Ионизация фермента

Влияние pH на ферментативную реакцию может быть связано с денатурацией фермента и с изменением величин V и К или с более чем одним из названных эффектов. Все эти изменения обусловлены изменением состояния ионизации фермента, субстрата или фермент- [c.106]

Приведенная выше схема является упрощенной, поскольку в ней опушены стадии ионизации фермента и его различных комплексов. В целом подразумеваются три значения рК (на одно значение рК больше, чем обнаружено при изучении стационарной кинетики) для свободного фермента — это группы с рК — 5 6 и 6,7. [c.73]

С практической точки зрения константы Кх ъ имеют то преимущество, что их можно измерить, в то время как константы Кц, К12, К и А 22, которые очень полезны для построения детальной схемы процесса ионизации фермента, определить из [c.146]

Слегка модифицировав теорию ионизации двухосновной кислоты, можно использовать ее для анализа колоколообразных кривых, которым часто следуют рН-зависимости кинетических параметров ферментативной реакции V и V/Km- (Анализ рН-за-висимости параметра Kii, как будет видно ниже, довольно сложен.) Основной механизм ферментативной реакции с учетом ионизации фермента выглядит следующим образом [c.148]

Зависимость V от к описывает ионизацию фермент-субстратного комплекса, а У//См от к — ионизацию свободного фермента. Зависимость же от pH параметра Км, как и ранее, более сложна, поскольку Км определяется ионизацией как свободной формы, так и фермент-субстратного комплекса. рН-зависимости параметров [c.150]

Пример 2.7 [1]. Проводилось изучение нековалентного связывания аниона гидразония коричной кислоты с а-химотрипсином. Показано, что данное связывание зависит от степени ионизации фермента. Вычислить энтальпию ионизации на основании данных табл. 2.11. [c.187]

Рис. 2.55. Определение констант ионизации фермент-субстратного комплекса.

Активность многих ферментов изменяется с изменением pH точно таким же образом, как и степень ионизации простых кислот и оснований. Это неудивительно, поскольку, как говорится в гл. 1, активные центры ферментов обычно содержат кислотные или основные группы, принимающие участие в катализе. Можно ожидать, что если каталитической активностью обладает только одна протонированная форма кислоты или основания, то катализ будет зависеть от концентрации активной формы. В этой главе мы рассмотрим, как влияет ионизация фермента и фермент-субстратного комплекса на параметры са1, /См и [c.165]

Здесь /Се — константа ионизации свободного фермента, /Се5 — константа ионизации фермент-субстратного комплекса, а /Сз и /Сз — константы диссоциации НЕЗ и Е5 соответственно. [c.169]

Сравнение знаменателей уравнений (5.18) и (5.8) показывает, что зависимость V max ИЛИ at ОТ pH определяется константой ионизации фермент-субстратного комплекса Kes- [c.170]

См также зависит от состояния ионизации фермент-субстратного комплекса. [c.170]

Зависимость скорости реакции от pH. Изменение pH приводит к изменению степени ионизации ионогенных групп в активном центре, а это влияет на сродство субстрата к активному центру и на каталитический механизм. Кроме того, изменение ионизации белка (не только в области активного центра) вызывает конформационные изменения молекулы фермента. Колоколообразная форма кривой (рис. 2.17, д) означает, что существует некоторое оптимальное состояние ионизации фермента, обеспечивающее наилучшее соединение с субстратом и катализ реакции. Оптимум pH для большинства ферментов лежит в пределах от 6 до 8. Однако есть и исключения например, пепсин наиболее активен при pH 2. Количественное определение ферментов проводят при оптимальном для данного фермента pH. [c.85]

Рис. 111. рН-Зависимость гидролиза М-ацетил-Ь-фенилаланил-Ь-триптофа-на, катализируемого пепсином. Кривая теоретическая и рассчитана на основании значений рКа = 1,4 для ионизации фермента и рКс. = 3,2 для ионизации субстрата [c.245]

В общем случае для ферментативной реакции существует оптимальное значение pH при увеличении или уменьшении pH по сравнению с его оптимальным значением максимальная скорость Уд падает. В нейтральной области pH влияние его изменений на реагирующую систему носит обычно обратимый характер, но при предельных значениях pH (соответствующих сильнокислой или сильнощелочной среде) белки подвергаются необратимой денатурации. Влияние обратимых изменений pH на кинетику можно объяснить изменениями степени ионизации субстрата если же в исследуемом интервале pH степень ионизации субстрата не меняется, то изменения в кинетике объясняются ионизацией фермент-субстратного комплекса. Если фермент-суб-стратный комплекс существует в трех состояниях с разным числом протонов и если только промежуточная форма разлагается с образо ванием продуктов, то уравнение, описывающее влияние pH на максимальную скорость реакции, можно вывести из схемы [c.322]

Влияние pH на активность ферментов связано с изменением состояния ионизации фермента, субстрата или кохмплекса фермента и субстрата. Так как ферменты представляют собой белки, в их молекулах содержится очень большое число различных ионизирующих групп. Но вследствие того, что ферменты наиболее активны в сравнительно узком интервале pH, то, очевидно, каталитически активна только одна из ионных форм фермента. Особенно сильное действие на каталитическую активность фермента оказывает состояние ионизации отдельных групп или" атомов в активном центре молекулы фермента. При изменении состояния ионизации меняется и каталитическая активность фермента. [c.47]

VI.15а). Два таких случая показаны в виде соответствующих кривых на фиг. 65, А. В этих двух крайних случаях точки перегиба, если они рассчитаны правильно, могут действительно соответствовать в первом случае константе ионизации фермента, а во втором — константе 1тонизации фермент-субстратного комплекса. Однако обычно определяемая величина начальной скорости лежит между этими двумя предельными. значениями и ее зависимость от pH также имеет промежуточный характер, который нельзя объяснить исходя из констант ионизации. [c.187]

Колоколобразная форма кривой означает, что существует некоторое оптимальное состояние ионизации фермента и субстрата, обеспечивающее наилучшее соединение фермента с субстратом и катализ реакции. [c.43]