Отделение белкового экстракта

Обычно для получения стрептомицина применяются сложные питательные среды, содержащие соевую муку, кукурузный экстракт, глюкозу, мел, жиры (N1 4)2804, Na l, КН2РО4. Процесс ферментации стрептомицина принципиально не отличается от ферментации большинства других антибиотиков. В отличие от ферментации пенициллина здесь расходуется меньшее количества воздуха для аэрации и время процесса биосинтеза не так продолжительно. Отделение мицелия из культуральной жидкости происходит с большим трудом, поэтому для получения нативного раствора, перед фильтрацией культуральную жидкость подкисляют серной кислотой, а также добавляют щавелевую кислоту. Это позволяет скоагулировать белковые вещества, ми- [c.476]

Современные представления о ферментах как о белковых веществах — катализаторах — сложились в результате многочисленных исследований, проведенных в течение полутора столетий. Первое нполие научное описание действия фермента было дано и 814 г. Кирхгофом, которому удалось показать, что водные вытяжки нз солода способны при обычной температуре расщеплять крахмал с образованием сахара и декстрина. Через десять лет после открытия Кирхгофа был обнаружен новый фермент в горьком миндале (эмульсин), способствующий гидролизу амигдалина, и описано действие известных уже в то время ферментов — амилазы слюны н пепсина желудочного сока. В 1833 г. Пайен и Персо провели исследования, сыгравщие важную роль в деле дальнейшего изучения ферментов. Из полученных экстрактов солода, обладающих способностью расщеплять крахмал с образованием сахара, им удалось осаждением спиртом получить осадок, который, подобно экстракту, вызывал расщепление крахмала. Осадок этот не представлял собою фермент (амилазу) в чистом виде, однако сам факт отделения фермента солода от многих сопутствующих ему веществ произвел в то время большое впечатление. Он указывал на материальную основу ферментов и находился [c.167]

Эти основания мышечной ткани, в особенности карнозин, являются гормонами. При введении их в организм происходит повышение отделения желудочного и кишечного пищеварительного сока. И. П. Павловым впервые было показано, что в мясном экстракте должны находиться вещества, активирующие работу желез желудка. В. С. Гулевич и его школа определили химическую природу этих веществ, что имеет чрезвычайно большое значение. Но, помимо химической природы карнозина, надо знать и его структуру, что представляло немало затруднений. В. С. доказал, что в строение карнозина входит гистидин и 3-аланин взаимодействуя между собой они и образуют дипептид, единственный в своем роде, в состав которого входит не одна из а-аминокислот, представляющих обычные продукты распада белковых тел, а р-аминопропионовая кислота. В. С. высказал соображения, что карнозин представляет дипептид р-алапилгистидин, что вскоре подтвердилось Бауманом и Ингвальдсеном, которые произвели синтез карнозина. В лаборатории В. С., далее, показано было, что карнозин является стойким телом, способным к ферментативному распаду только под влиянием эрепсина кишечного сока, который расщепляет его, как и следовало ожидать, на гистидин и р-аланин. [c.517]

Отделение белкового экстракта [c.433]

Для многих видов растительного сырья (горох, конские бобы, рапс, подсолнечник, соя и др.) запатентован технологический процесс [180], предусматривающий перевод белков в растворимое состояние с помощью солей, затем регенерацию белковых мицелл путем уменьшения ионной силы. Экстрагирование ведется в присутствии раствора хлористого натрия (0,4 М или 0,5 М) при соотнощении растворителя и муки по массе в пределах (10 -г 25) 1. После отделения экстракта ионную силу снижают разбавлением водой [соотношение добавляемой воды и экстракта варьирует в пределах (3- 10) 1] или диализом в аппаратах, снабженных полупроницаемыми мембранами. Белки осаждаются в форме мицелл изоляты очень хорошо очищаются, как показано в таблице 9.34, в концентрате конских бобов, полученном сухим способом. [c.474]

Во многие схемы очистки рестриктаз вводится стадия высаливания белков сернокислым аммонием. С применением этой процедуры решаются многие задачи очистка, концентрирование разбавленных растворов, отделение рестриктаз от СС и ПЭИ. Так Муррей с соавт, [188] подобрали условия эксперимента, позволяющие разделить на этой стадии рестриктазы Ava I и Ava П, выделяемые из одной биомассы, которые переходили в осадок при 20—40% и 50—70% насыщении бесклеточного экстракта А. variabilis сернокислым аммонием соответственно. Примером другого варианта фракционирования высаливанием является работа Модрича и Забелы [184], где была использована экстракция белкового осадка, полученного при 70% насыщении грубого экстракта Е. соИ RY13 солью, растворами со ступенчато понижающейся концентрацией сернокислого аммония. В результате проведения такой процедуры удалось повысить удельную активность целевого фермента в 2,7 раза. Фракционное высаливание белков нашло применение в схемах очистки многих рестриктаз [74, 98, 115, 118, 140, 142, 152, 173, 235, 247, 248, 296 и др.]. [c.154]

Крахмало-паточная промышленность 1) выделение кукурузного, пшеничного, рисового и т. п. крахмала 2) из крахмального молочка 3) сгущение глютена 4) осаждение картофельного крахмала 5) выделение белков крахмала из пшеничного экстракта 6) выделение жирных шламов из паточных сиропов 7) осветление паточного сиропа 8) осветление глюкозного сиропа 9) очистка и осветление кукурузного масла 10) выделение белковых веществ из соковых вод 11) отделение мелкой мезги 12) очистка сточных вод крахмало-паточных заводов. [c.7]

Оптические свойства хлорофилла в ацетоновом экстракте изменяются по сравнению с его нативной формой. Эти изменения связаны с нарушением целостности хлорофилл-белково-липоид-ного комплекса тилакоидов. Отделенный от хлоропласта и протеина мембран при экстрагировании Хл а характеризуется двумя максимумами поглощения, расположенными в красной и синей областях спектра около 663-665 и 430 нм. У дополнительных хлорофиллов пики несколько смещены в адсорбционном окне у Хл fe они соответствуют длинам волн 643 и 435 нм, у Хл с- 630 нм. [c.8]

Эта методика не дала удовлетворительного выделения пестицидов из пробы, поэтому через год Р. А. Mills (1961) опубликовал модифицированную методику, позволяющую полнее извлекать пестициды. Она была опробована в США, получила положительные отзывы и стала официальным методом определения пестицидов в молоке и молочных продуктах. В отличие от первого варианта пестициды экстрагировали не тройным, а одинарным объемом смеси 1 1 серного и петролейного эфиров. Полнота отделения эфирного экстракта обеспечивалась центрифугированием. В результате практически полностью извлекали хлорорганические пестициды и 93— 95% жира. Ценность этой методики определяется тем, что она легла в основу нового методического подхода к анализу пестицидов — созданию условий для полного выделения их из проб молока путем коагуляции белков, приводящей к разрыву оболочек жировых шариков и дающей возможность отделить белковую часть молока отстаиванием, фильтрованием или центрифугированием. Немаловажно использование в качестве добавки оксалата калия, который гидрофилизирует белковый сгусток, [c.192]

Изучая образование стойких эмульсий при извлечении хлороформом сока или водного экстракта клубнелуковиц, мы обратили внимание, что при разделении эцульсии в стаканах отстойной центрифуги получалось трж слоя водный и хлороформный, а между ними располагалось слизистое пастообразное сероватое вещество, как выяснилось, содержащее белок. Ш цредположили, что белок коагулируется при обработке сока растворителем. Для устранения эцульсии к соку добавили сульфат аммония до полноты осаждения. Фильтрат после отделения осадка при обработке хлороформом не давал эцульсии, но и содержание алкалоидов в нем оказалось ничтожным. Из белкового осадка выделены колхицин и колхамин приблизительно в таких же количествах, как при обычной обработке сока. Оба метода выделения проверены и сопоставлены на свежих и высушенных клубнелуковицах. Выходы алкалоидов даны в таблице 1 Очевидно таким путем мож- [c.151]

Наиболее полная экстракция пестицидов была достигнута при добавлении к молоку четырехкратного объема ацетона. При таком соотношении объемов ацетона и пробы происходит полная коагуляция белков вследствие дегидратации молекул (D. Peter, 1960). Поэтому можно заключить, что для полного выделения пестицидов из молока без центрифугирования пробы путем однократной экстракции необходимо полностью коагулировать белки. Дегидратация белковых молекул дает и другое преимущество — экстракт быстро отделяется при добавлении неполярного растворителя, однако образовавшийся осадок имеет грубую структуру, что препятствует отделению пестицидов. Для гидрофилизации сгустка в молоко необходимо добавлять оксалаты, а для ускорения отделения экстракта — хлорид натрия, растворы которого обладают большой ионной силой. [c.191]

Растворимость сульфата аммония очень мало меняется в области температур от О до 30°С концентрация насыщенного раствора в воде составляет приблизительно 4 М. Плотность этого насыщенного раствора равна 1,235 г-см з, а плотность белкового агрегата в таком растворе—1,29 г-см- (разд. 1.2). Раствор 3 М фосфата калия при pH 7,4 имеет плотность 1,33 г-см Так как белковый осадок в этом растворе обладает такой же плотностью, его невозможно отделить центрифугиро- ванием. Однако отделение осадка можно осуществить с помощью фильтрации или же путем адсорбции на амфифильном носителе, например агарозе (разд. 4.8). Осаждение белков 3—4 М сульфатом аммония иногда также может быть затруднено из-за избыточной плотности, создаваемой присутствием в грубых экстрактах других солей и компонентов. [c.67]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология