Ведущий электролит

Микрообъем анализируемого раствора ( 2 нл) вводится в кварцевый капилляр, предварительно заполненный электролитом, обладающим буферными свойствами (ведущий электролит). После подачи высокого напряжения (до 30 кВ) к концам капилляра компоненты смеси начинают двигаться с разной скоростью, зависящей от их заряда и массы, достигая в разное время зоны детектирования. [c.344]

Ведущий электролит всегда содержит буфер, поскольку pH — важный параметр в электрофорезе. Величина pH ведущего электролита определяет как скорость течения жидкости в капилляре (ЭОП), так и форму нахождения компонента в растворе. Чувствительность ЭОП к изменению pH раствора регламентирует использование ведущих электролитов с высокой буферной емкостью, при этом диапазон pH, как правило, имеет значения рк 1 [71]. Благодаря высокой стабильности кварцевого капилляра при электрофоретическом разделении можно использовать буферные системы от 2 до 12 ед. pH. При анализе кислот наиболее часто используют боратный буфер (pH = 9,3), оснований — фосфатный (pH = 2,5). Эти буферные системы имеют высокую буферную емкость и низкое поглощение в УФ-излучении. Если основания не растворяются в фосфатном буфере, используется ацетатный (pH = 4,8). В табл. 4.2.2 представлены наиболее распространенные буферные системы, используемые в КЭ. [c.346]

Добавки ПАВ в ведущий электролит влияют не только на поведение зоны пробы в капилляре, но и на стенки самого капилляра, модифицируя ЭОП (уменьшая, увеличивая или обращая) [42]. При концентрации ПАВ в растворе электролита больше ККМ реализуется вариант мицеллярной электрокинетической хроматографии (см. далее) и принцип разделения на основе распределения компонентов пробы между гидрофильной (водной) и гидрофобной (мицеллярной) фазами. [c.347]

Между логарифмом фактора удерживания аналита и логарифмом концентрации мицелл в ведущем электролите — линейное соотношение [c.357]

Фактор удерживания зависит от концентрации мицелл в ведущем электролите [c.358]

Система 2 [1116]. Ведущий электролит 0,03 М ацетат — 0,011 М трис,(pH 4,5). Замыкающий электролит р-аланин, pH [c.177]

Если описанные до сих пор электрофоретические способы разделения в капиллярах соответствовали элюентной хроматографии (прерывистый ввод проб, постоянный состав элюента, различные скорости движения компонентов пробы), то метод ИТФ соответствует вы-теснительной хроматографии. В обоих случаях все компоненты пробы движутся с одинаковой скоростью. ИТФ описан много лет назад и проводился тогда в основном в тефлоновых трубках. Однако из-за проблем выбора конкретных электролитов и ограничений в выборе детекторов (применимы только детекторы по электропроводности) этот метод было невозможно использовать в качестве точного аналитического метода. В случае ИТФ проба вводится между двумя электролитами с различными подвижностями ионов, выбранными так, чтобы они ограничивали подвижности компонентов пробы. Обычно ведущий электролит обладает наивысшей, а конечный электролит -наиболее низкой подвижностью из всех движущихся ионов. После достижения стационарного состояния все одинаково заряженные ионы движутся с одинаковыми скоростями. На рис. 106 это показано схематически. В каждой зоне при ИТФ имеется своя напряженность поля. Внутри каждой зоны напряженность поля постоянна, изменения происходят скачком на границах зон. [c.108]

Использование макроциклических реагентов (краун-эфиров, макроциклических антибиотиков (рис. 4.2.5), ка-ликсаренов, циклодекстринов и т.д.) как добавок в ведущий электролит (табл. 4.2.4-4.2.6) позволяет управлять селективностью разделения сложных смесей органических и неорганических соединений, в первую очередь, за счет уникальной способности макроциклов образовывать комплексы включения с анализируемыми веществами по типу гость - хозяин [93-98]. В образующихся комплексах хозяином выстуттает макроциклический реагент, а гостем — аналит. В зависимости от своего строения макроциклы могут связывать молекулярные, катионные или анионные субстраты. Многие из них используются в качестве хиральных селекторов. Типичные концентрации добавляемых в ведущий электролит циклодекстринов (ЦД), используемых для хиральных и ахиральных разделений, — от 1 до 20 мМ в 20-50 мМ боратном (pH = 9,3) или фосфатном (рП = 2,5) буферах [99]. [c.347]

Скорость миграции аналитов в МЭКХ зависит от концентрации ПАВ в мицеллосодержащем рабочем электролите Спав, который контролирует концентрацию мицелл в ведущем электролите с иц. (смш= спаб - ККМ). [c.357]

Различия в электропроводности пробы и ведущего электролита. Уширение пика, обусловленное электрофоретическими эффектами, пропорционально проводимости (и ионной силе) раствора образца относительно буфера. В случае высокой концентрации образца сила электрического поля (и, следовательно, линейные скорости) в зоне образца много ниже, чем в ведущем электролите. Благодаря этому происходит разбавление образца дес-тэкинг) — уширение. Обратная ситуация в соотношении проводимостей (стэкинг), наоборот, приводит к узким пикам на электрофореграмме [175]. [c.359]

Когда матрица образца имеет значительно более низкую проводимость (обычно за счет разбавления буфером или другим растворителем), чем ведущий электролит, в зоне образца возникает относительно высокое электрическое поле. Аналиты внутри зоны образца движутся с более высокой локальной скоростью и, замедляясь на границе с зоной ведущего электролита, концентрируются. Стэкинг образца применителен к заряженным и нейтральным ана-литам [109, ПО]. В [111] сообщается о подобной технике фокусирования для мицеллярного КЭ. Матрица образца, наоборот, в этом случае имеет более высокое содержание солей (большую проводимость), чем ведущий электролит. Использование стэкинга позволяет приблизить чувствительность метода КЭ к ВЭЖХ. [c.360]

А — сигнал детектора по электропроводности (проводимость уменьшается в направлении стрелки а) Б — сигнал УФ-детектора (поглощение увеличивается в направлении стрелки б) В — запись производной сигнала детектора по электропроводности (сдвиг по временной оси) длина зон в направлении временной оси служит мерой количества вещества оси а н б характеризуют природу ионов. Зоны анионов / — хлорида, 2 — сульфата, 3 — хлората, 4—хромата, 5 — малоната, 6 — пиразол-3,5-дикарбоксилата, 7 — адипи-ната, 8 — ацетата, 9 — ллорпропионага, 10—фенилацетата звездочкой показан неиден тифицированная зона. Ведущий электролит 0,01 М НС1 — гистидин, pH 6,0 замыкаю-щий электролит 0,01 М фенилуксусная кислота. [c.315]

Рис. 14.30. Изотахофореграмма одновременного разделения смеси лантаноидов I5 ] (с разрешения автора), а — градиент потенциала, б — дифференциальный градиент. Ведущий электролит 0,027 М КОН, 0.015М 2-оксиизомасляная кислота, уксусная кислота и 0,00250%-ный поливиниловый. спирт, pH 4,92 ток миграции 225 мкА скорость перемещения диаграммы 40 мм/мин образец 5,0 мкл 10- М раствора смеси лантаноидов, 1 — К+, 2 — Ыа+, 3 — аМ-, 4 — СеЧ-, 5-РгН, 6 — ЫсР+. 7 —5тН, 8 - ЕиЧ-, 9-0(1 +, 10 - ТЬ +, II - Оу , 12 — НсН-, 13 — ЕгЧ, 14 — Тт +. 15 УР+, 16 — 1и +, 17 — ,-А1а.

Рис. 65. Изoтaxoфope гpaммa некоторых анионов [353], 1 — хлорид (ведущий электролит) 2 — сульфат 3 — хлорат 4 — хромат (УФ-поглощающий компонент) 5 — малонат 6 — пиразол-3,5-дикарбоксилат (УФ-поглощающий компонент) 7 — адипат 8 — ацетат 9 — Р-хлорпропионат 10 — фенилацетат (УФ-поглощающий компонент).

Система 1 [207]. Ведущий электролит 0,24 М буфер трис-фос-фат (pH 6,1). Замыкающий электролит 0,14 М буфер р-аланин — трис (pH 8). Состав геля 3,7% Т, 3,33% С, 0,5 мг% ри-бофлавина, 0,03 М трис-фосфатный буфер (pH 6,1), 80 мкл ТЕМЭД на 100 мл смеси, 3,1% сахарозы. Гели длиной 13 см формируют посредством фотополимеризации. Белок растворяют в замыкающем буфере и добавляют к нему 40%- Ный раствор амфолитов-носителей с ИЭТ 5—8 (35 мкл на каждые 10 мкл сыворотки). Изотахофорез проводят в течение 2 ч при поотояниой силе тока ( 2 мА на 1 гель). [c.177]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология