Сорбция ферментов сефадексом

Краузе и Коган после фракционирования экстракта белков пекарских дрожжей сернокислым аммонием пропускали раствор через колонку сефадекса 0-75 с последующей сорбцией гелем гидроокиси алюминия, а затем элюцией смогли повысить удельную активность малатдегидрогеназы почти в 20 раз, а дегидрогеназы а-аминомасляной кислоты в 14,5 раза (дегидрогеназы аминокислот — ферменты, катализирующие усвоение неорганического азота путем восстановительного аминирования кетокислот до соответствующих аминокислот). [c.84]

СОРБЦИЯ ФЕРМЕНТОВ СЕФАДЕКСОМ [c.95]

Нами исследована сорбция амилолитических ферментов сефадексами различных марок (G-25, G-50, G-75, G-100, G-200 и А-50), а также пектолитических ферментов из культуральной жидкости сефадексом А-50. [c.97]

Ионообменная хроматография целлобиогидролаз и целлобиаз протекает, как правило, с высокими выходами ферментов по активности (50-90%). Иная картина наблюдается при очистке эндоглюканаз в режиме сорбции фермента с последующей его элюцией путем увеличения ионной силы. Как уже отмечалось, для этого требуется нанесение фермента при pH 7-8,5, что наряду с длительностью процесса (особенно при использовании мягких носителей типа сефадекс) приводит к значительным, до 90%, потерям активности фермента. Выходом из этого положения является применение более жестких носителей на основе сферона, трисак-рила, методов ВЭЖХ. Как будет показано ниже, это позволяет значительно увеличить разрешающую способность методов при практически полном сохранении активности фермента за счет быстрого проведения процесса. [c.125]

Разработаны оптимальные условия и принципиальные технологические схемы сорбции амилазы из культуральной жидкости силикагелем в динамических и статических условиях. Приведен механизм сорбции ферментов ионитами. Показано, что сорбция может протекать за счет поверхностно-молекулярного взаимодействия без ионного обмена, а также за счет сил Ван-дер-Ваальса в сочетании с ионообменным процессом и путем так называемой сорбции высаливанием (силикагель, крахмал). Возможна также сорбция ферментов способом гель-фильтрации с одновременным взаимодействием с матрицей молекулярного сита (сефадекс А-50). [c.116]

Сорбциоииая очистка. В молекуле фермента имеются функциональные группы, сообщающие ей при соответствующих значениях pH среды кислотные или щелочные свойства. Поэтому белки обычно способны сорбироваться по ионообменному механизму. Для сорбции белков чаще всего применяют иониты на основе целлюлозы катионит — карбоксиметилцеллюлозу (КМЦ) и анионит — диэтиламиноэтилцеллюлозу (ДЭАЭ). В последнее время появилось множество высокоселективных ионитов, из которых можно выбрать наилучший для каждого конкретного случая термически обработанный крахмал, сефадексы на основе [c.131]

Основные успехи разделения биополимеров в гетерогенных системах достигнуты при использовании равновесия между раствором и твердой фазой. Одними из наиболее ранних приемов, сохранивших свое значение и до настоящего времени, являются методы осаждения и кристаллизации. Еще большее значение в настоящее время играют процессы сорбции и их динамическая модификация — процессы хроматографии. Одноактная сорбция белков на окислах металлов и других минеральных сорбентах служит для очистки белков и ферментов уже несколько десятилетий. К этим процессам присоединилась избирательная сорбция белков ионообменными смолами. Одним из наиболее значительных достижений современной физической химии в области фракционирования сложных смесей веществ, в частности белков, нуклеиновых кислот, полипептидов, аминокислот и нуклеотидов, явилась хроматография, особенно в виде ее ионообменной модификации и гельфильтрации на сефадексах. [c.7]

В данном случае число остатков о-дианизидина, связанных с белком, после хроматографии не изменяется, что свидетельствует об отсутствии неспецифической сорбции о-дианизидина на белке. Методом гель-хроматографии на сефадексе G-100 мы показали, что модифицированная о-дианизидином и ЕОР-карбодиимидом пероксидаза не содержит межмолекулярных сшивок, в то время как при использовании в качестве нуклеофилов других диаминов образовывалось до 20% димеров фермента. [c.115]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология