Фолина реакция

Метод основан на образовании окрашенных продуктов ароматических аминокислот с реактивом Фолина в сочетании с биуретовой реакцией на пептидные связи. Метод характеризуется высокой чувствительностью (10—100 мкг белка в пробе). На развитие окраски влияет большое количество веществ компоненты буферных систем (трис-буфер в концентрации 0,2 мМ, глицилглицин), восстановители (цистеин, дити-отреитол в концентрации 0,01—0,4 мМ, аскорбиновая кислота), комп-лексоны (ЭДТА в концентрации 0,5 мМ), детергенты (тритон Х-100 в концентрации 0,1—0,2% вызывает выпадение осадка), сернокислый аммоний в концентрации 0,15%, сахароза в концентрации 10% и др. [c.81]

РЕАКЦИЯ МИЛЛОН-ФОЛИНА [231, 232, 233] [c.123]

Реакция Лоури. Это одна из наиболее чувствительных реакций (Ш белки. 1и дают циклические аминокислоты. Реагируя с реактивом Фолина, они образуют комплексы, окрашенные в синий цвет. Интенсивность окраски зависит от концентрации белков, поэтому реакции Лоури может бы1ъ использована и для количественного определения. [c.9]

При нуклеофильном замещении в субстрате, имеющем соседнюю группу у смежного атома углерода, возможна миграция, если циклическое промежуточное соединение открывается с противоположной стороны. В приводимом примере (МН2 = мор-фолин) [191] реакция протекает следующим образом [c.152]

Фотоколориметрические — на реакциях с солями окис ного еза, фосфорновольфрамовой кислотой, с реактивом Фолина — иса и др. [c.120]

По оси ординат — поглощение после реакции Фолина -Лоури [29]. [c.147]

Балинт [45] при определении тирозина пользуется светофильтром 500, а при определении триптофана — фильтром 720. Автор употребляет относительно меньшее количество реактива Фолина и доводит конечный объем раствора до 20 мл. Содержание тирозина составляет от 0,2 до 2,0 мг, содержание триптофана 0,1—0,4 мг. Состав и реакции фосфорновольфрамовой и фосфорномолибденовой кислот были критически разобраны Вью [693]. [c.126]

Растворители типа аминов - аммиак, этилендиамин и гексаметилфосфо-рамид - представляют особый интерес, так как в этих средах возможно образование в значительных количествах сольватированных электронов. Эти соединения чрезвычайно устойчивы к восстановлению, хотя не всегда удобны для проведения окислительных реакций. Некоторые реакции, например восстановление бензола, которые нельзя проводить в других растворителях, успешно протекают в растворах электрохимически генерированных электронов. Этилендиамин и гексаметилфосфорамид находятся в жидком состоянии в более удобной области температур, чем аммиак в других отношениях свойства этих растворителей весьма схожи. В последующее рассмотрение включен также мор-фолин. Хотя в литературе отсутствуют четкие данные, все же можно предположить, что и морфолин образует растворы сольватированных электронов. По [c.22]

Концентрацию пептидов можно определять методом Фолина—Лоури, в основе которого лежит реакция пептида с тарт-ратом меди в щелочной среде. Образующийся комплекс восстанавливает фосфовольфрамат с образованием синего соединения с Атах при 750 нм (гл. 35). Метод в основном применяют для определения белков в растворе. [c.395]

Реакции для определения степени чистоты препарата разработал Фолин позднее их усовершенствовал Даниельсон . При непосредственном сравнении обоих препаратов различие в степени чистоты не обнаруживается. [c.72]

Фолиевая кислота 1/484, 751, 752. 1210 2/426 3/470 4/235, 901. 1095, 1096 5/214-2)6, 449,. 591 Фолина реактив 1/742 5/217 реакция 5/217 3/796 Фолина-Дениса реакция 3/7)0 Фолина-Чиокалтеу реактив 5/217 Фолнои 5/217 2/237 [c.736]

Шанц [7] описал получение фенилуксусной-2- кислоты из ацетофенона-1- по реакции Киндлера — Вильгеродта (мор-фолин) с последующим щелочным гидролизом образующегося тиоморфолида. Декарбоксилирование над железными опилками при температуре 250° приводит к образованию неизотопной двуокиси углерода. Даубен [6] оппсал аналогичный способ получения С -соединения. [c.587]

Для количественного определения суммы биологически активных веществ ротокана нами предложен спектрофотометрический метод, который основан на реакции окисления фосфорно - молибденовой кислотой (реактив Фолина) в слабощелочной среде. Предлагаемая методика заключается в проведении цветной реакции комнлексообразова-ния с суммой фенольных соединений агликонов, полученных после гидролиза соединений препарата. Полученные соединения имеют характеристический максимум поглощения в длинноволновой области спектра. [c.45]

Метод основан на образовании окрашенных продуктов ароматических аминокислот и цистеина с реактивом Фолина в сочетании с биуретовой реакцией на пептидные связи. [c.31]

Некоторые другие примеры применения этого общего подхода иллюстрируют схемы (84) — (88). Использование диацетиленов (схема 86) [173] родственно биогенезу природных тиофенов [173] оно протекает гладко также при замене одного ацетиленового фрагмента эпоксидной функцией. Значительный интерес представляет превращенне адипиновой кислоты в дихлорангидрид тиофендикар-боновой-2,5 кислоты (схема 87) [174] взаимодействие серы и мор-фолина (в условиях реакцин Вильгеродта) с алкиларилкетонами (схема 88) [175] напоминает реакцию Гевальда (см. разд. 19.1.14.3). Классическая реакцня Бенари имеет множество вариантов н ва к-на для синтеза некоторых гидрокситиофенов [176]. [c.281]

Ганчарчик [17] применял цветную реакцию с фосфорновольфрамовой — фосфорномолибденовой кислотами, разработанную Фолином и Денисом (см. Брауне, 1952, стр. 171) для определения лигносульфоновой кислоты в растворах. Образец 25 мл отработанного щелока смешивался с 2 мл раствора Фолин-Дениса и оптические коэффициенты погасания определялись фотометром Пульфрича, после чего определялась концентрация лигносульфонатов. [c.75]

Цветная реакция зависит не только от содержания тирозина и триптофана в данном белке, но и от присутствия SH- и других восстанавливающих групп, а также от времени, в течение которого белок содержался в щелочной среде до прибавления реактива Фолина—Чиокальтеу. [c.68]

В основе метода лежит реакция цистина с сульфитом, в результате которой образуются цистеин и цистеин-5-сульфонат. В присутствии реактива Фолина цистеин вновь окисляется в цистин, а восстановление реактива приводит к развитию синей окраски [13—16]. Далее приведена модифицированная методика Спекмена и Стайна [17]. Для проведения реакции необходимо подготовить четыре реагента [c.395]

В основе чувствительного колориметрического метода определения белков в элюатах лежит биуретовая реакция, а также реакция с фенольным реактивом Фолина—Чокальто [77] в модификации Лоури [78]. Таким путем определяют белок в кон- [c.454]

Сошедший с колонки элюат можно анализировать любым подходящим методом. Вещества, содержащие ароматические кольца (полистиролы, белки, нуклеиновые кислоты), можно оценить количественно не только с помощью уже описанных автоматических регистрирующих устройств, но также и путем прямого измерения отдельных фракций на спектрофотометре. Для всех твердых веществ вполне приемлем разработанный Крэйгом [63] метод анализа по сухому остатку, который заключается в том, что аликвотную часть элюата упаривают в полусферических чашечках и затем взвешивают остаток. Многие соединения удается анализировать с помощью специфических цветных реакций. Для белков, например, цветная реакция Фолина — Лоури оказывается более чувствительной, чем прямое измерение поглощения в ультрафиолете. Эту реакцию можно проводить непрерывно на автоматическом анализаторе [45]. Еще более чувствительный метод основан на образовании биурето-вого комплекса с избытком радиоактивной меди. (Этот метод позволяет обнаружить белок [c.79]

Определение фенола [149, 150]. Смешивают 25 мл исследуемого раствора, содержащего 0,005—5 мг фенола, с 5 мл реактива Фолина, добавляют 15 мл 20%-ного раствора ЫагСОз и разбавляют теплой водой (30—-35 С) до объема 50 мл. Через 20 мин оптическую плотность синего раствора нзмс.ряют при 680 нм. При комнатной температуре реакция протекает )чень медленно в этом случае фотометрировать можно только сп стя суткм после введения реактивов. [c.250]

Для определения содержания белка в растворах широко используются фотометрические методы анализа [1, 2]. В ряде случаев возможно определение белка по собственному поглощению при длинах волн 220 и 280 нм [1]. Более селективным является фотометриро вание окрашенных комплексов белка, полученных по различным реакциям ксантопротеиновой, биуретовой и реакции Лоури [2, 3]. Среди них наиболее специфичной и чувствительной является реакция Лоури, в которой белок вступает во взаимодействие с реактивом Фолина [4] в сочетании с биуретовой реакцией. Именно сочетание этих двух фотометрических реа1кций (реакция на пептидные связи и на обязательные ароматические аминокислоты белка) делает метод высокочувствительным и избирательным, т. е. позволяет его использовать для определения белка в сложных смесях. По данным [5], метод Лоури чувствительнее метода, основанного на биуретовой реакции, в 100 раз, а в сравнении с методом определения по собственному поглощению — в 10—20 раз. [c.37]

Эта реакция характерна не только для кетонов, но также для альдегидов, спиртов, олефинов и ацетиленов. При нагревании стирола с серой и мор-фолином образуется фенилтиоацетоморфолид. В результате гидролиза мор-фолид превращается в фенилуксусную кислоту общий выход 84%. [c.216]

Реакция этого типа применяется для промышленного производства хлороформа, бромоформа и йодоформа, при этом сырьем служат спирт или ацетон. Если использовать спирт, то в качестве промежуточных продуктов предполагается образование хлораля, бромаля и иодаля. Известно, что хлораль и бромаль расщепляются щелочью. Иодаль же до сих пор еще не получен. При нагревании хлораля с морфолином в изопропиловом спирте происходит аммонолиз и с выходом 92% образуется Н-формилмор-фолин [34] [c.315]

Истори.ч вопроса. В 1922 г. Фолин и Люней [231] использовали реактив Дениже-Гопкинса — сернокислую ртуть —для отделения триптофана в белковом гидролизате от других аминокислот. В фильтрате определялся тирозин по реакции Миллон-Нассе [456, 472]. В осадке определялось содержание триптофана. Для этого пользовались его способностью восстанавливать фосфорномолибденовую кислоту [231] в щелочной среде. В дальнейшем для этого употреблялась смесь фосфорновольфрамовой и фосфорномолибденовой кислот [232]. [c.123]

Примечание. Было предложено очень большое число незначительных видопзменений к методу Миллон-Фолина. Все они дают удовлетворительные результаты, а некоторые значительна улучшают основной метод Фолина. В отличие от очень чувствительных альдегидных методов определения триптофана в методе Миллон-Нассе для тирозина и в методе Фолина со смесью фосфорномолибденовой и фосфорновольфрамовой кислот для триптофана можно без заметного ущерба изменять условия проведения реакции. [c.126]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология