходящая и круговая хроматография по технике выполнения может быть одномерной и двумерной. В последнем случае хроматографирование проводят дважды во взаимно перпендикулярных направлениях после проявления хроматограммы одним элюентом ее поворачивают на 90 и вторично проявляют другим элюентом. [c.100]

Элюирование проводят восходящими, нисходящими и горизонтальными методами. Методики нанесения пятен и детектирования элементов аналогичны уже описанным для хроматографии на бумаге. Здесь также справедливы замечания об окрашенных реагентах для детектирования элементов. Тонкослойные хроматограммы следует сушить в сушильном шкафу, а не в струе воздуха, что достаточно при работе с бумагой. [c.464]

Влияние диффузии в боковых направлениях. Эти явления начинаются сразу же, как только подвижная фаза пройдет линию старта, потому что некоторое коли-че< тво молекул вещества растворяется в непрерывном слое протекающего растворителя. Степень диффузии в боковые направления зависит от ее относительной, скорости и от способа развития хроматограмм восходящего или нисходящего. [c.260]

В зависимости от направления движения растворителя различают восходящие, нисходящие и круговые хроматограммы. В последнем случае пробу наносят в центр бумажного круга и растворитель движется от центра к периферии. [c.431]

В зависимости от способа перемещения подвижного растворителя распределительная хроматография на бумаге может быть восходящей, нисходящей и круговой. Благодаря простоте наибольшее распространение получила в качественном анализе круговая распределительная хроматография. Для получения такого вида хроматограмм используется обычная фильтровальная бумага, ватман или специальная хроматографическая бумага, выпускаемая в нашей стране под номерами 1, 2, 3 и 4. Фильтровальная бумага нарезается в виде круга, диаметр которого должен быть на 2—3 см больше диаметра камеры. В качестве камеры может быть использован эксикатор или чашка Петри. На расстоянии 2—1 см от центра бумаги по кругу наносят хроматографируемый раствор. Бумагу подсушивают и помещают в камеру. К центру круга с помощью фитиля из такой же бумаги подводят растворитель. После перемещения растворителя до края бумаги ее вынимают из камеры, высушивают и проявляют. Разделяемые вещества расположены на хроматограмме в виде концентрических зон. [c.209]

На практике применяют различные виды элюирования восходящее, нисходящее, горизонтальное, круговое (центрифужное). При нисходящем хроматографировании следует тщательно уложить край бумаги в лоток и прижать ее тяжелой стеклянной палочкой или узкой пластинкой, чтобы бумага не могла соскользнуть в процессе элюирования. Во время работы не следует касаться бумаги пальцами, особенно если хроматографируются аминокислоты. Закрепленную в лотке полоску или лист бумаги помещают на подставку внутри камеры, закрывают камеру крышкой и выдерживают в атмосфере паров неподвижной фазы в течение определенного времени — от 5 мин до 16 ч, т. е. до следующего дня. При работе с сильно летучими растворителями типа растворителей Буша (см. разд. 3.5.6 Стероиды и терпеноиды ) бумагу следует выдерживать над неподвижной фазой не менее 3 ч, а лучше до следующего дня, если неподвижная фаза не наносилась на бумагу посредством одного из указанных выше методов. По окончании выдержки наливают в лоток подвижную фазу и дают ей передвигаться в бумаге под действием капиллярных сил почти до самого края. После этого осторожно вынимают хроматограмму из камеры, сразу же отмечают положение фронта растворителя и дают листку высохнуть. При работе с большими листами удобно пользоваться специальными широкими щипцами. [c.92]

Восходящая, нисходящая и круговая хроматография по технике выполнения может быть одномерной и двумерной. Для получения двумерных хроматограмм хроматографирование производят дважды во взаимно перпендикулярных направлениях после проявления хроматограммы одним элюентом хроматограмму поворачивают на 90° и вторично проявляют другим элюентом. [c.318]

Для получения бумажных хроматограмм предложено много различных методов и приемов. Наиболее часто получают одномерные и двумерные хроматограммы (восходящие и нисходящие), круговые и электрофоретические. [c.108]

Если хроматографируют смесь окрашенных веществ, то на хроматограмме образуются окрашенные зоны если же эти вещества бесцветны, хроматограмму проявляют , т. е. высушивают и опрыскивают раствором специфичного индикатора, дающего цветную реакцию с компонентами смеси. В зависимости от направления движения растворителя различают восходящие, нисходящие и круговые хроматограммы. В последнем случае пробу наносят в центр бумажного круга и растворитель движется от центра к периферии. [c.277]

Техника проявления. По технике проявления различают следующие методы хроматографии восходящий, нисходящий и горизонтальный. Наиболее часто применяют метод восходящих хроматограмм, для чего бумагу при по- [c.356]

Молекулы веществ проходят в направлении потока элюента различный путь. На хроматограмме образуется зона с максимальной концентрацией вещества в ее середине. Из-за поперечной диффузии зоны превращаются в пятна. Расширение пятен зависит от количества вещества и длительности хроматографического процесса. Положение пятен характеризуют величинами / /, так же, как и в бумажной хроматографии. В зависимости от направления поступления элюента на пластинку различают методы восходящей, нисходящей и горизонтальной хроматографии. Разделение веществ может осуществляться еще многократной двумерной, круговой или градиентной хроматографией. Самым распространенным является метод восходящей хроматографии в закрепленном слое сорбента. [c.308]

Фосфаты, растворимые в воде и лимонной кислоте, разделяли на,бумаге закреплением фосфатов, растворимых в лимонной кислоте, с помощью углекислого натрия и перемещением по бумаге элюентом компонентов, растворимых в воде [311]. Были испробованы восходящий, нисходящий, круговой и двумерный методы на бумаге Ватман № 1. Оптимальным оказался круговой метод и проявление хроматограммы ферроцианидом калия. [c.339]

Охарактеризуйте восходящие, нисходящие и круговые хроматограммы, полученные при хроматографировании веществ на бумаге. [c.134]

ТСХ может исполняться как восходящая, нисходящая и горизонтальная хроматография. В первых двух случаях компоненты смеси после хроматографирования располагаются в виде отдельных пятен в последнем случае — в виде концентрических колец. Если разделяемые компоненты не имеют окраски, то зоны на хроматограмме проявляют химическим или физическим способом. 1 При химическом способе пластинку обрабатывают раствором реактива, который с компонентом смеси образует окращен-ное соединение. Химическое проявление хроматограмм проводят обычно парами иода, серной кислотой, 2,4-динитрофенилгидра-зином. Физический способ проявления основан на том, что некоторые вещества способны флуоресцировать под действием ультрафиолетового облучения. [c.140]

Методики получения распределительных хроматограмм на бумаге. Методика проведения анализа на бумаге аналогична методике, применяемой в тонкослойной хроматографии и описанной в гл. IV. Анализ может выполняться восходящим или нисходящим способом на полосках специальной бумаги. Кроме того, исходная смесь может наноситься в центр круга и далее распределяться концентрическими кольцами от центра к периферии. В этом случае получают круговую хроматограмму. Прибор для получения круговой хроматограммы изображен на рис. 11.2, а приспособление крз жка бумаги для получения круговой хроматограммы — на рис. 11.3. Для подачи подвижной фазы в центр круга в бумаге вырезается фитиль, как показано на рис. 11.3. Конец фитиля опускается в сосуд с подвижной фазой. При нисходящей хроматографии пользуются прибором, изображенным на рис. 11.4. Стартовая линии а этом случае находится в верхней части полоски бумаги. [c.219]

Как и Б случае бумажной хроматографии, положение пятна на тонкослойной хроматограмме характеризуется фактором замедления Я/. Слой сорбента может быть закреплен на пластинке при помощи вяжущих веществ. Такую пластинку с закрепленным слоем можно использовать не только для восходящей, но и для нисходящей хроматографии. [c.51]

Бумажная хроматография. Метод прост по аппаратуре и чрезвычайно эффективен для аналитических целей, что приводит к его использованию практически во всех химических лабораториях. Для получения бумажной хроматограммы небольшое количество раствора (1—3 мм ) исследуемой смеси наносят в виде пятна на расстоянии см от конца полоски хроматографической бумаги, которую затем этим концом опускают в специальный подвижный растворитель. В зависимости от применяемого метода подвижный растворитель может поступать сверху или снизу (нисходящая и восходящая бумажная хроматография). Время развития хроматограммы составляет, как правило, 8—20 мин. Бумага может быть расположена горизонтально, как, например, при использовании круглых фильтров. При этом раствор и подвижный растворитель помещаются в центр фильтра, а хроматографические зоны располагаются в виде концентрических кругов. Бумага должна нахо- [c.245]

По. методу получения различают следующие распределительные хроматограммы на бумаге одномерные н двумерные (восходящие и нисходящие), круговые, электрофоретические. [c.284]

Для одномерных хроматограмм используют бумажные полосы шириной 4,5—5 см и длиной 30—50 см. Для получения двумерной хроматограммы применяют листы бумаги размером примерно 20 X 25— 40 X 45 см. Восходящие хроматограммы получают при перемещении подвижного растворителя через норы бумаги снизу вверх, а нисходящие— сверху вниз. [c.284]

Рис 17. Камеры для получения восходящей (Л) и нисходящей (Б) хроматограмм, /—камера 2—бумага, 5 —крышка камеры — подставка для ванночки (лодочки) 5 —лодочка 5 — чашка с водой или растворителем [c.128]

Для редко используемых систем растворителей или при выборе новых оптимальных условий разделения удобно использовать обычные цилиндры с притертой крышкой. В таком цилиндре можно осуществить как восходящую (рис. 423), так и нисходящую хроматографию (рис. 424). Если определенный растворитель используют для получения большой серии хроматограмм, то удобно пользоваться хроматографическими камерами (рис. 425). то застекленные шкафы с каркасом из нержавеющей стали и с крышкой, снабженной каучуковым уплотнением. Обычно они снабжаются тремя лодочками, т. е. рассчитаны на шесть квадратных хроматограмм. [c.457]

Осуществление двумерного хроматографирования по нисходящему способу уже было описано в разделе 5.2. Проявление двумерных восходящих хроматограмм можно проводить по схеме, изображенной на рис. 427. Хроматографическую бумагу скрепляют алюминиевой проволокой или нитью так, чтобы получился цилиндр. Раствор смеси разделяемых веществ наносят на бумагу вблизи одного из углов на некотором расстоянии от краев (2—3 см). Затем бумажный цилиндр ставят в чашку с первым растворителем. Когда фронт растворителя достигнет верхнего края, бумагу высушивают, скрепки снимают и бумагу снова сворачивают в цилиндр в направ- [c.468]

В системе бутиловый спирт, насыщенный 0,1 и. соляной кислотой, при нисходящей хроматограмме Rf 0,52. В системе изоамиловый спирт — 5%-ный раствор динатрийфосфата при восходящей хроматограмме Rf 0,70. Те же значения Rf получены при хроматографировании заведомо чистого препарата. [c.410]

Электрофорез с последующим хроматографированием осуществляется следующим образом. Хроматографическую бумагу пропитывают раствором какого-либо летучего электролита, например, уксусной кислотой, наносят каплю анализируемой смеси и проводят электрофорез, подключая бумагу через электроды к источнику постоянного тока. После окончания электрофореза бумагу вынимают из прибора, сушат и переносят в камеру для хроматографирования по методу восходящей или нисходящей хроматографии. Обработка хроматограммы после окончания хроматографирования ничем не отличается от обычной. Метод раздельного электрофореза и хроматографирования позволяет производить эти две операции при различных значениях pH, что существенно увеличивает возможности разделения. [c.258]

А-восходящая хроматография Б-нисходящая хроматография (вид сбоку) В-хроматограмма с разделенными и окращенными веществами 1-фронт растворителя, 2-разделенные вещества, 3-место нанесения образца. [c.28]

Для одновременного получения нескольких хроматограмм в одинаковых условиях более пригодна прямоугольная камера, которую можно использовать как для восходящей, так и для нисходящей хроматографии. В качестве такой камеры можно использовать, например, деревянный ящик со стеклянными стенками размером 70 X 70 X 70 см, по верхнему краю которого прикреплена полоска пористой резины. Сверху эту камеру накрывают толстым (тяжелым) стеклом, обеспечивающим герметичность системы. При восходящей хроматографии нижний край фильтровальной бумаги зажимают между двумя стеклянными палочками, погруженными в одну из стеклянных кювет, которые размещают на дне камеры. Для нисходящей хроматографии необходимы пластмассовые или стеклянные кюветы. Верхний край фильтровальной бумаги погружают в такую кювету, расположенную в верхней части камеры, и закрепляют там с помощью тяжелой стеклянной палочки. [c.188]

По технике получения хроматограммы делят на нисходящие и восходящие. При получении нисходящей хроматограммы растворитель перемещается по бумаге сверху вниз, восходящей — снизу вверх. При нисходящей хроматограмме достигается больший коэффициент скорости перемещения вещества / /, но пятна получаются более размытые, чем при восходящей хроматограмме, где пятна меньше и более компактны. Поэтому первую хроматограмму обычно применяют для качественной оценки состава смеси, а вторую —для количественного определения ее компонентов. Кроме того, применяют круглую (радиальную) хроматограмму, при которой бумага находится в горизонтальном положении, а растворитель перемещается от центра к периферии. Для такой хроматограммы вырезают круг из фильтровальной бумаги диаметром 250—300 мм. В центре круга простым карандашом вычерчивают дополнительный круг диаметром 20 мм и на маленький круг наносят 8—10 капель (по 2—3 мкг) испытуемой смеси. Бумагу высушивают на воздухе, а затем зажимают между крышками эксикатора или крышками чашки Петри, которые служат хроматографическими камерами. Растворитель непрерывно подают в центр круга, обычно опуская в растворитель нарезанные полоски бумаги, соединенные с центром этого круга. Для хроматографии используют специально приготовленную фильтровальную бумагу, которая должна удовлетворять следующим требованиям не адсорбировать хроматографируемых веществ быть однородной по плотности и содержать минимум зольных, а также других примесей, растворимых в данных растворителях. [c.22]

Принцип выполнения одномерной нисходящей хроматограммы легко понять из рис. 43. На конец полоски хроматографической бумаги, как и в предыдущем случае, микропипеткой наносят каплю испытуемого раствора. Полоска бумаги опускается верхним концом (тем самым, где нанесена капля) в лоток с растворителем и свободно свисает вниз. Растворитель впитывается бумагой и опускается по полоске вниз, смывая нанесенную пробу вещества. Разделение компонентов и дальнейшая обработка хроматограммы проводятся так же, как и при получении хроматограммы восходящим методом. [c.160]

Толщина слоя сорбента 0,05—2 ммЗ 10%. В камерах t= (35-н 225) — 2 °С. Объем проб 0,1—100 мкл. Скорость подачи проб автоматическим дозатором 4, 8, 12, 32, 36, 72 мкл/ч, элюента при градиентной хроматографии 0,23 0,56 2,3 и 5,2 мл/мин. ПЧ при определении активности, не более по =>н 10 Ки, по i 10 Ки. Величина строки при сканировании 5 мм, скорость развертки 0,1 0,4 1,0 3,0 см/мин. Возможно нанесение ядовитых и радиоактивных проб в инертной атмосфере, проведение обычной и микрохроматографии, а также препаративной хроматографии восходящим, нисходящим, горизонтальным, проточным и градиентным методами. Проявление в УФ-свете при 254 и 365 нм. Фоторегистрация хроматограмм репродукционным методом, а также методами адсорбционной и люминесцентной контактной печати [c.261]

Проявление тонкослойных или бумажных хроматограмм может осуществляться путем восходящего, нисходящего, горизонтального или радиального движения растворителя. При восходящей хроматографии ослол непия, связанные с образованием каналов при движении растворителя, сводятся к минимуму. При непрерывном проявлении растворитель продвигается до конца бумаги или тонкого слоя в одном опыте. При многократном проявлении после того, как фронт растворителя достигает края листа, растворителю дают испариться и повторяют проявление при том же направлении движения растворителя. Ступенчатое проявление включает проявление на пластинке в неполярном растворителе, испарение растворителя и второе проявление в более полярном растворителе. При двухмерном проявлении также последовательно применяют два растворителя сначала проводят хроматографирование в одном направлении, затем высушивают пластинку для испарения первого растворителя, поворачивают пластинку на 90° и проводят проявление вторым растворителем. При градиентном элюировании состав растворителя меняется в ходе проявления [94]. Эта методика, однако, сложна, в ней теряется простота тонкослойной или бумажной хроматографии. [c.553]

Хроматографические камеры значительно различаются по форме и размерам, и это в большой степени зависит от характера процесса хроматографирования (восходящее, нисходящее, круговое, двумерное, препаративное). Для восходящего, а также двумерного хроматографирования на короткие расстояния обычно пригоден любой цилиндрический сосуд большого диаметра, например большой и высокий химический стакан, большая широкогорлая склянка, стеклянная банка из-под маринада и т. п. (см. рис. 3.1). Короткие и не слишком ши )акие хроматограммы можно получать методом восходящей БХ даже в конической колбе, а микрохроматограммы — в пробирках (рис. 3.2). Можно свернуть хроматограмму в цилиндр и закрепить по краям так, что она будет стоять, опираясь на дно камеры, и будет погружена в хроматографический растворитель, или как-то подвесить ее, чтобы нижняя часть была погружена в растворитель, находящийся на дне сосуда. Если для этого используют коническую колбу, узкий цилиндр или пробирку, то можно подвесить полоску бумаги в пробирке (укрепив в ней проволочный крючок или разрезав резиновую пробку на две половинки и зажав бумагу между ними и т. п.). Если хроматографической камерой служит сосуд с широким отверстием, можно укрепить над отверстием тонкую проволоку или крепкую нитку и на ней подвесить хроматограмму. Можно закрепить два кусочка резиновой трубки на концах стеклянной палочки длиной [c.62]

Для бумажной хроматографии применяют специальные установки. Простейшая установка представляет собой стеклянный цилиндр, в который помещают кювету с растворителем, опустив в нее один конец полосы фильтровальной бумаги. Чаще всего кювету, содержащую растворитель, располагают так, чтобы вер.хний край бумажной хроматограммы находился в этой кювете, т. е. используют нисходящий поток растворителя. Однако применяют и восходящий поток растворителя. [c.293]

Принцип распределительной хроматографии основан на различии в коэффициентах распределения аминокислот между водой и органическим растворителем. Особенность метода распределительной хроматографии на бумаге по сравнению с обычной экстракцией ам.инокислот из водного раствора органическим растворителем заключается в том, что одну из фаз, чаще всего водную, помещают на какой-нибудь инертный твердый носитель, а органический растворитель — подвижная фаза,— проходя через первую, извлекает и распределяет аминокислоты на бумаге в соответствии с их коэффициентами распределения. Положение аминокислот на бумаге определяют по отношению скорости движения аминокислоты скорости движения фронта растворителя и обозначают Rf. Величина за висит в первую очередь от строения аминокислоты, затем от системы растворителей, pH среды и сорта бумаги, Чем полярнее аминокислота, тем меньше она растворяется в органических растворителях и тем меньше ее R . Увеличение длины углеродной цепи повышает . Введение в молекулу полярных групп, например, гидроксильной, аминной или карбоксильной понижает Rf Так, Rf фенилаланина в системе фенол/вода = 0,85, а тирозиит 0,51. Другие примеры изменения в зависимости от строения аминокислоты представлены на рис. 3 и 4. Подбирая соответствующие смеси растворителей, можно провести достаточно тонкое разделение аминокислот. Наиболее часто пользуются для такого разделения системами вода — фенол — аммиа вода — бутапол — уксусная кислота бутанол — аммиак — коллидин и т. д. Разделение можно проводить на одномерной или двумерной хроматограммах. Можно пользоваться также различными типами распределительной хроматографии на бумаге — нисходящей, восходящей и радиальной. Величины Rt для каждой из систем растворителей оказываются постоянными при соблюдении [c.479]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология