Хроматограмма аминокислот

Практически в любом биохимическом исследовании очень важно уметь обнаруживать и точно определять ничтожные количества специфических соединений. Чаще всего для этого используют особые реагенты— индикаторы, которые при взаимодействии со специфическими соединениями определенным образом окрашиваются. Например, для выявления на хроматограмме аминокислот или пептидов, присутствующих в очень малых количествах (доли микромоля), хроматограмму опрыскивают нингидрином (дополнение 8-Е). Если выявляемое соединение находится в растворе, то по интенсивности окрашивания можно определить его количество. Фенолы и концентрированная серная кислота окрашивают сахара (в растворе или на хроматографической бумаге) в красный цвет. Эта реакция лежит в основе колориметрического анализа углеводов. Восстанавливающие сахара выявляют на хроматограммах, опрыскивая последние раствором нитрата серебра. [c.179]

Рис. Хроматограммы аминокислот, полученные при использовании растворителя н. бутиловый спирт — уксусная кислота — вода (4 1 1)

Для получения двумерной хроматограммы аминокислот вначале через бумагу с нанесенными аминокислотами пропускают подвижный растворитель — н-бутанол — уксусная кислота — вода. Когда фронт растворителя [c.113]

Р и с. 165. Распределительная хроматограмма аминокислот в кислом гидролизате рибонуклеазы, окисленной надмуравьиной [c.337]

Для получения двумерной хроматограммы аминокислот вначале через бумагу пропускают смесь н-бутанола, уксусной кислоты и воды когда фронт растворителя дойдет до нижнего конца листа, хроматограмму вынимают из камеры, высушивают на воздухе в течение 1,5—2 ч или в сушильном шкафу в течение 10— Ъ мин при температуре 60 °С (см. стр. 117). Затем хроматограмму переносят в другую камеру и через нее пропускают второй растворитель—водонасыщенный 80%-ный раствор фенола, в направлении, перпендикулярном движению первого растворителя. Второй растворитель пропускают до тех пор, пока он не дойдет до конца бумаги. После удаления фенола из бумаги описанным выше способом хроматограмму проявляют 0,2%-ным раствором нингидрина в ацетоне. [c.147]

Рис. 7.15. Ионообменная хроматограмма аминокислот, полученная с детектором по теплоте адсорбции.

Рис. 2. Хроматограммы аминокислот пасоки контрольного растения № 37 а — медленно движущиеся аминокислоты, б — быстро движущиеся аминокислоты

Коэффициент распре-Рис. 1. Хроматограмма аминокислот, деления является характерной величиной для каждой аминокислоты и постоянен при данных условиях опыта (растворитель, температура, сорт бумаги и др.). [c.22]

Фиг. 5. Схема двухмерной хроматограммы аминокислот на бумаге [159].

Расчет хроматограмм аминокислот требует значительного времени 1,5—2 часа, т. е. времени, сопоставимого с временем анализа на быстродействующих аминокислотных анализаторах. Очевидно, что в этом случае целесообразно программирование подобного расчета и выполнения его на быстродействующей счетной машине. [c.149]

Хроматограмма аминокислот на колонке высокого разрешения (рис. 11) показывает возможность ускорения анализа обычных аминокислот, в связи с тем что эти аминокислоты (их пики на хроматограмме показаны жирной линией) отстоят достаточно далеко друг от друга (Кк 2). Поскольку, как это было показано выше, для рутинного анализа аминокислот Кв не должен превышать 2 единиц, имеется возможность сокращения длины колонки и, следовательно, времени анализа в 2—3 раза. Еще лучших результатов можно достигнуть, применив градиентную элюцию, позволяющую подобрать оптимальные условия для хроматографии смеси аминокислот, т. е. добиться ЛГд =2 для каждой соседней пары аминокислот и, кроме того, уменьшить ширину пиков. Использование градиентной элюции дает возможность также избавиться от ступенчатого повышения окрашенного фона (базовой линии) при смене буферного раствора, как это видно на рис. 11. Поскольку это повышение фона связано с десорбцией аммиака со смолы при резком повышении ионной силы и pH буферного раствора, то постепенное изменение состава элюента при градиентной хроматографии не должно вызывать указанного неприятного явления. [c.159]

Рис. 3. Хроматограммы аминокислот пасоки растения № 38, обработанного гиббереллином а, б — то же, что на рис. 2

Качественный анализ хроматограмм аминокислот и пептидов. В бумажной хроматографии применяются следующие способы качественного анализа хроматограмм аминокислот и пептидов. [c.147]

Другим способом качественного анализа хроматограмм аминокислот является измерение коэффициентов движения 7 ir и сравнение полученных значений со значениями для извест-ны х аминокислот. [c.148]

Рис. 13.7. Хроматограммы папаверина (/) и Рис. 13.8. Хроматограмма аминокислот.

Рис. 176. Двумерная хроматограмма аминокислот и некоторых ДНФ-аминокислот,

Рис. 39. Хроматограмма аминокислот из граптолитов

Как уже упоминалось выше, оригинальную хроматограмму можно сохранять после специальной обработки. Хроматограммы аминокислот были законсервированы Баролье 12] путем заливки слоя 4 %-ным раствором коллодия, к которому добавлено 7,5% глицерина. Адсорбционный слой может быть снят с пластинки в виде пленки. [c.50]

На рис. 7-8 и 7-9 приведены полученные при градиентном элюировании хроматограммы аминокислот, содержапщхся в соевом соусе и сакэ [9]. Чтобы перевести присутствующие в этих образцах аминокислоты в дансилпроизводные pH раствора пробы доводили до 9,7 и обрабатывали реагентом 1 - 2 ч при 38°С. Благодаря высокой концентрации аминокислот в этих объектах объем вводимой пробы мог не превышать 0,02 мкл. Ввод осуществлялся краном-дозатором. Объем анализируемых проб соответствовал 1,3 нл соевого соуса и И нл сакэ. [c.166]

С.татья посвящена обсуждению возражений Паттона и др., считающих, что на бумажных хроматограммах аминокислот < ).луореспелш1Я вызывается продуктами химического взаимодействия аминокислот с к.летчаткой бумаги. [c.23]

II треонина, что приводит к артефактным пикам иа хроматограммах аминокислот [266]. [c.251]

Рис. 3.11. Двумерная хроматограмма аминокислот, входящих в состав белка (воспроизведена с некоторыми модификациями из работы Anal. hem. 1953 25 396).

Справочник химика 21

Химия и химическая технология