Янга тест

Дальнейшее развитие этого класса соединений связано с полимерными карбодиимидами. Вольман и сотр. [301] синтезировали полигексаметилен-карбодиимид -( Hj) -N =С= N-[( Hj)g-N —С= N] -( Hj)5-. Полимерная мочевина, получающаяся в результате реакции, легко удаляется. Ито и др. [302] предложили несимметричные карбодиимиды, N-атомы которых имеют различную электронную плотность, и поэтому при пептидном синтезе снижается нежелательная О — N-миграция ацильной группы, ведущая к N-ацилмочевине. При применении 1-бензил-З-этилкарбодиимида заметно снижается образование N-ацилмочевины. Кроме того, следует указать на гораздо меньшую по сравнению с ДЦГК степень рацемизации, определенную по тесту Янга (разд. 2.2.6.2). [c.155]

Тест Янга [372]. Для этого поляриметрического метода в качестве модельного пептида вначале использовался A -Leu-Gly-OEt. Лучшими свойствами обладает эфнр дипептида Bz-Leu-GIy-OEt,- полученный нз Вг-Leu-OH с Gly-OEt. Долю оптически чистого соединения можно рассчитать нз значений удельного вращения неочищенного продукта реакции. После омыления эфнра можно дополнительно определить количество DL-пептида фракционной кристаллизацией. Чувствительность также 1—2%, [c.175]

Тест Кемпа [373] разработан на основе тестовых систем Андерсона или Янга Кемпом и сотр. Благодаря применению техники изотопного разбавления чувствительность определения степени рацемизации намного повышена и составляет -0,001 — 1%. [c.176]

При реакции в присутствии карбодиимида с карбоксикомпонен-той, способной к образованию оксазолона, т. е. для простых (не уретановых) ациламинокислот и пептидов [65] возможна заметная рацемизация. Согласно тесту Янга на рацемизацию [реакция бен-зоиллейцина с гидрохлоридом этилового эфира глицина и триэтил-амином схема (35) , дициклогексилкарбодиимид в растворе дихлорметана дает примерно 50 % рацемического дипептидного производного [66]. В присутствии избытка триэтиламина получается более 80 % рацемата. [c.393]

Другие методы основаны на синтезе определенных пептидов и измерении степени рацемизации поляриметрически (тест Янга) [45], или на взвешивании рацемата после его количественного выделения дробной перекристаллизацией (тест Андерсона) [46], или на разделении соответствующих диастереомеров противо-точным распределением и измерением удельного вращения DL-фракции, если не достигается полное разделение (тест Кеннера) [47]. [c.174]

С ПОМОЩЬЮ ИК-спектрометрии. Применение для этой цели Ас-Leu-Gly-OEt (L-форма [аЬ —56,0°, с=1,2 в спирте, т. пл. 100— ЮГ DL-форма т. пл. 120—120,5°) позволяет провести лишь весьма приблизительное определение степени рацемизации менее 30, 30—70 и более 70% рацемизации (тест Янга) [2141, 2608] это объясняется плохой кристаллизуемостью частично ра-цемизованного соединения. Лучше работать с Bz-Leu-Gly-OEt (ь-форма [a]D —34,0°, с = 2,4 в спирте, т. пл. 156,6—157,5° DL-форма т. пл. 146°), так как даже неочищенный продукт реакции является кристаллическим веществом и получается в химически чистом состоянии [2566, 2566а]. Величина удельного вращения обычно служит для подтверждения полноты разделения продуктов реакции и выделения L- и oL-форм, например, противоточным распределением или фракционной кристаллизацией [47, 704]. [c.401]

Согласно данным Николя [1614], образующийся при триптическом отщеплении от цепи В сначала С-концевого аланина, а затем гептапептида дез-(октапептид 2з-зо)-инсулин обладает 95% активности природного инсулина (уменьшение содержания сахара в крови кролика). Однако позднее Янг и Карпентер [2610], а также Карпентер и Баум [462] не смогли воспроизвести эти результаты. Они показали, что дез-(октапептид)-инсулин, как и его смесь с гептапептидом, обладает по сравнению с инсулином всего лишь 4% активности в судорожном тесте на мышах активность дез-(октапептид)-инсулина в тесте на понижени. [c.471]

Диксон и Уордлоу [604] окислением 5-сульфонатов цепей А и В при pH 8,5—9,0 получили смесь веществ, активность которой составляла 1—2% активности инсулина. Ду и сотр. [618] для получения 5-сульфонатов цепей А и В восстанавливали инсулин сульфидом натрия и тетратионатом натрия. Продукты восстановления удалось разделить хроматографией на дауэксе 50-Х2 или зональным электрофорезом на целлюлозном порошке. Восстановление полученных таким образом 5-сульфонатов осуществляли обработкой избытком тиогликолевой кислоты. При аэробном окислении (pH 8,5) чистой цепи А или чистой цепи В не образуется никаких активных соединений. Напротив, в этих же условиях из смеси цепей А и В получается вещество, активность которого составляет 5—10% активности инсулина. Взаимодействие одной цепи, находящейся в сульфгидрильной форме, с 5-сульфонатом другой цепи также приводит к образованию инсулина. Более того, путем очистки продуктов окисления (1 г смеси с активностью 1,83 М. Е./жг) удалось выдел ить 28 мг кристаллического инсулина с удельной активностью 18,4 М. Е./жг (судорожный тест на мышах). Полученный таким образом инсулин не отличается от природного гормона по кристаллической структуре, а также по хроматографическому и электрофоретическому поведению. Идентичными оказались и пептидные карты продуктов ферментативного гидролиза этих двух соединений. Дальнейшее улучшение методики окислительной рекомбинации цепей А и В позволило Янгу и сотр. [1145] повысить выход инсулина до 50%. Эти данные свидетельствуют о том, что среди множества теоретически возможных продуктов окисления цепей А и В структура инсулина является предпочтительной. [c.474]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология