Вирус вирулентность репликация

Встречаюш.иеся в природе мутанты реовируса с измененной тропностью к ЦНС могут быть выделены экспериментально путем отбора вируса с измененным капсидным белком 51 — аналогом УР1 вируса полиомиелита [175]. 51 участвует в адсорбции вируса на клетках хозяина и представляет собой главную мишень для нейтрализующих антител [45, 193]. Мутанты реовируса, которые резистентны к действию нейтрализующих моноклональных антител, направленных против 51, обладают пониженной тропностью к специфическим участкам мозга экспериментально зараженных мышей [174]. Однако эти мутанты с измененным белком 51 нормально размножаются во внутренних органах мышей. Отобранные с помощью моноклональных антител мутации поверхностного гликопротеина вируса бешенства также могут приводить к аттенуации вируса для ЦНС [29, 33, 47],, причем у мутантов возможны реверсии к вирулентности, свойственной дикому типу вируса [47]. Эти наблюдения свидетельствуют о том, что вирус со сложным патогенезом, включающим в себя репликацию в месте проникновения и последующее распространение, может быть аттенуирован избирательным изменением сродства к органу-мишени. Неизвестно, является ли этот механизм главным или вообще единственным для аттенуации живых вирусных вакцин, используемых в настоящее время. Следует подчеркнуть, что к аттенуации ведет ограничение любой существенной функции вируса. Таким образом, мутация, которая снижает вирулентность, может возникнуть почти в каждом гене. [c.165]

Чтобы установить и поддерживать персистентную инфекцию, следует нейтрализовать нормальное цитопатическое действие вируса при этом резко снижается его способность реплицироваться. Персистентная инфекция может запускаться стандартным вирулентным вирусом, если его репликацию подавить предварительной обработкой клеток интерфероном или заражать им совместно с большим количеством ДИ-частиц. Поддержание персистентной инфекции коррелировало со многими факторами, которые варьировали в разных линиях, но все, без исключения, снижали уровень репликации вируса. И ДИ-частицы, и интерферон важны не только для установления, но и для поддержания персистенции. Тем не менее обнаружилось, что главную роль в поддержании персистенции играет отбор мутантов. В целом вирусы, выделенные из персистентно зараженных клеток, существенно отличаются от тех, которые использовали для заражения. Как правило, VSV, выделенные из персистентно зараженных клеток, образуют мелкие бляшки, реплицируются хуже, чем родительский штамм, и приобретают /s-фенотип. Хотя в ходе долговременной персистенции в вирусном геноме могут накапливаться сотни мутаций, отбору подвергаются мутанты с фенотипом РНК , пока такой фенотип не становится преобладающим в вирусной популяции. Такие мутанты способны вызывать персистентную инфекцию при переносе в незаражен-ную культуру даже в отсутствие интерферона или ДИ-частиц. [c.442]

Неопределенность многих ранних экспериментов по генетике вирусов гриппа (а также некоторых более поздних исследований) можно объяснить вынужденным использованием неполных генетических маркеров. Поскольку вирусология животных возникла на основе ее первоначальной тесной связи с патологией, были все основания надеяться на маркеры, связанные с патогенностью вируса для экспериментальных животных. Полигенная природа таких явлений, как консолидация легочной ткани у мышей, была расшифрована впервые F. Burnet — пионером в этой области. Оказа-тось, что необходима серия мутации для адаптации вируса к репликации в легких мышей и последуюш его развития множественных легочных поражений [20]. Из маркеров вирулентности наибо-lee пригодным оказался маркер нейровирулентности, выявляемый а вумя независимо полученными мутантами оригинального штамма WS—NWS [118] и WS—N [31]. Однако этот маркер также оказался полигенным [49 см. также далее обсуждение проблемы виру-иентности]. [c.14]

Наибольшая информация накоплена в отношении сегментов РНК, с которыми связана высокая вирулентность возбудителей. Как отмечено ранее, установлена четкая корреляция между расщепляемостью НА в различных культивируемых клеточных системах и патогенностью вирусов для цыплят [40, 42]. Позднее было показано, что родительские и реассортантные вирусы, патогенные для цьшлят, активно размножались нри 41 °С. Наоборот, непатогенные вирусы, содержащие легкорасщенляемый НА, менее интенсивно размножались при 41 °С это подтверждает, что температурозависимая репликация является дополнительным фенотипическим признаком авирулентных реассортантных вирусов [43]. [c.301]

Несомненно, что наиболее точно установленные к настоящему времени различия в вирулентности, зависящие от вируса, связаны с расщеплением НА. H-D. Klenk и соавт. [27], а также S. Lazarowitz и Р. hoppin [28] первыми показали, что частицы вируса, продуцируемые в клетках, в которых не имеется протеаз хозяина, способных расщеплять вирусный НА на субъединицы НА1 и НА2, могут прикрепляться к рецепторам клетки-хозяина, но неспособны инициировать инфекцию. Впоследствии на различных клеточных системах и интактных животных было показано, что для многоцикловой репликации различных вирусов гриппа необходимо, чтобы клетки хозяина могли осуществлять процесс расщепления [8]. Затем было обнаружено, что это свойство необязательно связано с серотипом НА некоторые Н7-содержащие вирусы являются патогенными и реплицируются с расщепленным НА, тогда как НА других авирулентных вирусов того же серотипа не расщепляется [18]. Более того, обнаружили корреляцию этих различий с последовательностью карбоксильных окончаний различных видов НА1. В вирусах человека, содержащих Н2 и НЗ, а также в авирулентных Н7-содержащих птичьих вирусах только аргинин глициновый пептид чувствителен к протеолитическому расщеплению, в то время как связующий пептид в карбоксильных окончаниях НА1 вирулентных штаммов с Н7 имеет большую длину и содержит основные пептиды. В результате возникло предположение, что эти структурные различия в участках расщепления непосредственно связаны с расщепляемостью различных гемагглютининов в тех или иных клеточных системах хозяина [8]. [c.299]

В отличие от вируса осповакцины каждый из вирусов, раз-рещенных для использования в качестве живых вакцин, имеет четкую родословную. Во всех случаях штаммы происходят от вирусов человека. Аденовирусные вакцинные штаммы (типы 4 и 7) представляют собой дикие типы вирусов человека, вызывающие бессимптомную инфекцию благодаря способу их введения и ограничению репликации в месте введения, где болезнь не развивается [19]. Одним из наиболее широко используемых вакцинных штаммов является встречающийся в природе аттенуированный вирус полиомиелита, который был идентифицирован по отсутствию вирулентности при его введении в головной и спинной мозг обезьян (вирус полиомиелита тип 2, штамм 712) [169]. Остальные вакцинные вирусы получены серийными пассажами на неприродном хозяине, ведущими к появлению мутантов, размножение которых в организме человека частично ограничено в месте введения и (или) в органе-мишени. Аттенуированные таким образом мутанты вируса краснухи или вирусов полиомиелита типа 1 и 3 отобраны путем пассирования в культуре клеток почек обезьян [43, 163]. Вакцинные штаммы вируса желтой лихорадки (штамм 170) и вируса кори получены в культуре клеток куриного эмбриона, в то время как для аттенуации вируса паротита использовали сами куриные эмбрионы [43]. [c.161]

Генетическая основа очень редкого увеличения вирулентности вакцинных штаммов вируса полиомиелита во время его репликации in vivo неизвестна [204]. В случае вируса типа 3 в кишечнике вакцинированных может наблюдаться сдвиг в сторону более высокого уровня вирулентности для ЦНС обезьян, однако пока значение таких изменений не выяснено. Они широко распространены, но связанный с вакцинацией паралич встречается чрезвычайно редко [116, 198]. Информация о мутациях, развивающихся во время репликации вакцинного вируса в организме индивидуума с бессимптомной инфекцией или параличом, скудна. Было проанализировано пять изолятов — четыре от больных с параличом, связанным с вакцинацией (два вирусом полиомиелита типа 1 и два типа 3), и один от вакцинированного, у которого полиомиелит (типа 1) не развился. Карты больших олигонуклеотидов этих изолятов (представляющих 10 % вирусного генома) сравнивали с соответствующими картами родительских вакцинных штаммов [135]. На основании этих исследований было установлено, что четыре изолята из пяти обследованных (три типа 1 и один типа 3) претерпели от 40 до 70 мутаций [135]. Картина мутаций изолятов типа 1 была уникальной для каждого вируса. Интересно, что олиго-нуклеотидная карта одного из вирусов типа 3, выделенного из спинного мозга больного бульбарным полиомиелитом, не отличалась от соответствующей карты вакцинного вируса [135]. Полученные данные позволяют предположить, что этот вирус претерпел менее 10 мутаций. Таким образом, для восстановления вирулентности требуется всего несколько мутаций в соответствующей зоне. Похоже, что многие мутации, обнаруженные в других изолятах, были молчащими в отношении нейровирулентности. [c.167]

Вирусы, имеющие сегментированный геном, могут быть эффективно аттенуированы путем реассортации генов. Как описано ранее, вирулентный вирус гриппа А аттенуируется переносом ts- и са-генов от донора-мутанта. Мутации, используемые для этой цели, должны быть локализованы в генах, кодирующих неповерхностные антигены, так чтобы мутантные гены могли быть перенесены в реассортантный вирус с нужными поверхностными антигенами, обычно принадлежащими новому эпидемическому или пандемическому штамму. В такой ситуации несущие миссенс-мутации переносимые гены ограничивают репликацию вируса, что и приводит к аттенуации. [c.172]

Принимая во внимание сложный механизм гибели клетки при рабдовирусной инфекции, кажется вероятным, что персистентная инфекция отражает не нарушение специальной летальной функции вируса, а угнетение вирусных функций ниже уровня, необходимого для гибели клетки. До сих пор непонятно, почему в популяции вирулентного вируса отбору подвергаются частицы, дефектные по репликации. Хотя вирусы, выделенные при персистентной инфекции, чувствительны к температуре, клеточные культуры обычно ведутся при температурах, полностью пермиссивных для вирусов дикого типа и лишь полупер-миссивных для /s-мутантов. Тем не менее такие мутанты распространяются в культуре. Эксперименты по коинфекции показали, что /s-мутанты VSV способны подавлять репликацию вируса дикого типа, ж то время как репликация самих мутантов лишь усиливается [50]. Эти результаты объясняют, почему /s-мутанты поддерживаются в популяции и даже пользуются [c.442]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология