Равновесное ультрацентрифугирование растворов полимеров

РАВНОВЕСНОЕ УЛЬТРАЦЕНТРИФУГИРОВАНИЕ РАСТВОРОВ ПОЛИМЕРОВ [c.23]

ВЫХ оснований или нуклеотидов, полученных после расщепления полимера (подробнее — см. стр. 58). С нуклеотидным составом ДНК однозначно связаны два физических свойства двухцепочечных комплексов, которые часто используются для характеристики полученных препаратов 2 . 2в Одно из них — так называемая температура плавления Гщ — это температура, при которой происходит распад двухцепочечного комплекса на одноцепочечные молекулы этот процесс легко наблюдать по изменению УФ-поглощения или оптического вращения раствора (подробнее см. в гл. 4). Другая характерная константа ДНК — плавучая плотность р — может быть определена из результатов равновесного ультрацентрифугирования Такое центрифугирование проводят обычно в растворах солей, обладающих высокой плотностью чаще всего применяют хлорид или сульфат цезия. При длительном центрифугировании устанавливается градиент плотности раствора, а ДНК собирается в узкой зоне, где существует равновесие между центробежной силой и выталкивающей силой, которая определяется разностью плотности осаждаемого вещества и применяемого солевого раствора в данной зоне. Равновесное центрифугирование в градиенте плотности Сз С1 может служить не только аналитическим методом для характеристики препарата ДНК, но и полезным препаративным методом для разделения ДНК, различающихся по нуклеотидному составу. Подобным же образом препаративное ультрацентрифугирование в градиенте плотности сахарозы используется для разделения молекул ДНК, различающихся по скорости седиментации. [c.31]

Молекулярный вес образца может быть определен по одновременному измерению скорости седиментации в очень больших полях центробежной силы и коэффициента диффузии полимера в растворе. Ультрацентрифугирование нашло широкое применение при определении молекулярных весов таких компактных макромолекул, какими являются белки. Для статистических клубков применение метода скоростной седиментации осложняется тем, что при конечной концентрации раствора макромолекулы, перекры-ваясь, оказывают взаимное влияние друг на друга при седиментации. Это затрудняет интерпретацию экспериментальных данных. Средневесовой молекулярный вес полимеров, макромолекулы которых представляют собой статистические клубки, обычно определяют методами равновесного центрифугирования или методом Арчибальда. Однако для определения молекулярных весов кристаллических полиолефинов метод ультрацентрифугирования не применялся быстрый и удобный метод скоростной седиментации с успехом может быть применен для оценки молекулярно-весового распределения полиолефинов. [c.156]

Из всех методов определения молекулярных масс полимеров ультрацентрифугирование является, наверное, самым сложным. Вообще, использование центробежных сил для отделения частиц суспензии от жидкости давно и хорошо известно. С незапамятных времен крестьянки в своих домашних лабораториях отделяли масло от сьшоротки с помощью маслобоек, которые представляют собой не что иное, как примитивные центрифуги, В более усовершенствованном виде этот же прицип применяется на современных молокозаводах, где огромные массы молока центрифугируют для получения масла. Молекулы полимера в растворе под действием больших центробежных сил ведут себя подобно частицам масла и вьшадают в осадок. Скорость седиментации молекул полимера, оседающих под действием постоянной центробежной силы, связана с их молекулярной массой. На этом принципе основаны два метода определения молекулярной массы полимера. Это методы скоростной и равновесной седиментации. [c.318]