Полоса хроматографическая на слое сорбента

Вторая группа параметров включает в себя кинетические и диффузионные параметры хроматографического опыта, определяющие процесс размывания хроматографической полосы и не связанные с селективностью непосредственно. К этим параметрам относятся размеры колонки (длина слоя сорбента и поперечное сечение колонки) размер и форма частиц сорбента давление, скорость потока природа газа-носителя температура колонки количество вводимой в колонку анализируемой смеси (доза) и способ ее введения содержание неподвижной жидкой фазы в колонке или эффективная толщина пленки неподвижной жидкой фазы, давление. Совокупность параметров хроматографического опыта, входящих во вторую группу, от которых, так же как и от селективности, зависит качество разделения, условно (для отличия от селективности) можно назвать общим термином — эффективность. Эффективность выражается высотой, эквивалентной теоретической тарелке (ВЭТТ), или числом тарелок N. [c.128]

В процессе хроматографирования, кроме движения молекул газа в направлении скорости потока, возникает продольная диффузия вдоль и навстречу потоку, диффузия к зернам и внутрь пор адсорбента. Поэтому молекулы одного из компонентов газовой смеси находятся в разных условиях и движутся вдоль слоя сорбента с различными скоростями. Это приводит к размыванию хроматографической полосы и к ухудшению разделения смеси, Поэтому в задачу теории хроматографии входит изучение законов движения и размытия хроматографических зон. [c.44]

Тонкослойная хроматография. Тонкослойная хроматография применяется при разделении очень малых количеств веществ на небольшом слое адсорбента за короткое время. Существуют два способа приготовления тонкого слоя сорбента — в закрепленном и незакрепленном слое. В качестве сорбента для приготовления закрепленных слоев применяют оксид магния, оксид алюминия, оксид кальция, карбонат магния, силикагель в смеси со связывающими компонентами. Связывающими веществами могут служить сульфат кальция, рисовый крахмал и вода. При приготовлении хроматографической пластинки с закрепленным слоем адсорбента на стеклянную пластинку (9 X 12 см, 13 X 7 см) наносят в виде кашицы смесь адсорбента со связующим веществом (5% от массы адсорбента) и водой. С помощью специального валика равномерно раскатывают эту смесь и делают слой толщиной 2 мм, затем пластинку высушивают при ПО—120°С. После этого на пластинке не должно быть трещин. При работе на тонком, незакрепленном слое можно использовать различные адсорбенты (наибольшее значение имеет оксид алюминия и силикагель). Для приготовления тонкого, незакрепленного слоя можно воспользоваться такими же стеклянными пластинками, как это описано выше. На пластинку насыпают слой сорбента, равномерно раскатывают его валиком, слегка прижимая к стеклу, снимая при этом избыток. Валик можно сделать из стеклянной палочки диаметром 8—10 мм и длиной несколько большей, чем ширина пластинки. На концы палочки надевают резиновые трубочки (длиной 1 см). Толщину их стенок подбирают так, чтобы при накатывании адсорбента образовывался слой до 1 мм. Трубочки должны находиться на таком расстоянии, чтобы после проведения валиком по пластинке оставались свободные от адсорбента полосы. Можно валик сделать металлический, причем он должен накладываться на пластинку для закрепления ее во время нанесения адсорбента удобно пользоваться специальным приспособлением (рис. 20). [c.27]

В соответствии с более строгой теорией скоростей размывание полос в хроматографической системе происходит вследствие трех главных причин 1) различная скорость движения по слою сорбента зон с различными концентрациями (термодинамическое размывание) 2) диффузия веществ (диффузионное размывание) 3) малая скорость процессов сорбции и десорбции (кинетическое размывание). [c.588]

Приведенное описание хроматографического разделения сложных газовых смесей, конечно, нельзя принимать буквально оно дает лишь примерное представление о сущности процессов, происходящих в колонке хроматографов. На движение компонентов газовой смеси влияет ряд факторов, нарушающих их равномерное движение. Газы движутся не в свободной трубке, где поток может быть равномерным и спокойным (ламинарным), а через извилистые ходы между частицами сорбента. Кроме того, в месте соприкосновения разных газов (на их границе) возникает частичное смешение их, вызванное взаимным проникновением (диффузией) молекул одного газа в другой. Движение полос по слою сорбента сопровождается поэтому размыванием, которое тем больше, чем больше их путь и время пребывания в колонке. Это, естественно, затрудняет разделение. Во всяком случае, оно не происходит так четко, как изображено на рис. 16. Некоторые факторы, которые во многом определяют аналитические возможности хроматографического метода, иногда трудно поддаются учету и математическому описанию. [c.63]

Сложный процесс перемеш ения хроматографической полосы по слою сорбента или катализатора описывается системой уравнений материального баланса и уравнений, учитывающих кинетические и диффузионные эффекты. [c.168]

Разделительная способность колонки онределяется селективностью НФ и размыванием хроматографических полос при движении вещества по слою сорбента. Более эффективной оказывается та колонка, в которой при прочих равных условиях хроматографические полосы размываются в меньшей степени. Причины размывания можно подразделить на термодинамические, диффузионные и кинетические. [c.357]

На практике нередко возникает такая ситуация, когда уже готовая колонка с аффинным сорбентом оказывается загруженной лишь на малую долю своей эффективной емкости. Весь препарат в этом случае сорбируется в верхнем тонком слое сорбента. Для динамического хроматографического фракционирования это хорошо, но в обычном варианте статической аффинной хроматографии такая ситуация невыгодна уже тем, что в процессе элюции, продвигаясь по всей длине колонки, полоса очищенного вещества будет расширяться хотя бы за счет продольной диффузии в элюенте. Проблема легко разрешается — перед началом элюции снабженную адаптором колонку следует перевернуть и элюировать обратным током жидкости. [c.403]

Раствор препарата наносят на поверхность слоя сорбента на расстоянии 0,5—1,5 см от того края пластины, с которого будет начинаться миграция элюента (при вертикальной установке — с нижнего). Препарат или препараты можно наносить в виде одного пятна, находящегося близ угла пластинки (для двумерной хроматографии), в виде серии равноотстоящих от края и равноудаленных друг от друга пятен (для сопоставления картин хроматографического фракционирования), для той же цели — в виде полосок длиной 5—I0 мм, поскольку разрешение близко расположенных полос на хроматограмме всегда лучше, чем так же расположенных пятен, [c.467]

Различие в сорбируемости разделяемых компонентов, которое существует всегда (нет двух компонентов с соверщенно одинаковой сорбируемостью), приводит к различию в скорости их перемещения вдоль слоя сорбента. Поэтому, если компоненты смеси вводятся одновременно в хроматографическую колонку, покидать ее они будут в разное время, т. е. будет наблюдаться эффект разделения смеси на отдельные компоненты. Если бы этот фактор был единственным, всегда наблюдалось бы разделение. К сожалению, кроме различия в сорбируемости, приводящего к разделению, в любой хроматографической системе действуют отрицательные факторы, вызывающие размывание, уширение полос разделяемых компонентов. Из-за этого размывания полосы наползают друг на друга, частично друг друга перекрывают, что ухудшает разделение. При небольшой разнице в сорбируемости, когда полосы в конце слоя сорбента находятся близко друг от друга или покидают колонку с небольшим интервалом времени, размывание может привести к полному перекрыванию полос, так что эффект разделения не будет наблюдаться визуально (рис. 1.12). [c.59]

До сих пор, рассматривая эффективность хроматографических колонок, считали, что проба вводится в ничтожно малом объеме подвижной фазы, сорбируется очень узким начальным слоем сорбента, образуя первоначальную полосу, которая затем под влиянием потока подвижной фазы начинает перемещаться по колонке, [c.80]

Сравнительно часто применяют хроматографию в тонких сло- ях, приготовленных из двух или более сорбентов. Пластинки, на которых полосы отдельных сорбентов расположены продольно, т. е. от старта к фронту, используют для подбора оптимальной хроматографической системы для данной смеси веществ. Отдельные полосы сорбентов отделяют друг от друга канавками, проведенными до самого стекла, потому что растворитель проходит через различные материалы с разной скоростью [122]. Чаще применяют пластинки с поперечным расположением слоев сорбентов. В этом случае используют разные свойства различных сорбентов, способствующие улучшению качества разделения веществ. Для быстрого нанесения сравнительно большого количества смеси веществ, например при анализе нестойких соединений, можно использовать следующий способ [138] [c.110]

В некоторых случаях применяют слои, разделенные продольными бороздами (царапинами) на ряд полос. На полученные таким образом изолированные друг от друга полосы наносят отдельные вещества или смеси веществ при этом царапины в слое препятствуют диффузии пятен в стороны. Разграничивающие полосы— канавки — наносят на слой вручную. Описаны также простые приспособления, облегчающие эту операцию. Одним из них является пластмассовая пластинка, положенная на стеклянные палочки. В пластинке имеются отверстия, в которые вставлены гвоздики острием наружу. Хроматографический слой подкладывают под эту пластинку, которую перемещают по направляющим стеклянным палочкам. При этом острия гвоздиков разрезают слой сорбента [213]. Для приготовления хроматографических пластинок такого типа можно использовать также толстые рифленые стекла, предназначенные для застекления дверей. [c.113]

Одновременно готовят хроматографическую пластинку. На гладкую, чисто вымытую и высушенную пластинку насыпают немного оксида алюминия и распределяют его по поверхности так, чтобы образовались полосы толщиной 1 мм. На подготовленную хроматографическую пластинку количественно переносят концентрат, полученный после испарения растворителя из экстракта. Концентрат помещают на середину полосы незакрепленного слоя оксида алюминия на расстоянии 0,6—0,7 см от нижнего края. На шесть полос каждой пластинки можно поместить концентраты из шести проб. При нанесении концентратов следует следить за тем, чтобы диаметр пятна не превышал 0,4 см. Поэтому концентрат наносят малыми порциями (по 0,005 мл) с помощью капилляра, выжидая каждый раз, пока не испарится растворитель. Не следует допускать, чтобы количество смолистых компонентов, нанесенных на одну полосу тонкого слоя оксида алюминия, превысило 0,1 мг, так как при перегрузке сорбента ухудшается разделение смеси. Хроматографическую пластинку с нанесенными на ее полосы пробами помещают под углом 20° в хроматографическую камеру, насыщенную парами подвижной жидкой фазы (смесь -гексана, тетрахлорида углерода и уксусной кислоты в соотношении 70 30 2 по объему), налитой на дно камеры слоем 0,5 см, [c.318]

Статические параметры определяют расстояние между хроматографическими полосами. К ним относятся природа сорбента, природа и количество растворителя, длина слоя сорбента и т. п. [c.13]

Приготовление исследуемых растворов. Навеску смеси 2 мг тщательно растирают, растворяют в 5 мл ацетона. Стеклянной палочкой осторожно, чтобы не повредить сорбента, проводят вдоль пластинки две полосы приблизительно на расстоянии 3 см каждая от края пластинки. По капле растворов, приготовленных описанным выше способом, при помощи капилляров (для каждого раствора свой капилляр) наносят в виде точек на стартовую линию. Стандартные растворы (раствор новокаина и анестезина в одном случае и раствор норсульфазола и сульфадимезина — в другом) наносят по краям пластинки, на расстоянии 3 см от края (рис. 13), а раствор с исследуемым веществом наносят посередине пластинки. Вещества наносят осторожно, чтобы не повредить слой сорбента. Пластинку оставляют на воздухе в течение 3—5 минут до испарения ацетона. Затем пластинку с нанесенным веществом помещают в хроматографическую камеру с растворителем. В качестве растворителя в данном случае применяют смесь хлороформа с метанолом (9 1). [c.54]

Левую часть хроматографической пластинки, на которую был нанесен исследуемый раствор, закрывают чистой стеклянной пластинкой. Правую часть пластинки, на которую была нанесена капля раствора свидетеля , опрыскивают смесью растворов бромфенолового синего и нитрата серебра. Через 10 мин правую часть пластинки опрыскивают 5%-ной уксусной кислотой и отмечают место расположения пятна бензофосфата. После этого с левой половины пластинки на уровне проявленного пятна бензофосфата снимают слой сорбента в виде полосы шириной около 2 см. Этот слой переносят в фарфоровую чашку и три раза настаивают с хлороформом (порциями по 5 мл) в течение 15 мин. Хлороформные вытяжки соединяют и выпаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 1 мл этилового спирта и идентифицируют в нем бензофосфат с помощью микрокристаллоскопических реакций. [c.109]

Известно, однако, что концентрация веществ в хроматографической полосе непостоянна и по мере ее продвижения вдоль слоя сорбента в колонке уменьшается за счет раздвижения полос отдельных компонентов и за счет размывания этих полос. [c.157]

Из существующих хроматографических методов анализа примесей наиболее рациональным является метод ступенчатой хроматографии Он заключается в том, что на слой сорбента наносится сравнительно большой объем пробы (Уо> 1, где [г — ширина полосы на сорбенте) и на выходе детектор сигнализирует наличие ступеньки. [c.126]

Как было показано выше, при нелинейной изотерме (т. е. при константе обмена, отличной от единицы) происходит размывание адсорбционного и десорбционного фронтов, становящееся еще более заметным в неравновесных условиях. В соответствии с этим координаты краев полосы зависят, например, от количества введенного в колонку вещества. Наоборот, как показали, в частности, Л. И. Тихонова и автор статьи [115], в очень большом, насчитывающем примерно 10 порядков, интервале концентраций ионов металлов положение максимума выходной кривой не зависит от количества введенного в колонку вещества. Не менее важно и то, что как в адсорбционной [116], так и в ионообменной [114, 117) хроматографии скорость перемещения точки максимума выходной кривой не зависит от кинетики сорбции, т. е. ее движение описывается законами равновесной хроматографии. Это вытекает и из теоретических представлений [118]. Таким образом, при хроматографическом нахождении величин констант обмена достаточно определить скорость перемещения максимума концентрации ио слою сорбента [114] или, что удобнее практически, координату (объем) максимума выходной кривой. [c.114]

При движении полос веществ по слою сорбента в хроматографической колонне происходят два основных процесса разделение и размывание. Размывание полос в насадочных хроматографических колонках происходит под действием различных диффузионных причин Один из самых больших вкладов в размывание вносит молекулярная диффузия. Поставив опыт таким образом, чтобы по возможности исключить другие виды диффузионных размываний, по ширине полос можно определить величины коэффициентов молекулярной диффузии. Наиболее точные результаты получаются при измерении ширины размывания полос в ненаполненных колоннах. Сам по себе такой метод измерения по существу не связан с методом хроматографии. Однако измерения удобно проводить на хроматографической [c.235]

Распространение хроматографического метода в значительной мере определяется разнообразием его вариантов. Фракционирование веществ на основе хроматографического метода может быть проведено в процессе перемещения раствора в колонке, заполненной сорбентом, или через полосу фильтровальной бумаги, или через тонкий слой зернистого материала. Обмен вещества между раствором и твердой фазой в различных вариантах хроматографических методов основан на молекулярной адсорбции, ионном обмене, распределении веществ между подвижным растворителем и неподвижным, находящимся в порах твердого материала. Наряду с хроматографией жидких растворов последнее время все большую роль начинает играть хроматография газовых смесей. [c.109]

Это 1 0. гогает прп выработке методик хроматографического анализа. Движение полосы по слою сорбента, факторы, сопутствующие ему и вызываютцие размывание полос, н условия, необходим ,le для разде.дения компонентов газовой смесн, являются предметом теории хроматографии они нзлоа ены в ряде статей, сборниках и кии-r i. но хроматографии газов, [c.46]

В данной книге подробно рассмотрены пневматический детектор, влияние параметров опыта на показания детектора, определение формы распределения концентрации хроматографической полосы по слою сорбента и другие вопросы, недостаточно освещенные в литературе. Даны описания наиболее распространенных лабораторных и промышленных хроматографов, которые в настоя-[цее время получили птирпкое распространение. [c.4]

Препаративное хроматографическое разделение веществ связано, как правило, с перегрузкой колонки сорбатом и работой в нелинейной области изотермы. Ввиду чрезвычайной сложности и многообразия процессов, сопровождающих движение полосы вдоль слоя сорбента, весьма затруднительно их полное описание с помощью системы соответствующих дифференциальных уравнений. Из всей совокупности факторов объектом рассмотрения в данной работе нами избрано изучение связи между изотермами распределения и некоторыми параметрами полос. Поэтому для выявления вклада в размытие полосы, вносимого нелинейностью изотермы распределения, мы введем упрощающие допущения о практическом отсутствии влияния процессов диффузии и кинетических факторев, как это сделано в ряде работ [1,2]. Тогда уравнение материального баланса для элементарного слоя длиной сИяс колонки единичного сечения можно представить следующим образом [c.15]

Люминесцентная, или флуоресцентная, хроматография (см. 173) позволяет обнаруживать по флуоресценции хроматографические полосы различных неокрашенных веществ на колонках сорбента или на хроматографической бумаге, или в тонких слоях сорбента. Хроматографическая полоса анализируемого вещества обнаруживается по яркой флуоресценции. Если применять флуоресцирующий сорбент, то полосы сорбируемого анализируемого вещества можно иногда обнаружить по тушению флуоресценции в виде темных полос на общем светящемся фоне. [c.481]

НОГО размера для установки 5-камеры [10]. Описано также одновременное элюирование одной хроматограммы в пяти различных системах растворителей хроматографическая камера разделена на пять частей, каждая из которых снабжена своей системой растворителей, подаваемой на хроматограмму посредством полоски фильтровальной бумаги. Хроматограмму разграничивают на 5 полос одинаковой ширины с помощью какого-нибудь острого предмета. После нанесения образца смеси на стартовую линию каждой полосы хроматограмму прикрывают специальной крышкой с шестью продольными полипропиленовыми барьерчиками высотой 1 мм, точно совпадающими с канавками в слое сорбента. При этом образуется 5 закрытых полостей [165]. [c.101]

Используют готовые хроматографические пластинки Silufol (ЧССР). Слой сорбента на пластинках предварительно отмывают от примесей следующим образом. К верхней части пластинки прикрепляют несколько листов фильтровальной бумаги (размером 20Х20см) и помещают пластинку нижним концом в камеру со смесью 3 М НС1 — ацетон (1 99). Пластинку выдерживают в камере до тех пор, пока вся фильтровальная бумага не пропитается растворителем, затем высушивают и элюируют примеси ацетоном на высоту, равную длине пластинки. Из обработанной таким образом и высушенной пластинки вырезают фигурные полосы (в соответ-20 [c.97]

Отмечалось [52], что для получения воспроизводимых результатов при хроматографии в тонких слоях при описании экспериментов желательно указывать вид и тип хроматографических камер, материал, из которого эти камеры сделаны, способ приготовления адсорбционных слоев, тип и качество адсорбента, вид и размер подложки (стекло, пластик и т. п.), толщину слоя сорбента, способ его активации, условия сушки сорбционного слоя, количество хроматографируемых пластинок в камере, способ и метод нанесения на пластинку с сорбентом анализируемого вещества (пятно, полоса), количество испытуемого вещества и положение стартовой линии, способ хроматографирования (восходящая, нисходящая или горизонтальная хроматография), состав применяемых растворителей, степень насыщения камеры растворителем, температуру и влажность, при которых проводится разделение, способ идентификации анализируемых веществ на пластинке (погружение, опрыскивание или др.), использованные для этой цели реагенты, цвет и усто1 чивость окрашенных пятен, чистоту и квалификацию химических реактивов, а также другие детали эксперимента. [c.38]

Для практического осуществления адсорбционных процессов и в частности для хроматографического разделения смесей важное значение имеет степень размывания фронта концентраций (хроматографических полос). Как известно, это размывание может быть связано как с медленностью процессов массопередачи (внешней и внутренней диффузии), так и с продольным перемешиванием. Оценка относительной роли каждого из этих эффектов необходима для выбора оптимальных условий проведения процесса и рационального подбора адсорбента. Наиболее полно и правильно такая оценка может быть сделана на основании данных, характеризующих в отдельности различные виды массоперено-са в слое сорбента. До последнего времени исследовались, главным образом, процессы внешней и продольной диффузии. Накопленный к настоящему времени материал по внешней и продольной диффузии позволяет характеризовать различные системы, независимо от их конкретных свойств, так как установленные в этой области закономерности имеют общее значение [1]. В противоположность этому внутреннедиффузионная стадия процессов сорбции изучена совершенно недостаточно как в отношении обших закономерностей, характеризующих данный процесс, так и в отношении накопления конкретного экспериментального материала. Недостаток такого рода данных особенно ощущается в связи с тем, что внутреннедиффузионные процессы в последнее время приобретают все большее значение. Результаты исследования внутреннедиффузионной стадии кинетики вместе с полученными ранее данными по внешней и продольной диффузии позволят охарактеризовать весь процесс в целом и сформулировать требования к адсорбенту, важные как для выбора оптимальных условий проведения процессов разделения, так и для усовершенствования технологии получения сорбентов. [c.274]

Важной характеристикой хроматографического опыта является величина удерживаемого объема (Fj), т. е. объема газа-носителя, который надо пропустить, чтобы извлечь из сорбента данный компонент. Из уравнения (2) следует, что время, которое потребуется компоненту, чтобы пройти через слой сорбента (или полосу), на.чтлваемое временем удерживания, [c.312]

Хроматографирование. Чтобы уменьшить краевой эффект, с краев хроматографической пластинки вдоль движения растворителя (со стороны 12 см) снимают слой сорбента по 2—3 мм. Затем пластинку разделяют полосами на четыре равные части. На 1-ю и 3-ю полосы на расстоянии 1.5 см от нижнего края наносят по 10 мкл стандартных растворов Б и В , т, е, 0,001 и 0,005 мкг фоксима, на 2-ю и 4-ю — 2 и 10 мкл соответственно пробам. Пластинку с нанесенными растворами помещают в хроматографическую камеру, в которую налита смесь гексана и ацетона (9 1), за 30 мин до хроматографи- [c.98]

Пробы соединений, разделенных в газовом хроматографе, наносят на стартовую линию слоя сорбента. Поток газа из хроматографической колонки делят на две части (рис. 8-1) меньшую часть направляют в пламенно-ионизационный детектор, а основную часть — на слой сорбента. В зависимости от типа анализа на пластинку со слоем сорбента можно наносить только один хроматографически разделенный компонент, его часть или все компоненты. Можно различать тиетоды импульсного нанесения проб (точками) и непрерывного нанесения проб (полосой). [c.326]

Пропускание сорбирующего слоя А находится в интервале значений от (для хроматографической бумаги) до 1 (для некоторых пленок). А является функцией длины волны применяемого излучения. При сканировании окрашенного вещества пропускание слоем сорбента уменьшается в области поглощения вещества. Соответствующая область спектра может достигать 50 нм и более. Для низких концентраций, применительно к которым справедлив закон Ламберта — Бера, можно использовать относительно широкий интервал длин волн облучающего луча АХс и оперировать со средними величинами пропускания для этой полосы. Использование широкой спектральной области увеличивает величину сигнала детектора, увеличивая отношение полезного сигнала к помехам (шуму). Для низких концентраций среднее поглощение в зоне линейно зависит от концентрации вещества, в этом случае форма зоны и расиределение в не11 вещества не играют важной роли. Измеионие толщины слоя приводит [c.89]

Количество необходимого материала для разделения определяют по известной или найденной емкости данного сорбента с некоторыми допущениями в отношении экспериментальных условий, сродства сорбируемого материала и т. д. Обычно используется избыточное количество сорбента, и адсорбированные вещества образуют полосу только в верхней части хроматографического слоя, поэтому можно работать с небольшими колонками. Как и при гедь-фяльтоации, колонки набивают так, чтобы слой сорбента был равномерным и проницаемым для подвижной фазы. [c.220]

Различие сорбируемости компонентов смеси особенно ярко проявляется при медленном движении смеси через слой зерен сорбента. Лучше адсорбируемое вещество сильнее и поэтому дольше удерживается поверхностью и, следовательно, движется через слой медленнее. Это явление было открыто в 1903 г. русским ботаником М. С. Цветом при разделении экстракта пигментов, выделенных из листьев растений. Введя окрашенный раствор в колонку с адсорбентом (А12О3), при промывании колонки растворителем Цвет наблюдал, как окрашенная полоса разделяется на ряд полос разного цвета, движущихся с разными скоростями. Каждый компонент смеси был представлен отдельной полосой и мог быть выделен в чистом виде. Поскольку в этих опытах о разделении смеси свидетельствовала различная окраска полос, Цвет назвал разделение хроматографическим. Это название сохранилось и поныне, хотя современные методы обнаружения, идентификации и количественного определения компонентов смеси не связаны с окраской веществ, очень многообразны и часто сложны. [c.232]

Посторонние примеси. Проводят испытание, как описано в разделе Тонкослойная хроматография (т. 1, с. 92), используя в качестве сорбента силикагель Р4 и готовя покрытие пластинки следующим образом к 8 г силикагеля Р4 добавляют 16 мл воды, содержащей 1 г формата натрия Р, и покрывают пластинки слоем 0,5 мм толи нной. В качестве подвижной фазы используют смесь 50 объемов хлороформа Р, 50 объемов этанола ( — 750 г/л) ИР и 7 объемов муравьинной кислоты (—1080 г/л) ИР. Наносят на пластинку (в форме полосы шириной 4 см) 20 мкл раствора в уксусной кислоте ( — 90 г/л) ИР, содержащего 72 мг испытуемого вещества в 1 мл (раствор А). После извлечения пластинки из хроматографической камеры дают ей высохнуть на возду хе и оценивают хроматограмму в ультрафиолетовом свете (254 нм). Отмечают прямоугольные участки вокруг каждой группы полос выше и ниже основной полосы, количественно переносят отмеченные участки силикагеля в пробирку с притертой пробкой, добавляют 5 мл метанола Р, встряхивают в течение 15 мин, центрифугируют и измеряют поглощение прозрачной надосадочной жидкости в кювете толщиной 1 см при максимуме около 256 нм. Для приготовления контрольного раствора аналогичным образом обрабатывают соответствующего размера участки силикагеля, соседствующие с ранее извлеченными участками. Готовят раствор Б следующим образом растворяют 0,14 г испытуемого вещества в достаточном для получения 100 мл количестве уксусной кислоты ( — 90 г/л) ИР и разводят 200 мкл этого раствора до 50 мл метанолом Р. Поглощение элюированного раствора А не должно быть больше поглощения раствора Б. [c.78]