Центрифуги с охлаждением

Получение экстракта. Мышечную ткань (15—20 г) измельчают на льду ножницами и гомогенизируют 30—40 с 1 объемом раствора Бейли. К гомогенату добавляют еще 2 объема раствора Бейли и смесь оставляют на холоде на 15—20 мин, время от времени осторожно помешивая ее стеклянной палочкой. Гомогенат центрифугируют на центрифуге с охлаждением в течение 15—20 мин при 10 000—12 000 об/мин. [c.392]

Для биохимических исследований особенно незаменимы центрифуги с охлаждением. В большинстве случаев они сконструированы так, что охлаждающая трубка уложена внутри предохранительного корпуса (пробирочные центрифуги) (см. рис. 203) или охлаждается весь корпус центри- [c.191]

Во избежание денатурации белков рекомендуется использовать центрифугу с охлаждением. [c.127]

Реактивы и оборудование 1) 1%-ный водный раствор пирофосфата натрия, 2) свежеперегнанный водонасыщенный фенол, 3) смесь 1%-ного пирофосфата натрия с водонасыщенным фенолом (1 1), 4) 96%-ный этанол, 5) эфир медицинский, 6) гомогенизатор ножевой, 7) центрифуга с охлаждением. [c.63]

Приготовление раствора фермента амилазы. Для приготовления раствора фермента амилазы к 1 л ферментного раствора, охлажденному до О—3°, добавляли 490,5 г сульфата аммония. Раствор перемешивали до полного растворения сульфата аммония, отстаивали в холодильнике в течение 24 часов, а затем декантировали. Осадок отделяли на центрифуге с охлаждением при 5000—6000 об/мин, растворяли в холодной дистиллированной воде и полученный ферментный раствор подвергали очистке в электродиализных аппаратах. [c.323]

Отравление тли производилось путем посадки определенного количества особей в стеклянные чашки, опрыснутые ацетоновыми растворами чистых действующих начал инсектицидов в концентрациях, достаточных для получения нужной стадии паралича после экспозиции в течение 4—18 часов, в зависимости от класса инсектицида. Из отравленных и здоровых особей одной популяции приготавливался 2%-ный гомогенат, который затем центрифугировался на центрифуге с охлаждением при 12000 X g, t =0 —2° С в течение 10 минут. Прозрачный супернатант был использован в качестве источника фермента. [c.12]

Центрифуга с охлаждением скорость до 10 ООО д, ротор рассчитан на 30-мл центрифужные пробирки. [c.285]

Центрифуга с охлаждением, работающая со скоростями до 10 ООО . [c.299]

Центрифуга с охлаждением (скорость до 10 000 g). [c.323]

Центрифуга с охлаждением (максимальная скорость 22 ООО g) Толстостенные стеклянные (пирексовые) центрифужные пробирки на 50 мл [c.329]

Эмульсию центрифугируют при 17 000 g в течение 10 мин в центрифуге с охлаждением при температуре от О до 4°С. [c.116]

Стеклянный гомогенизатор с тефлоновым пестиком. Центрифуги с охлаждением на 12 000 и 40 000 об/мин. Водяная баня на 37 °С с устройством для встряхивания проб. Сцинтилляционный счетчик. [c.271]

Все препаративные работы проводят при 2—4°С (в том числе используют центрифуги с охлаждением). [c.301]

При очистке ферментов лишь в редких случаях можно избежать центрифугирования. В промышленных масштабах для отделения осадка обычно используют фильтрационные системы, но в лаборатории более удобна центрифуга. Принципы и методы центрифугирования изложены ниже (разд. 1.2). В большинстве случаев нужна стандартная постоянно работающая центрифуга с охлаждением до 0°С или немного ниже при этом эффективность центрифугирования, выражающаяся произведением относительной величины g на емкость в литрах, должна быть порядка 10 ООО— 15 ООО. Можно использовать множество центрифуг других типов — от настольных до препаративных ультрацентрифуг. Но они не всегда нужны и вряд ли будут применяться при очистке ферментов так же часто, как типовая центрифуга, описанная выше. [c.11]

Мышечный гомогенат центрифугируют 10 мин в центрифуге с охлаждением при 12 000 g. Для инактивации глюкозофосфатизомера-зы проводят тепловую обработку. Мутный экстракт из центрифужных пробирок сливают в стеклянный стакан, доводят его pH до 5,0, добавляя по каплям 1 н. СНзСООН при постоянном перемешивании стеклянной палочкой. Проводят тепловую обработку стакан с экстрактом помещают в водяную баню, нагретую до 85—90°С, и нагревают экстракт, поддерживая указанную температуру в бане, до тех пор, пока его температура достигнет 65° (экстракт постоянно перемешивают). По окончании тепловой обработки стакан с экстрактом помещают в ледяную баню и охлаждают его до 4°С. Осадок денатурированных белков отделяют центрифугированием или фильтрованием. Центрифугат (фильтрат) хранят в рефрижераторе и используют его как источник фосфоглюкомутазы. Так как ферментативная активность сохраняется в течение нескольких недель, экстракт можно использовать при проведении повторных экспериментов. [c.60]

Выпавший осадок биополимера можно отделить от раствора фильтрованием. Известно, что фильтрование является высокопроизводительной операцией, применяющейся даже в промышленных масштабах. В то же время часто из-за мелкого размера выпавших частиц фильтрование проходит очень медленно, что затягивает процедуру выделения и может служить источником нежелательной инактивации биополимера. Поэтому в тех случаях, когда это не противопоказано масштабами разделения, в биохимии предпочитают использовать центр ифуги. Широко используются рефрижераторные центрифуги с охлаждением камеры, в которой вращается ротор. Частицы осажденного вещества под действием центробежного поля оседают на дне центрифужных стаканов и сжимаются в плотный осадок, с которого оставшийся раствор надосадочная жидкость, или супернатант) легко сливается или отсасывается. Скоростные центрифуги (ультрацентрифуги), создающие центробежное ускорение порядка 10 ускорений силы тяжести, т.е. порядка 10 м-с 2, позволяют осаждать даже некоторые достаточно крупные индивидуальные надмолекулярные агрегаты, такие, как рибосомы и вирусы. [c.234]

Белки можно фракционно осаждать, увеличивая концентрацик> неполярных растворителей, таких, как этанол и ацетон. Во время фракционирования необходимо поддерживать температуру, близкую к точке замерзания смеси. При фракционировании спиртом следует применять центрифуги с охлаждением. Поскольку теплота растворения этанола выделяется в основном при разбавлении абсолютного этанола до 90%, для фракционирования целесообразно использовать 90%-ный этанол. [c.14]

Реактивы и оборудование 1) экстрагент — 0,05—0,08 М ацетатный буфер, pH 6,2—0,001 М М С1а—0,5%-ный ДДС — бентонит 5 мг в мл, 2) 5%-ный раствор ДДС, 3) дезоксирибонуклеаза, 4) 96%-ный и 75%-ный этанол, 5) 90%-ный фенол, 6) поливинилсульфат натрия или калия, 7) ступки фарфоровые, 8) кварцевый песок, 9) центрифуга с охлаждением. [c.62]

Обычно во время работы центрифуги — как обычные, так и угловые — немного нагреваются для некоторых определений, а также в препаративной технике это может быть очень невыгодно. В этих случаях следует употреблять центрифуги с охлаждением, позволяющие производить центрифугирование при низких температурах. [c.70]

Аминокислоты определялись количественно методом бумажной хро1матопрафии по методу Ray (И), модифицированному та(ми. 30% гомогенат из грудных отделов здоровых и отравленных насекомых приготавливался в стеклянном лабораторном гомогенизаторе с фторопластовым пестиком измельчением мышечной ткани в 60% этаноле в течение 2 минут при 3000 об/мин. для саранчи и 5000 об/мин для свекловичного долгоносика. Надосадочная жидкость отделялась центрифугированием. Коагуляция белка производилась на кипящей водяной бане, свернувшийся белок отделялся на центрифуге с охлаждением. [c.24]

IO М ЭДТА. Гомогенат фильтровали через один слой фланели с последующим отжиманием и центрифугировали 10 мин. при 1500 об/мин на центрифуге с охлаждением при 0°. Осадок, состоящий из лейкопластов, ядер, обрывков плазмы, отбрасывали. Надосадочную жидкость центрифугировали 20 мин. при 18 000 об/мин. Осадок митохондрий ресуспендировали в стеклянном гомогенизаторе с 0,5 М сахарозой, приготовленной на 0,02 М трис-буфере без ЭДТА. Чистоту фракции контролировали микроскопически. Как правило, фракция митохондрий не содержала других клеточных компонентов. [c.201]

Суспензию 300 г обезжиренной муки anavalia ensiformis в 1,5 л 0,15 М раствора хлористого натрия перемешивают примерно 12 ч на магнитной мешалке при --5°С, после чего фильтруют через марлю. Остаток повторно экстрагируют таким же объемом 0,15 М раствора хлористого натрия в тех же условиях. Объединенные фильтраты после двух экстракций центрифугируют при 9500 об/мин (14 600 g ) на центрифуге с охлаждением в течение 30 мин. Осадок отбрасывают. [c.91]

При работе с большими объемами культуральной среды используют проточное центрифугирование (сепараторные центрифуги). Центрифуги с охлаждением фирмы DuPont — Sorval оборудованы специальным ротором и системой подачи среды для работы в проточном режиме. Этот метод пригоден для выделения большинства бактерий, кроме хлопьеобразующих видов и грибов, обычно забивающих пути подачи среды. [c.430]

Настольные центрифуги с охлаждением и бакет-ротором (например, Sorval). [c.344]

Осаждают неочищенный препарат хлоропластов центрифугированием (настольная центрифуга с охлаждением типа Sorval с бакет-ротором) при 3000 об/мин и 2°С в течение [c.345]

Гомогенат снова помещают в центрифужную пробирку и центрифугируют в центрифуге с охлаждением при 2000 об/мин для удаления ядер. Мутный супернатант собирают и добавляют к нему сухую сахарозу до конечной концентрации 40% (вес/ /объем). После этого суспензию помещают в пробирку для ультрацентрифуги на 37 мл [проби man) или для аналогичного ротора [c.151]

Для получения лейкоцитов 9 мл венозной крови смешивают с 1 мл 6% раствора ЭДТА (pH 7,0) и оставляют на ночь в холодильнике. Плаз му полностью отсасывают с поверхности эритроцитарной маосы и центрифугируют 15—20 мин в центрифуге с охлаждением при 300—600 g (малый ротор ЦЛР). Плазму удаляют, а осадок лейкоцитов гомогенизируют в 1 мл Н2О. Лейкоциты разрушают 4-кратным замораживанием и оттаива-ни 1М или добавлением тритона Х-100 в конечной концентрации 0,2%. Полученный после центрифугирования экстр1акт лейкоцитов используют в качестве ферментного претарата. [c.133]

Появление в лабораториях эффективных центрифуг с охлаждением дало возможность использовать более чистый и совершенный по сравнению с фильтрацией способ отделения белковых и других осадков, особенно при работе с малыми объемами. Однако бывают случаи, когда фильтрация предпочтительнее. При провйдении крупномасштабной работы центрифугирование больших объемов может потребовать применения нестандартного оборудования, например проточной насадки (адаптера) (рис. 1.1) во всяком случае, этот процесс может быть таким же длительным, как и фильтрация. С другой стороны, большинство биологических материалов дают обильные и рыхлые осадки, которые быстро закупоривают фильтры, так что вскоре после начала фильтрации скорость потока резко уменьшается и фильтрация почти прекращается даже при отсасывании. В этой ситуации необходимо заменить фильтрующий материал. В производственных условиях можно использовать специальные жесткие фильтры с автоматическим соскабливающим устройством для удаления слизистого осадка по мере его накопления, но такие системы обычно не применяются в лаборатории. [c.13]

Смотреть страницы где упоминается термин Центрифуги с охлаждением: [c.167] [c.395] [c.59] [c.191] [c.191] [c.27] [c.47] [c.55] [c.58] [c.60] [c.156] [c.9] [c.161] [c.168] [c.67] [c.44] [c.63] [c.255] [c.266] [c.245] [c.23]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология