Лоури реактивы

Способностью восстанавливать реактив Фолина в синее соединение обладает не только свободный тирозин, но и белок. Можно было бы ожидать, что интенсивность окраски, возникающей при взаимодействии реактива Фолина с белком, пропорциональна содержанию в белке тирозина и цис-теина. В действительности, оказалось, что если белок обработать предварительно солями меди, то даваемая им с реактивом Фолина окраска намного превышает ту, которую могли бы дать только названные аминокислоты. Считают, что в составе белковой молекулы, образовавшей медный комплекс, с реактивом Фолина взаимодействуют также и другие аминокислоты, а поэтому интенсивность возникающего окрашивания в известной мере пропорциональна содержанию белка. Лоури и сотрудники использовали этот принцип для количественного определения белка. [c.45]

Метод Лоури и сотр. [120], в котором используется фенольный реактив Фолина с предварительной обработкой белка щелочным раствором медных солей, очень широко применялся для определения белков вообще, а также и для гликонротеинов [121, 122]. Методика проста, в гидролизе нет необходимости, чувствительность реакции высока. Однако серьезный недоста- [c.150]

Реактив Фолина для определения белка по Лоури [c.212]

Метьюз [1253] очищал дихлорметан, промывая его водой и раствором карбоната натрия, осУшая над хлористым кальцием и подвергая фракционированной перегонке. С целью получения препарата для измерений диэлектрической постоянной, Морган и Лоури [1331] многократно фракционировали продажный препарат, до тех пор пока удельная электропроводность средней фракции не становилась неизменной. Мариотт, Хоббс и Гросс [1242] промывали продажный реактив сначала концентрированной серной кислотой, затем разбавленным раствором едкого натра и, наконец, водой. Промытый дихлорметан оставляли стоять в течение ночи над едким натром и хлористым кальцием, после чего подвергали фракционированной перегонке на колонке Вид-мера высотой 60 см. Температура кипения составляла 39,93—40,12°, а показатель преломления пН был равен 1,4249. [c.389]

Колориметрия растворимых белков по методу Лоури проводится следующим образом. 1 мл раствора белка смешивают с 5 мл реактива В и оставляют стоять при комнатной температуре в течение 10 мин. Затем быстро прибавляют 0,5 мл раствора Г и интенсивно перемешивают (в течение 1—2 с). Спустя 30 мин измеряют величину экстинкции при 500 нм (если концентрация белка достаточно высока) или при 750 нм (в случае низкой концентрации белка). В качестве стандарта используют растворы сывороточного альбумина быка или человека в концентрации 0,02—0,5 мг/мл. Реактив В готовят, смешивая 50 мл раствора А (2%-ный раствор углекислого натрия в 0,1 н. гидроокиси натрия) и 1 мл раствора Б (0,5%-ный раствор Си504Х Х5НгО в 1%-ном цитрате натрия или 1%-ном тартрате калия). Реактив Г представляет собой разведенный до конечной концентрации кислоты реактив Фолина—Чокальто. [c.455]

Удобный метод приготовления окрашенных растворов для колориметрирования разработали Брюэль, Холтер, Линдерштром-Ланг и Розитс [9]. Для проведения всех необходимых операций применяют небольшой блок из парафина или тефлона. На поверхность блока наносят в виде отдельных капелек различные реактивы, требуемые для проведения колориметрической реакции, в том числе каплю воды. Объем капли воды должен быть таким, чтобы общий объем раствора для колориметрирования составлял несколько меньше 50 X. Раствор, содержащий анализируемое вещество, объем которого измеряют самозаполняющейся пипеткой, вводят внутрь капли воды. Раствор с анализируемым веществом и реактивы собирают и перемешивают в требуемом соотношении с помощью пипетки емкостью 50 X. Перемешивание производят, наполняя пипетку и опорожняя ее на поверхность парафинового блока. После того как добавлен последний реактив и полученный раствор перемешан, наполняют пипетку до метки, втягивая в нее воду из отдельной капли, нанесенной на поверхность парафинового блока. Точно установив объем, проводят окончательное перемешивание, выдавливая несколько раз смесь, содержащуюся в пипетке, на свежую парафиновую поверхность и снова втягивая в пипетку. Затем пипетку можно использовать или для заполнения капиллярной кюветы диаметром 1 жж,или же для того, чтобы ввести раствор в кювету Лоури и Бесси. [c.304]

Фолина — Чокальтеу фенольный реактив (для реакции Фолина— Лоури). [c.163]

Материалы 1. Реактивы, необходимые для определения концентрации белка по методу Лоури (Лоури и сотр., 1951) см. 3.10. Реактив А 2 %-й раствор карбоната натрия в 0,1 и. растворе едкого натра. Реактив Б 0,5 %-й раствор Си504-5Н20 в 1 %-м растворе тартрата натрия. Реактив Фалина, который перед опытом разбавляют в два раза до содержания кислоты, равного 1 н., что проверяют титрованием щелочью по фенолфталеину. Непосредственно перед проведением определения приготовленный раствор разводят еще в два раза. [c.155]