Декстран синий

Свободный объем (Уо) определяли по объему элюции декстрана синего с молекулярным весом 2000000. [c.50]

Перед вводом пробы на поверхность геля помещают либо кружок фильтровальной бумаги, либо перфорированный пластмассовый диск, либо специальное приспособление для введения проб, которое представляет собой пластмассовый цилиндр с дном из найлоновой сетки. Затем проверяют гомогенность хроматографического слоя, а также определяют свободный объем (Уо) и объем жидкости (У0 + У1). пропуская через колонку смесь декстрана синего (2 мг/мл) и феррицианида калия или какого-то другого окрашенного вещества с небольшими размерами молекул. [c.230]

Калибрование колонки. Как было сказано выше (см. Теорию метода ), для вычисления молекулярного веса веществ необходимо знать общий колоночный объем Уь и пустой объем Уо. Пустой объем колонки определяют при помощи любого высокомолекулярного вещества, желательно окрашенного. Шведская фирма Фармация рекомендует использовать препарат окрашенного декстрана — синий декстран 2000. [c.134]

Поскольку при элюировании фронт растворителя неразличим, скорость движения растворителя определяют и регулируют с помощью соединений-маркеров. Для этой цели служат окрашенные белки природного происхождения, например гемоглобин и цитохром с [9] или же белки с флуоресцентной меткой, присоединенной, например, с помощью флуоресцеинизотиоцианата [8]. Однако наиболее подходящими и хорошо различимыми маркерами являются, по-видимому, бычий сывороточный альбумин и альбумин человека, окрашенные амидо-черным В [14]. Декстра-новый синий, применяемый в гель-фильтрации на колонках для определения свободного объема, является плохим маркером, поскольку при фракционировании он имеет обыкновение давать хвосты . В зависимости от скорости движения маркеров регулируют угол наклона пластинки, задавая тем самым скорость движения элюента. При работе на сефадексе 0-200 скорость веществ, мигрирующих со свободным объемом (т. е. не проникающих в гранулы геля), не должна превышать 2 см/ч на гелях сефадекса с более высокой степенью сшивки скорость может быть несколько больше. Указать заранее оптимальный угол наклона для данного типа геля невозможно, поскольку он зависит от многих факторов, например от свойств партии геля и консистенции суспензии. Пробег для веществ, мигрирующих со свободным объемом, должен составлять не менее 15 см. При большем пробеге (до 30—40 см) наблюдается лучшее разрешение и вместе с тем не происходит заметного размывания зон. [c.260]

При правильной форме хроматографической зоны следует определить исключенный объем колонки Уо как объем элюата, вытекающий к моменту элюирования максимума пика. Если используются твердые сефадексы, то на их матрице иногда происходит частичная адсорбция синего декстрана. Адсорбированный синий декстран можно элюировать из колонки неболь-щим объемом раствора сывороточного альбумина. [c.370]

Необычное действие инъекции свежих яичных белков крысам (0,5— 1,5 мл на взрослую крысу), впервые отмеченное Паркером и Паркером [74], было детально описано Сели [75]. Этот синдром (который также вызывается инъекцией декстрана с молекулярным весом 100 ООО) характеризуется общим зудом, за которым следует выраженный отек конечностей, увеличение гема-токрита и понижение температуры тела. Действие более резко выражено у крыс с удаленными надпочечниками или после введения крысам тироксина яичные белки в этом случае вызывают сильный шок с сосудистым коллапсом [76, 77]. Действие белка на здоровых крыс было обусловлено главным образом увеличением капиллярной проницаемости, что можно установить непосредственно очень чувствительным кожным тестом с использованием синего Эванса. В этом случае было достаточно 0,05 мл раствора белка, содержащего [c.37]

Уо определяли хроматографированием синего декстрана 2000 определяли, добавляя триптофан к хроматографируемой пробе. Все белки восстанавливали и карбокси метилировали —СКВг — фрагменты белка, полученные после расщепления его цианбро [c.389]

Иногда при повторном нанесении препаратов ДНК через довольно большой промежуток времени бывает нужно как-то заранее отметить те дорожки секвенирующего геля, в которые уже были нанесены образцы, поскольку маркерные красители и ксиленоловый голубой и тем более бромфеноловый синий успеют отойти от старта на значительное расстояние и определение нужных колодцев на глаз чревато ошибкой. В этом случае в буфер для нанесения добавляется декстран голубой, представляющий собой краситель цибакроновый голубой, ковалентно сшитый с декстраном, имеющим молекулярную массу свыше 2 МДа. Таким образом, уже занятые колодцы оказываются отмеченными голубой полоской остающегося на старте декстрана голубого. [c.179]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология