Вирус вирулентность мутанты

В отличие от вируса осповакцины каждый из вирусов, раз-рещенных для использования в качестве живых вакцин, имеет четкую родословную. Во всех случаях штаммы происходят от вирусов человека. Аденовирусные вакцинные штаммы (типы 4 и 7) представляют собой дикие типы вирусов человека, вызывающие бессимптомную инфекцию благодаря способу их введения и ограничению репликации в месте введения, где болезнь не развивается [19]. Одним из наиболее широко используемых вакцинных штаммов является встречающийся в природе аттенуированный вирус полиомиелита, который был идентифицирован по отсутствию вирулентности при его введении в головной и спинной мозг обезьян (вирус полиомиелита тип 2, штамм 712) [169]. Остальные вакцинные вирусы получены серийными пассажами на неприродном хозяине, ведущими к появлению мутантов, размножение которых в организме человека частично ограничено в месте введения и (или) в органе-мишени. Аттенуированные таким образом мутанты вируса краснухи или вирусов полиомиелита типа 1 и 3 отобраны путем пассирования в культуре клеток почек обезьян [43, 163]. Вакцинные штаммы вируса желтой лихорадки (штамм 170) и вируса кори получены в культуре клеток куриного эмбриона, в то время как для аттенуации вируса паротита использовали сами куриные эмбрионы [43]. [c.161]

Встречаюш.иеся в природе мутанты реовируса с измененной тропностью к ЦНС могут быть выделены экспериментально путем отбора вируса с измененным капсидным белком 51 — аналогом УР1 вируса полиомиелита [175]. 51 участвует в адсорбции вируса на клетках хозяина и представляет собой главную мишень для нейтрализующих антител [45, 193]. Мутанты реовируса, которые резистентны к действию нейтрализующих моноклональных антител, направленных против 51, обладают пониженной тропностью к специфическим участкам мозга экспериментально зараженных мышей [174]. Однако эти мутанты с измененным белком 51 нормально размножаются во внутренних органах мышей. Отобранные с помощью моноклональных антител мутации поверхностного гликопротеина вируса бешенства также могут приводить к аттенуации вируса для ЦНС [29, 33, 47],, причем у мутантов возможны реверсии к вирулентности, свойственной дикому типу вируса [47]. Эти наблюдения свидетельствуют о том, что вирус со сложным патогенезом, включающим в себя репликацию в месте проникновения и последующее распространение, может быть аттенуирован избирательным изменением сродства к органу-мишени. Неизвестно, является ли этот механизм главным или вообще единственным для аттенуации живых вирусных вакцин, используемых в настоящее время. Следует подчеркнуть, что к аттенуации ведет ограничение любой существенной функции вируса. Таким образом, мутация, которая снижает вирулентность, может возникнуть почти в каждом гене. [c.165]

При изыскании подходящего агента, пригодного для получения вакцин, высокий мутагенный эффект азотистой кислоты и гидроксиламина часто рассматривается как серьезный недостаток, способный привести к образованию сверхвирулентного мутанта. В действительности же среди многих сотен мутантов, полученных экспериментальным путем начиная с 1958 года (см. гл. IX, разд. Б), ни один не обладал необычной вирулентностью и почти у всех инфекционность, продуктивность и (или) стабильность были слабее, чем у дикого типа. Это и неудивительно, так как на протяжении длительной эволюции под влиянием естественного отбора образовались настолько совершенные формы вирусов, что сколько-нибудь заметное увеличение их вирулентности маловероятно. [c.198]

Чтобы установить и поддерживать персистентную инфекцию, следует нейтрализовать нормальное цитопатическое действие вируса при этом резко снижается его способность реплицироваться. Персистентная инфекция может запускаться стандартным вирулентным вирусом, если его репликацию подавить предварительной обработкой клеток интерфероном или заражать им совместно с большим количеством ДИ-частиц. Поддержание персистентной инфекции коррелировало со многими факторами, которые варьировали в разных линиях, но все, без исключения, снижали уровень репликации вируса. И ДИ-частицы, и интерферон важны не только для установления, но и для поддержания персистенции. Тем не менее обнаружилось, что главную роль в поддержании персистенции играет отбор мутантов. В целом вирусы, выделенные из персистентно зараженных клеток, существенно отличаются от тех, которые использовали для заражения. Как правило, VSV, выделенные из персистентно зараженных клеток, образуют мелкие бляшки, реплицируются хуже, чем родительский штамм, и приобретают /s-фенотип. Хотя в ходе долговременной персистенции в вирусном геноме могут накапливаться сотни мутаций, отбору подвергаются мутанты с фенотипом РНК , пока такой фенотип не становится преобладающим в вирусной популяции. Такие мутанты способны вызывать персистентную инфекцию при переносе в незаражен-ную культуру даже в отсутствие интерферона или ДИ-частиц. [c.442]

Преяаде всего американский штамм вируса я)де рного п<риэ(др01за, специфичный для непарного шелкопряда, по-видимому, мало вирулентен убивающие дозы можно произвести, но необходимое количество вируса обойдется слишком дорого. Ученые Лесного управления МСХ США пытаются решить проблему отбором вирулентных мутантов из местной популяции, а также испытывают относительную вирулентность штаммов, выделенных из непарного шелкопряда в Японии, Испании и Югославии. [c.311]

Бактериальные вирусы делят на вирулентные, при инфицировании которыми все зараженные клетки гибнут с высвобождением новых фаговых частиц, и умеренные, вызывающие либо лизис инфицированных бактерий с высвобождением потомства новых фагов, либо их лизо-генизацию [4]. В лизогенном состоянии фаговый геном, называемый уже профагом, реплицируется синхронно с бактериальной хромосомой в форме плазмиды или включаясь в хромосому. Несмотря на то что вирулентные фаги и вирулентные мутанты умеренных фагов способны к трансдукции, в природе основной приток генов в бактерии за счет трансдукции обусловлен лизогенными умеренными фагами, которые представляют собой наиболее простые системы для изучения. [c.80]

В 1963 г. в Голландии были начаты исследования по преиммунизации томатов для защиты от мозаики. Для этого всходы инокулировали ослабленным вирусом мозаики табака (индуцированный мутант), специфическая интерференция должна была подавлять заражение вирулентным диким штаммом. Подобный вирус для получения индуцированного иммунитета (штамм М П-16) оказался вполне пригодным и имеется в продаже [386]. Хорошие результаты применения этого метода получены также в Шотландии, НРР и СССР. В ГДР вирусный препарат под названием томавир допущен в производство. [c.221]

В монографии рассмотрены генетика и молекулярные основы репродукции вируса ipnnna, его эволюция и эпидемиология. Описаны геном вируса гриппа, транскрипция генома и геномные РНК-сегменты. Представлены данные об антигенной вариации и мутантах вирусов гриппа, экспрессии клонированных генов, генетическом базисе вирулентности вируса. Освещены наиболее крупные пандемии XX века. [c.4]

Неопределенность многих ранних экспериментов по генетике вирусов гриппа (а также некоторых более поздних исследований) можно объяснить вынужденным использованием неполных генетических маркеров. Поскольку вирусология животных возникла на основе ее первоначальной тесной связи с патологией, были все основания надеяться на маркеры, связанные с патогенностью вируса для экспериментальных животных. Полигенная природа таких явлений, как консолидация легочной ткани у мышей, была расшифрована впервые F. Burnet — пионером в этой области. Оказа-тось, что необходима серия мутации для адаптации вируса к репликации в легких мышей и последуюш его развития множественных легочных поражений [20]. Из маркеров вирулентности наибо-lee пригодным оказался маркер нейровирулентности, выявляемый а вумя независимо полученными мутантами оригинального штамма WS—NWS [118] и WS—N [31]. Однако этот маркер также оказался полигенным [49 см. также далее обсуждение проблемы виру-иентности]. [c.14]

Для других вакцинных вирусов экспериментальная система оценки вирулентности была недоступна. Поэтому их испытывали на аттенуацию непосредственно на людях. Сначала препараты вакцин против кори и краснухи не были достаточно аттенуированы, но дальнейшие пассажи вируса краснухи в культуре клеток почек обезьян и селекция холодоадаптированных температурочувствительных мутантов вируса кори дали удовлетворительные вакцинные штаммы. Аттенуацию вируса паротита также проверяли на людях. [c.162]

Вирусы, имеющие сегментированный геном, могут быть эффективно аттенуированы путем реассортации генов. Как описано ранее, вирулентный вирус гриппа А аттенуируется переносом ts- и са-генов от донора-мутанта. Мутации, используемые для этой цели, должны быть локализованы в генах, кодирующих неповерхностные антигены, так чтобы мутантные гены могли быть перенесены в реассортантный вирус с нужными поверхностными антигенами, обычно принадлежащими новому эпидемическому или пандемическому штамму. В такой ситуации несущие миссенс-мутации переносимые гены ограничивают репликацию вируса, что и приводит к аттенуации. [c.172]

Двойное заражение культуры клеток вирусом LA дикого типа (генотип LA /LA /LA L/M/S) и SSH дикого типа (генотип SSH/SSH/SSH L/M/S) дает высокий выход реассортантов некоторых типов (SSH/LA /LA , SSH/LA /SSH, SSH/SSH/LA и LA /LA /SSH), но низкий выход реассортантов с генотипами LA /SSH/LA и LA /SSH/SSH [102, 104, D.H.L. Bishop, неопубликованные данные]. При использовании температурочувствительных (ts) мутантов по сегментам L и М каждого из родительских вирусов реассортанты дикого типа со структурой, LA /SSH/LA и LA /SSH/SSH были получены лишь с очень низкой частотой (менее 1 % всего потомства) и только при высокой множественности заражения за счет агрегации вирионов /s-вирусов полиэтиленгликолем [207]. Причина такой неэффективной рекомбинации неизвестна. Реассортанты обладают теми же ростовыми свойствами (время накопления потомства, выход, и т. д.), вирулентностью in vivo, способностью к передаче переносчиками, что и вирус SSH, и вирус LA дикого типа [17, 207, 219]. [c.378]

Принимая во внимание сложный механизм гибели клетки при рабдовирусной инфекции, кажется вероятным, что персистентная инфекция отражает не нарушение специальной летальной функции вируса, а угнетение вирусных функций ниже уровня, необходимого для гибели клетки. До сих пор непонятно, почему в популяции вирулентного вируса отбору подвергаются частицы, дефектные по репликации. Хотя вирусы, выделенные при персистентной инфекции, чувствительны к температуре, клеточные культуры обычно ведутся при температурах, полностью пермиссивных для вирусов дикого типа и лишь полупер-миссивных для /s-мутантов. Тем не менее такие мутанты распространяются в культуре. Эксперименты по коинфекции показали, что /s-мутанты VSV способны подавлять репликацию вируса дикого типа, ж то время как репликация самих мутантов лишь усиливается [50]. Эти результаты объясняют, почему /s-мутанты поддерживаются в популяции и даже пользуются [c.442]

Применяя этот способ, авторы показали, что аттенуированные штаммы полиовируса типа I LS ab и Baylor AU имеют К = 0,22—0,33, а вирулентные штаммы и аттенуированный штамм HAT — К —3,8—4,3. Кроме того, ряд исследованных штаммов имел гетерогенные кривые противо-точного распределения Прингл и Слайд [675] подобным методом анализировали генетические свойства некоторых мутантов двух штаммов вируса ящура SAT 2. Мутант, образующий мелкие бляшки, имел кривую распределения, резко отличающуюся от кривой распределения мутанта, образующего нормальные бляшки. Также три мутанта вируса ящура и — имели гетерогенные кривые нро-тивоточного распределения в двухфазной системе, состоящей из 7% декстрансульфата и 1,2% полиэтиленгликоля в 0,01 М фосфатном буфере. [c.94]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология