Антигенный анализ

Последние достижения в развитии новейших технологических приемов значительно расширили наши возможности в определении генетического строения и молекулярной структуры вирусов, а также выявлении сходства штаммов и идентификации различий между вариантами вирусов. Наиболее важные из этих методов — клонирование и определение последовательности нуклеиновых кислот, картирование РНК и пептидов, а также антигенный анализ белков с помощью моноклональных антител. Задача последней обзорной главы данной книги — обсуждение эпидемиологии вируса гриппа в свете применения этих новых методов. Особое внимание уделено оценке последних достижений и изучению вопросов эпидемиологии, которые могут быть успешно решены при использовании молекулярных методов. [c.313]

Можно ли ожидать, что реакция между специфическим антителом и белковым антигеном (анализ может проводиться любым способом) будет зависеть от того, является ли белок нативным или денатурированным Объясните. [c.274]

В медицине моноклональные антитела применяют прежде всего для диагностики различных заболеваний. Такие бактериальные заболевания, как кокковые, паразитарные инфекции, малярия, а также грибки хламидии, при помощи мкАТ диагносцируются гораздо точнее, чем другими, традиционными методами. В вирусологии использование мкАТ дало возможность разработать условия антигенного анализа вирусов гораздо более информативного, чем при использовании поликлональных антител. Этот метод позволил получить уникальную информацию об антигенных детерминантах ДНК- и РНК-содержащих вирусов и их изменчивости. В частности, были идентифицированы антигенные детерминанты вирусов гриппа, полиомиелита, гепатита А и др. [c.495]

Антигенные варианты НА отбирали путем выращивания впруса в присутствии моноклонального антитела к НА. Частота вариантов в вирусном материале составляла 10 , и они вообще не связывались с антителом, которое использовали для их селекции. Эти варианты при сравнительном антигенном анализе мутантных вирусов с моноклональными антителами использовали для конструирования экспериментальной антигенной карты молекулы НА. [c.133]

Было обнаружено, что белок NS1 очень гетерогенен в отношении заряда и фосфорилирования [82]. Степень фосфорилирования является характеристикой определенных подтипов. Антигенный анализ продуктов NS1 различных подтипов с использованием поликлональных антисывороток показал значительную кроссреактивность между всеми вирусами гриппа типа А, но постепенный антигенный дрейф был выявлен в конкурентном радиоиммунотесте [94]. [c.154]

При антигенном анализе продуктов протеолиза белков желательно использовать антисыворотки от нескольких животных, полученные в различные сроки после иммунизации. Так, в случае изучения антигенной структуры белка вируса табачной мозаики было установлено, что индивидуальные антисыворотки кроликов реагируют, как правило, с С-концевым декапептидом, но часть антисывороток соде ржит антитела против N-концевого декапептида. Антитела к С-концевому декапептиду от некоторых кроликов взаимодействуют с пептидом, от которого отщеплен С-концевой аргинин, в то время как антитела от других кроликов распознают детерминанту только [c.28]

Закономерен вопрос, нельзя ли избежать отмеченных выше трудностей антигенного анализа, отказавшись от традиционной техники получения антител в результате иммунизации и оперируя вместо этого моноклональными антителами, полученными с помощью гибридомной техники (см. гл. 12). О чевидно, что для детального анализа антигенной структуры, например белков, необходимо использование большого числа индивидуальных клонов. Чтобы учесть генетические особенности иммунного ответа индивидуальных реципиентов, придется производить слияние с клетками плазмацитомы лимфоидных клеток от генетически неидентичных особей, отбор которых может быть ли,шь случайным. Тем самым степень неопределенности задачи не уменьшится. [c.30]

Вообще спонтанное восстановление конформации де-натурироваиного белка ведет к восстановлению его антигенной структуры. Это продемонстрировано на совершенно различных по степени сложности структурной организации белках, в том числе на таких, как рибонук-леаза и иммуноглобулин G. Тем самым антигенный анализ может служить одним из надежных методов оценки степени ренатурации белка. [c.32]

Хотя легкие цепи у иммуноглобулинов одного класса и подкласса в пределах отного вида одинаковы, их способность в составе мoлeкvлы иммуноглобулина индуцировать образование антител различна. Так, среди подклассов IgG она наименее выражена у IgG2 и IgG4. На этом основании можно заключить, что в различных подклассах IgG константный домен легкой цепи в разной степени испытывает на себе влияние Сц1-домена, что зависит от тонких особенностей их конформации. Так антигенный анализ позволяет более глубоко проникнуть в тайну структурной организации иммуноглобулинов. [c.83]

Предлагаемая мною гипотеза, конечно, нуждается в доптнительных подтверждениях. Но она служит основой тля далеко идущих предположений общебиологического плана. Например, проблемы так называемых неспецифических или нормальных иммуноглобулинов. Иммунологам хорошо известно, что одновременно с синтезом антител образуется большое количество иммуноглобулинов, которые никакие известные лиганды, в том числе и использованный антиген, не связывают. Число продуцирующих их клеток хможет намного превышать число ан-тителЬпродуцирующих клеток (Е. Сидорова и др., 1981). По всем признакам (общий план строения, антигенный анализ) нормальный иммуноглобулин отличается от антител только одним он не связывает известных лигандов. На основании обсуждавшихся данных рентгеноструктурного анализа мы ставим на обсуждение предположение о том, что нормальные иммуноглобулины — это энергетически устойчивая конформация молекулы имму- [c.100]

Вопрос о роли Рс-рецепторов макрофагов и других клеток в иммунологических реакциях рассматривался в гл. 6. Здесь следует лишь сказать, что сравнительное изучение строения рецепторов лимфоцитов и макрофагов оказалось полезным инструментом для понимания организации пх молекул. Из-за трудностей, связанных с на-копленпем достаточного количества материала для химического изучения особое значение прп исследовании структуры F -рецептора приобрел метод антигенного анализа. Приведем схематически результаты такого анализа, выполненного И. Сычевой с соавторами (1982, 1983). [c.206]

Помимо выявления аитигенной неоднородности метод двойной диффузии в геле позволяет сравнить антигенное строение нескольких веществ и выявить наличие сходства и различий между ними. Как всякий иммунологический метод, метод двойной диффузии в геле имеет ограничения, основное из которых — спектр антител в исследуемой антисыворотке. Так, в ранних работах при сравнительном изучении антигенного строения IgG кролика и его Fab- и F -фрагментов использовали антисыворотку против IgG кролика, полученную от коз. Исследователям не было тогда известно, что животные этого вида не образуют практически антител против детерми-Бант Fab-участка молекулы. Поскольку при использовании этой антисыворотки F -фрагмент давал реакцию антигенной идентичности с нерасщепленной молекулой IgG, сделали ошибочное заключение об отсутствии в РаЬ-участке видоспецифических антигенных детерминант. Ошибка была исправлена после исследования фрагментов молекулы IgG с помощью антииммуногло- булиновых сывороток, полученных от животных других видов, в антисыворотке осла против IgG кролика содержится примерно равное количество антител против антигенных детерминант Fab- и F -участком. На этом примере можно еще раз убедиться в необходимости использования при антигенном анализе антисывороток, полученных от животных разных видов (см. гл. 2). [c.255]

Эволюционная биохимия. Вопросы, связанные с изучением сходства строения белков разных бноло1Ических видов, с успехом могут решаться, в том числе с исиоль-зованием методов антигенного анализа. Примером такого анализа служат собственно иммуноглобулины н многие другие белки. [c.269]

Следует обратить внимание читателей на те основные тенденции развития иммуноферментного анализа, которые прослеживаются в представленной книге сокращение времени анализа и упрощение методик благодаря переходу к гомогенным методам анализа применение двойных меток (два фермента, фермент и якорная группа и т. д.), которые повышают специфичность детектирования ферментной метки использование моноклональных антител и множественный антигенный анализ для повышения специфичности иммунохимической стадии детектирования. Принципиально новым является создание методов иммунохроматографии, в которых концентрация вещества определяется не по активности ферментного конъюгата, а по его хроматографической подвижности. [c.6]

Антигенные варианты NA вируса гриппа А/Токуо/3/67 (H2N2) были селекционированы при проведении одного пассажа вируса в куриных эмбрионах в присутствии моноклональных антител к NA. Варианты были отобраны с частотой 10 из клонированного вируса [116]. Частота выделения вариантов NA подобна частоте выделения вариантов НА [128]. Был селекционирован ряд вариантов и использован для построения экспериментальной карты молекулы NA методом сравнительного антигенного анализа мутантных вирусов с моноклональными антителами в ELISA и в тесте ингибиции нейраминидазной активности. Эти эксперименты подтвер- [c.144]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология