Кинетические параметры ферментативных реакций

Рис. 104. Определение кинетических параметров ферментативной реакции при быстрой инактивации фермент-субстратного комплекса (на примере гидролиза нитрокатехолсульфата, катализируемого арилсульфатазой А) [26 1

Кинетические параметры ферментативных реакций [c.97]

В таблице 13 приведена зависимость начальной скорости гидролиза и-нитроанилида Ы-ацетил-Ь-тирозина, катализируемого а-химотрипсином, от концентрации фермента [16]. Определить значения кинетических параметров ферментативной реакции, если концентрация субстрата во всех случаях равна 1 10 М. [c.123]

Анализ (6.46) приводит к выражениям для кинетических параметров ферментативной реакции [c.229]

Влияние взаимозависимых неконкурентных ингибиторов на кинетические параметры ферментативной реакции. Кинетические параметры, характеризующие скорость реакции [c.229]

Все эти рассуждения в равной мере можно отнести и к анализу температурных зависимостей кинетических параметров ферментативных реакций (например, которые зачастую представляют собой комбинации констант скоростей индивидуальных процессов [см. уравнение (6.10)], в свою очередь обычно зависящих от pH среды см., например, (6.181)]. Поэтому изучение температурных зависимостей может представить интерес лишь в том случае, когда известен механизм протекания реакции и установлена его лимитирующая стадия. [c.264]

Определение кинетических параметров ферментативных реакций из экспериментальных данных [c.79]

Кинетическая обработка схемы (5.34) приводит к выражениям для кинетических параметров ферментативной реакции [c.85]

С ферментативным происходит также спонтанный (щелочной и водный) гидролиз субстрата (табл. 8). Определить кинетические параметры ферментативной реакции. [c.89]

Существуют различные методы определения числовых значений кинетических параметров ферментативных реакций (в основном А м, / тах) по результатам измерения скорости реакции при различных концентрациях субстрата [S]. По гиперболической кривой, приведенной на рис. 2.5, а, можно рассчитать однако требуемое для этого значение г ах трудно определить экспериментально. Поэтому используют выражение, обрат- [c.106]

Вследствие громоздкости расчетного аппарата данный метод представляет лишь теоретический интерес и, не имея преимуществ по сравнению с классическими методами определения кинетических параметров ферментативной реакции, не может быть рекомендован в качестве альтернативного для обработки реальных систем. [c.110]

Учет диффузионных факторов является одним из наиболее сложных вопросов в катализе иммобилизованными ферментами. В рамках уравнения Михаэлиса—Ментен [уравнение (1)] будет проанализировано влияние диффузионных факторов на эффективные кинетические параметры ферментативной реакции. [c.102]

Для вывода уравнения скорости, связывающего значения кинетических параметров ферментативной реакции (7.17), протекающей в стационарном режиме (при [S]o [E]o), с концентрацией добавленного. ингибитора (ионов Си++) запишем уравнение материального баланса по ферменту [c.156]

Предложить метод определения кинетических параметров ферментативных реакций, основанный на определении площади под кинетической кривой в координатах ([S], i). [c.175]

Определение кинетических параметров ферментативной реакции с помощью интегральной формы уравнения Михаэлиса [c.179]

Т. е. логарифм эффективной константы скорости ацилирования изменяется пропорционально pH. На основании подобных представлений можно легко показать, что графики зависимостей логарифмов кинетических параметров ферментативной реакции от pH должны иметь вид прямолинейных отрезков, соединенных плавными переходными участками (см. гл. 3). Экстраполяция линейных участков до пересечения их друг с другом дает величины рК ионогенных групп, контролирующих изменения данных кинетических (или равновесных) параметров ферментативной реакции. [c.225]

Рассмотрение первых двух процессов входит в круг вопросов, решаемых не физической химией, а гидродинамикой. Мы проанализируем здесь третью проблему, а именно влияние диффузии субстрата в гранулу иммобилизованного фермента на кинетические параметры ферментативной реакции. [c.268]

Методологическая основа обоих подходов состоит а) в изучении влияния степени полимеризации субстрата на кинетические параметры ферментативной реакции б) в количественном анализе химического состава продуктов ферментативной деполимеризации, для чего в качестве субстратов используют линейные олигосахариды, меченные С по концевой восстанавливающей группе. [c.39]

Кинетический параметр ферментативной реакции, численно равный концентрации субстрата, при которой скорость реакции составляет половину максимальной. Характеризует сродство фермента к субстрату. Чем ниже тем прочнее связывание между субстратом и ферментом. [c.551]

Определение кинетических параметров ферментативных реакций из экспериментальных данных. Наиболее распространенный способ определения кинетических параметров уравнения (6.8) состоит в том что экспериментальные данные представляют в координатах (I/o, l/[S]o). Эти координаты называют координатами Лайнуивера—Бёрка или координатами двойных обратных величин . Как следует из выражения [c.218]

Влияние взаимозависимых конкурентных ингибиторов на кинетические параметры ферментативной реакции. Схема двухстадийной [c.227]

Влияние взаимонезависимых конкурентных ингибиторов на кинетические параметры ферментативной реакции. Влияние двух взаимонё-зависимых конкурентных ингибиторов на двухстадийную ферментатив- [c.228]

Влияние взаимонезависимых неконкурентных ингибиторов на кинетические параметры ферментативной реакции. В присутствии двух взаимонезависимых неконкурентных ингибиторов схема двухстадийной ферментативной реакции принимает вид [c.230]

Проводя кинетический анализ (6.52) обычным способом (методом установившихся равновесий при [51о, П о, [121о [Е],,), кинетические параметры ферментативной реакции можно записать следующим образом [c.230]

Бэн( )илд [21] предложил оригинальный метод определения кинетических параметров ферментативных реакций, основанный на определении площади под кинетической кривой в координатах ([S],/). Повторное интегрирование интегральной ( )ормы уравнения скорости ферментативной реакции (6.134) в пределах (О, [S]o) приводит к уравнению [c.249]

При изучении кинетики гидролиза п-нитроанилида Ь-ала-нина, катализируемого аминоцептидазой М в стационарном режиме протекания реакции было найдено, что зависимость начальной скорости ферментативной реакции от концентрации субстрата имеет вид 5-образной кривой при малых концентрациях п-нитро-анилида [19]. Предполагая, что фермент в условиях реакции претерпевает обратимую изомеризацию с образованием неактивного конформера (Е, схема 6.27), и исходя из данных табл. 16, определить значения кинетических параметров ферментативной реакции и константу равновесной обратимой изомеризации фермента [c.124]

Рассматривая полученные выражения, видим, что линеаризация кинетических параметров ферментативной реакции в координатах (1/йкат. [N1) и (/(м(каж)/ каъ [Н]) позволяет провести раздельное определение значений Аг, Аз, А4 и Кз (рис. 78). [c.159]

Нахождение значений рК ионогенных групп фермента (или субстрата), контролирующих скорость реакции, по профилям зависимости кинетических параметров ферментативной реакции от pH производится по тем же правилам, что и при обработке рН-зави-еимостей неферментативных реакций (см. гл. 3), Например, логарифмируя левую и правую части выражения (10.14), получим [c.225]

Известно, что кинетику ферментативных реакций можно изучать с помощью регистрации либо начальных участков кинетической кривой, либо достаточно протяженных ее участков (практически до полного завершения реакции) [21]. В первом случае изучение преврапгений полимеров не отличается принципиально от изучения реакций любых других (простых) субстратов, поскольку в начальный период реакции ферментативной атаке могут подвергаться различные по реакционной способности участки полимера в зависимости от их относительного содержания и относительного сродства фермента к ним. Поэтому соответствующие эффективные кинетические параметры ферментативной реакции (константы Михаэлиса, каталитические константы) являются некоторыми средними величинами и не могут быть использованы для описания и теоретического предсказания временного хода ферментативного процесса на достаточно больших глубинах превращения полимеррюго субстрата. [c.29]

Ясно, что эти данные могут быть интерпретированы более простым образом, а именно что способ действия фосфорилазы (априорно принятый в цитируемой работе [16] как канонический для неупорядоченного действия фермента) несколько отличается от способа действия р-амилазы, что приводит к различному распределению продуктов деструкции полимерного субстрата по молекулярным массам (степени полимеризации). Как неоднократно указывалос . выше, это наиболее характерный признак действия деполимераз, и в рамках кинетики и субстратной специфичности действия ферментов он обусловлен различной зависимостью кинетических параметров ферментативной реакции от степени полимеризации (длины цепи) олигосахаридов. С точки зрения термодинамики действия деполимераз этот характерный признак объясняется различным числом сайтов в активном центре фермента, различным их сродством к мономерным остаткам субстрата и положением каталитического участка в активном центре. Как видно, и в этом случае введение гипотезы о множественной атаке было излишним и преждевременным, так как экспериментальные данные, полученные авторами работы [16], не были подвергнуты тщательному анализу. [c.91]

Наличие одинаковых доменов (амипокислотпых последовательностей) в молекулах рецепторов и соответствующих им лимитирующих ферментах позволяет использовать лимитирующие ферменты в качестве тест - объектов для поиска БАВ, мишепями которых служат соответствующие рецепторы. При этом использование кинетических параметров ферментативных реакций для оценки действия изучаемых веществ механизма позволяет получить более полную информацию, чем использование рецепторов в качестве тест-объектов. [c.4]

Соотношение между кинетическими параметрами ферментативной реакции уравнения (13) в прямом и обратном направлениях дается уравнением Хелдена [уравнение (14)], в котором Kg и Кр — константы диссоциации комплексов фермент-субстрат и фермент-продукт соответственно. [c.245]

Кроме уравнения Лайнувера —Берка предложено еще несколько модифицированных вариантов уравнения Михаэлиса — Ментен, рещение которых позволяет определить точные значения кинетических параметров ферментативных реакций, в частности уравнение Эди—Хофсти [c.107]

Таблица 2.5. Влияние тина ингибирования на кинетические параметры ферментативных реакций и вид графика Лайнувера — Берка

Конформационные изменения, приводящие к изменению кинетических параметров ферментативной реакции, зарегистрированы в большом числе случаев (см. [1661,2449]). Различные конформеры имеют, как правило, сильно отличащиеся термодинамические характеристики связывания и превращения субстрата. Например [2452], химотрипсин изменяет свое состояние при гидролизе п-нитрофенил-ацетата, что проявляется в изломе графиков 1пк 1/Т (при 20,9° С) и Хпйуй + У (при 20,1° С). Значения аН и при низких температурах составляют 20,5 ккал/моль и +13 э.е., а при высоких - 0,34 ккал/моль и -0,55 э.е. Активационные параметры деащшфования не зависят от температуры. Од- [c.230]

Соотношение Холдейна на самом деле является обобщением уравнения, использованного ранее фон Ойлером и Джозефсоном [52] для сопоставления кинетических параметров ферментативного гидролиза Р-метилглюкозы с константой равновесия для ферментативной реакции. Однако значение этого соотношения не было должным образом оценено до тех пор, пока Бок и Альберти [13] не применили соотношение Холдейна для анализа кинетических параметров ферментативной реакции, катализируемой фумаразой . [c.52]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология